免疫工具鼠怎么选？巨噬细胞、树突状细胞与T/B/NK细胞亚群指南

免疫细胞Marker与工具鼠选型背景

免疫细胞种类繁多，如何从复杂的细胞群体中识别自己关注的亚群，是许多免疫学研究面临的难题。

研究者常借助细胞标记分子（Marker）识别免疫细胞。例如，F4/80常用于识别小鼠组织巨噬细胞，CD11b常见于单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等髓系细胞，CD11c则常用于识别树突状细胞（DC）。但单核细胞、巨噬细胞与树突状细胞之间存在表型重叠，单靠一个Marker，往往难以区分不同的免疫细胞群体[1]。

图1. 人树突状细胞主要亚群的表面标记与功能特征

（a）浆细胞样树突状细胞（pDC）、（b）1型常规树突状细胞（cDC1）和（c）2型常规树突状细胞（cDC2）的主要表面标记、病原体感应分子及功能特征[2]。

赛业免疫工具鼠涵盖细胞驱动、荧光报告及DTR细胞清除等多种工具。如何根据自己的研究需求选型？可以从以下三个方面入手。

三步选型法

明确目标细胞：是组织巨噬细胞、树突状细胞，还是T、B、NK细胞？

明确实验目的：需要进行遗传操作、观察荧光信号，还是清除目标细胞？

确认适用条件：核对品系的细胞覆盖范围、遗传背景、诱导要求及验证数据。

常见工具怎么选？Cre/Dre驱动鼠用于特定细胞相关的遗传操作；荧光报告鼠通过荧光信号帮助观察目标细胞或相关基因表达；DTR工具则可在满足相应表达条件后，结合白喉毒素（DT）开展目标细胞清除研究。

单核细胞与巨噬细胞：从泛髓系标记到细胞亚群

不同组织、不同来源的巨噬细胞在标记与功能上存在差异，并非所有巨噬细胞都属于同一群体。以肝脏为例，Kupffer细胞与单核细胞来源的巨噬细胞可通过CD163、TIMD4、MARCO等标记加以区分[3]。

树突状细胞与抗原呈递：从泛DC标记到特定亚群

CD11c常用于识别树突状细胞，但单独使用CD11c难以充分区分不同细胞亚群。例如，XCR1可用于指向1型常规树突状细胞（cDC1）；ZBTB46则常用于识别常规树突状细胞（cDC）及其定向前体，但不标记浆细胞样树突状细胞（pDC）[5-6]。

T、B、NK细胞：聚焦关键淋巴细胞群

不同淋巴细胞具有不同的谱系标记与功能特征。例如，GZMB与细胞毒性淋巴细胞有关，IFN-γ常见于Th1、部分活化CD8 T细胞和NK细胞，而CD19、MB1和CD23则可用于不同B细胞群体的研究。

使用说明：CreERT2与DreERT2品系通常需要他莫昔芬诱导；LSL-DTR等系统需先满足相应的Cre重组条件，再结合DT处理。

选对细胞，再选合适的工具

免疫工具鼠的选型，可以从目标细胞出发，再根据实验目的选择相应的驱动、荧光报告或细胞清除工具。

研究1型常规树突状细胞（cDC1）：可优先了解Xcr1-IRES-iCre。

研究组织驻留巨噬细胞：可根据关注的细胞群，比较Cd163-CreERT2、Timd4-P2A-iCre、Marco-EGFP-P2A-CreERT2等工具。

研究NK细胞：可关注Ncr1-IRES-CreERT2和Klrd1-P2A-iCre，并结合目标细胞范围选型。

研究B细胞谱系：可根据发育阶段与实验目的，比较Cd19、Mb1或Fcer2a相关工具。

需要注意，同一标记可能覆盖多个细胞群，同一细胞群也可能因组织、发育阶段或炎症状态不同而表现出不同的表达特征，实际应用应结合品系构建信息确认。

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参考资料

[1]Guilliams M,Ginhoux F,Jakubzick C,et al.Dendritic cells,monocytes and macrophages:a unified nomenclature based on ontogeny.Nat Rev Immunol.2014;14(8):571–578.doi:10.1038/nri3712.

[2]Collin M,Bigley V.Human dendritic cell subsets:an update.Immunology.2018;154(1):3-20.doi.org/10.1111/imm.12888

[3]Nusse Y,Kubes P.Liver macrophages:development,dynamics,and functions.Cell Mol Immunol.2025;22:1178–1189.doi:10.1038/s41423-025-01298-3.

[4]Liu Z,Gu Y,Chakarov S,et al.Fate Mapping via Ms4a3-Expression History Traces Monocyte-Derived Cells.Cell.2019;178(6):1509–1525.e19.doi:10.1016/j.cell.2019.08.009.

[5]Anderson DA III,Murphy KM,Briseño CG.Development,Diversity,and Function of Dendritic Cells in Mouse and Human.Cold Spring Harb Perspect Biol.2018;10(11):a028613.doi:10.1101/cshperspect.a028613.

[6]Satpathy AT,KC W,Albring JC,et al.Zbtb46 expression distinguishes classical dendritic cells and their committed progenitors from other immune lineages.J Exp Med.2012;209(6):1135–1152.doi:10.1084/jem.20120030.

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