基因编辑大鼠
基因编辑大鼠定制服务
为什么选择赛业开展基因编辑大鼠项目
研究目标导向的项目设计
围绕基因功能验证、疾病模型构建和药效研究目标进行定制分析，帮助团队更快确认适合的编辑策略、交付形式和验证路径。
覆盖多种常用大鼠品系
可结合不同研究方向选择合适背景品系，兼顾繁殖表现、表型稳定性和下游应用需求，为后续模型放大和实验设计提供基础。
从模型构建到后续服务衔接
除动物模型定制服务外，还可配合繁育扩群、保种及表型评估，便于项目进入后续功能验证和转化研究阶段。
过程透明，便于项目管理
从需求沟通、方案确认到定期进展反馈和模型交付，项目路径清晰，方便科研团队、药企研发团队和平台负责人同步节点。
赛业生物可提供的大鼠品系
对于有大鼠定制需求的项目，品系选择往往直接影响繁育效率、表型稳定性和后续应用场景。以下为赛业可提供的常用品系示例，便于在项目早期更快判断合适的研究背景。
| 品系 | 特点 | 应用领域 |
|---|---|---|
| SD大鼠 | 产仔多、生殖力强、生长发育快、抗病能力强 | 营养学、内分泌学、毒理学 |
| Wistar大鼠 | 性周期稳定、繁殖力强、性情温顺、抗病性强 | 生理学、药理学、病理生理学 |
| F344（CDF）大鼠 | 血清胰岛素低、脑垂体大、肿瘤易移植 | 癌症发生研究 |
| Brown Norway大鼠 | 褐色毛发、遗传学模式品系 | 自身免疫病、过敏性疾病研究 |
完全性基因敲除大鼠
完全性基因敲除大鼠是采用基因编辑技术，造成目的基因的功能区域被敲除，获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的大鼠模型。针对需要快速建立全身性功能缺失模型的研究，赛业的基因编辑大鼠定制平台可支持从项目设计到模型交付的整体推进。赛业生物采用独特的受精卵处理方式使受精卵偏好同源重组修复路径，进而提高同源重组效率，制作周期快至3个月。
建系原则与流程
1. 通过构建打靶载体，并将载体显微注射至受精卵，获得测序鉴定阳性的F0代杂合子大鼠。
2. F0代杂合子大鼠与野生型大鼠进行交配，获得PCR和测序鉴定阳性的F1代杂合子大鼠。
3. 选择来自同一只F0代大鼠，基因型一致的F1代大鼠，达到性成熟后进行互配，可获得F2代大鼠。对获得的F2代大鼠进行PCR及测序鉴定，理论上，F2代大鼠中25%为纯合子，50%为杂合子，25%为野生大鼠。
条件性基因敲除大鼠
条件性基因敲除大鼠是通过把两个LoxP位点插入到目的基因的一个或几个重要外显子的两端以制备出flox大鼠，该flox大鼠在与表达Cre重组酶大鼠杂交之前，该基因表达正常；当flox大鼠与组织特异性表达Cre酶的大鼠进行杂交后，可实现在特定的组织或细胞中敲除该基因，而在其它组织或细胞中该基因表达正常。
建系原则与流程
1. 与野生型大鼠杂交：阳性大鼠（+/flox）与野生型大鼠（+/+）杂交，获得F1代杂合子大鼠（+/flox）。
2. 挑选一对F1代杂合子大鼠（+/flox）进行自交，获得F2代纯合子大鼠（flox/flox）。
基因敲入大鼠
基因敲入大鼠是利用基因编辑技术，针对靶基因设计、构建相应的引导分子和相关元件引入特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变（模拟人类遗传疾病模型）或将报告基因（如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等）引入目的基因的特定位点，从而可以通过报告基因来跟踪目标基因的表达，也可以用报告基因取代大鼠本身的基因，使KO/KI同时发生。对于需要后续结合功能读出或机制分析的项目，还可进一步衔接表型分析服务。
建系原则与流程
1. 通过构建打靶载体，并将载体显微注射至受精卵，获得测序鉴定阳性的F0代杂合子大鼠。
2. F0代杂合子大鼠与野生型大鼠进行交配，获得PCR和测序鉴定阳性的F1代杂合子大鼠。
3. 选择来自同一只F0代大鼠，敲入位点一致的F1代大鼠，达到性成熟后进行同胞交配，可获得F2代大鼠。
4. 对获得的F2代大鼠进行PCR及测序鉴定，理论上，F2代大鼠中25%为敲入位点一致的纯合子大鼠，有50%为只有一条染色体敲入的杂合子大鼠，有25%为野生型大鼠。
转基因大鼠
转基因大鼠制作最常用的一种方法是DNA原核显微注射。DNA原核显微注射是指将外源DNA通过显微注射的方法注射到受精卵的原核内，注射DNA整合到大鼠受精卵的基因组中，并稳定遗传给后代。赛业所使用的PiggyBac系统DNA显微注射，制备的转基因鼠基因表达阳性率为常规质粒DNA显微注射的2倍以上！
建系原则与流程
1. 原核显微注射获得PCR阳性F0代杂合子大鼠。原核显微注射导入的目的基因是将目的基因随机整合到大鼠的基因组，首代转基因大鼠（F0）将会有不同的整合位点，整合基因的拷贝数可能在不同的首代转基因大鼠中也不同。因此，每只F0代大鼠需要作为一个独立的谱系研究，并且与其它F0代大鼠分开进行繁殖。
2. F0代大鼠达到性成熟后（8周）与野生型大鼠进行交配，获得F1代大鼠。
3. 对交配获得的F1代大鼠进行基因型鉴定，理论上，F1代大鼠中有50%为转基因杂合子大鼠，50%为野生型大鼠。
注意事项：
- 每只F0代鼠基因型都不一样，不能进行F0之间的自交，只能先与野生型交配，筛选出基因型一致的F1。
- 假如F0代有多个位点的外源基因整合，F1还有可能有多种基因型。
- 获得F1鼠后，可以进行蛋白表达鉴定，优先筛选出表达的鼠后再进行后续的传代和保种。
基因编辑大鼠服务流程
专业技术顾问团队与您详细沟通定制需求，包括定制类型、具体基因以及交付情况等内容，确保精准理解您的研究目标。
专业技术团队针对您的定制需求进行个性化项目分析，制定专属实施方案，并与您沟通确认，敲定最终执行细节。
方案确认后，双方签订定制服务合同，明确权责、周期与交付标准，正式启动项目。
团队严格按照确定的分析方案及合同内容，推进基因编辑大鼠模型的构建工作。
技术顾问会根据您的需求，定期向您同步项目进展，确保您随时掌握项目动态。
项目达到预定要求后，我们将提前通知您，完成模型交付的准备工作。
模型交付完成后，我们会出具项目结题报告，并提供后续饲养、繁育及鉴定建议。
基因编辑大鼠服务常见问题
1. 什么情况下更适合选择基因编辑大鼠，而不是小鼠？
当研究更依赖体型、组织取样量、行为学读出、心血管或代谢表型观察时，大鼠往往更适合作为模型载体。对于希望建立更贴近特定生理或药效评价场景的团队，基因编辑大鼠服务通常更具应用价值。
2. 赛业可以提供哪些类型的基因编辑大鼠模型？
当前页面所列服务覆盖完全性基因敲除、条件性基因敲除、基因敲入和转基因大鼠等常见构建方向。具体采用哪种策略，通常需要结合靶点特征、研究目的和预期交付形式综合确定。
3. 项目早期如何选择合适的大鼠品系？
品系选择通常需要结合研究领域、繁殖表现、基础生理特征以及后续实验方案来判断。像 SD、Wistar、F344（CDF）和 Brown Norway 等常用品系，各自更适合不同的应用方向，项目沟通阶段可先完成品系匹配再进入方案确认。
5. 基因敲入或转基因大鼠完成后，是否可以继续做下游验证？
可以。对于需要进一步确认模型功能表现的项目，可在模型交付后结合表型分析、后续繁育或其它配套研究安排，帮助团队更系统地开展功能验证和应用研究。
6. 这类大鼠定制项目更适合哪些研究团队？
通常适用于高校课题组、科研院所、药企研发团队以及需要疾病模型、药效验证或机制研究工具的平台团队。尤其是对于需要明确交付节点和后续支持的项目，系统化的服务流程更有利于提升执行效率。
