敲除细胞基因研究参考：Trp53基因敲除小鼠与肿瘤机制

从"坏蛋"到"守护者"的华丽转身

在基因世界里，有这样一位"明星"：它曾被误认为是肿瘤的帮凶，却在十年后华丽转身成为"基因组守护者"。它就是今天的主角——Trp53基因（也称为p53）。

故事要从1979年说起。那一年，科学家们首次发现了p53蛋白，它总是和能引发肿瘤的SV40病毒形影不离。当时的研究者们理所当然地认为："既然和坏蛋混在一起，那它肯定也不是什么好东西！"于是，p53被贴上了"癌基因"的标签，在科学界"背锅"了整整十年。

直到1989年，真相才大白于天下！约翰斯·霍普金斯大学的Bert Vogelstein和普林斯顿大学的Arnold Levine团队发现，原来之前研究用的都是突变型的p53——真正的野生型p53其实是一位抑癌"英雄"！正如Lane和Crawford在1992年Nature杂志上所说，p53因其在维持基因组稳定性、防止基因突变方面的关键作用，被科学家们誉为"基因组守护者"（Guardian of the Genome）[1]。这个称号可不是白来的——在人类癌症中，TP53是最常发生改变的基因之一，约半数恶性肿瘤存在TP53基因改变，在PubMed上拥有超过10万篇相关文献，是癌症研究领域当之无愧的"顶流"[2]。

图1：p53蛋白调控网络及相关生物学过程示意图；该图展示蛋白功能网络，不是Trp53基因型图。

Trp53基因敲除小鼠：科研界的"劳模"

研究Trp53（小鼠基因符号）及其编码蛋白p53时，基因敲除小鼠模型是重要研究工具。赛业生物提供基因敲除小鼠模型定制服务。Trp53基因敲除模型在1990年代初期由多个实验室几乎同时创建，包括Donehower等人（1992）、Tsukada等人（1993）、Jacks等人（1994）和Purdie等人（1994）的团队，通过删除Trp53基因的一个或多个外显子来产生p53功能完全缺失的小鼠[3]。

有趣的是，与许多肿瘤抑制基因敲除小鼠不同，大多数Trp53纯合缺失（Trp53-/-）小鼠在胚胎发育阶段是存活的，这表明p53在胚胎发育中的作用相对温和，但作为应激反应蛋白和肿瘤抑制因子的作用却至关重要[3]。

这些"缺失p53"的小鼠会发生什么呢?根据Donehower在2014年Human Mutation期刊发表的综述，Trp53敲除小鼠对多种类型的肿瘤普遍易感，其中Trp53-/-小鼠以淋巴瘤为主，而Trp53+/-小鼠则主要发生淋巴瘤、软组织肉瘤和骨肉瘤[4]。Trp53+/-小鼠表现出的癌症类型与Li-Fraumeni综合征患者的高频骨肉瘤、软组织肉瘤和白血病有一定相似性，使其成为这种罕见遗传病的理想动物模型。

更令人惊讶的是，Lee等人2019年在Genes & Genomics期刊发表的研究显示，在49只纯合敲除小鼠中，有36只（73%）发生了肿瘤，平均发病年龄为23周，其中淋巴瘤占64%，肉瘤占23%[5]。这种高肿瘤发生率让Trp53敲除小鼠成为研究癌症发生机制的理想模型。

"劳模"的多重身份

1. 癌症研究的"试金石"

Trp53+/-小鼠曾用于遗传毒性相关的致癌性评估研究。Pritchard等人对多种转基因小鼠模型进行比较，报告的单一模型总体正确判断率为74%–81%；在仅将Trp53+/-模型用于基因毒性化合物的分析策略中，正确判断率为85%（22/26）。研究同时指出，模型验证与标准化仍是监管应用需要考虑的问题[6]。

2. 人类遗传病的"替身演员"

Li-Fraumeni综合征是一种与人TP53基因胚系致病变异相关的家族性癌症综合征，患者往往在年轻时就会发展出多种肿瘤。Trp53+/-小鼠正好为这种罕见疾病的研究提供了宝贵的动物模型。

3. 基因互作的"测试平台"

正如Donehower在综述中指出的，Trp53基因敲除小鼠已经与数百种其他基因工程小鼠进行杂交，以研究癌症表型背景下的各种基因相互作用[4]。第一个报道的交叉实验是Trp53缺陷小鼠与Rb缺陷小鼠的杂交，结果显示双缺陷子代小鼠的肿瘤发生加速，并出现了亲本系都没有表现出的新型癌症谱系[7]。它就像是一个"基因测试平台"，帮助科学家理解不同基因之间如何"协同作战"或"相互拆台"。

最新研究进展：不只是"缺失"那么简单

科学家们对Trp53基因敲除模型的研究从未停止。

Brennan等人在2024年Cell Death & Differentiation期刊发表的一项重要研究揭示，转录激活靶基因对于TP53介导的肿瘤抑制至关重要，但不同TP53调控的肿瘤抑制途径在不同组织中的重要性各不相同[8]。研究团队通过构建三重基因敲除小鼠（Puma-/-p21-/-Zmat3-/-）发现，这些小鼠相比野生型小鼠发展肿瘤的频率显著增高。更有趣的是，三重敲除和Puma-/-Zmat3-/-双重缺陷的动物主要患淋巴瘤，而p21-/-Zmat3-/-动物则主要发展实体瘤。这说明，不同的p53下游通路在不同组织中扮演着不同的"守护"角色。

2025年，Solier等人在eLife期刊发表的最新研究则关注了p53热点突变（如Y217C）的功能获得效应[9]。研究将Trp53Y217C作为人TP53热点突变Y220C的对应小鼠模型。Trp53Y217C/Y217C雄性小鼠较Trp53-/-雄性小鼠更早死亡，并出现更具侵袭性的胸腺淋巴瘤；转录组分析发现炎症相关基因表达变化。与Trp53-/-小鼠相比，Trp53Y217C/Y217C细胞还表现出炎症与趋化因子信号、线粒体功能和染色质可塑性相关差异。研究提示，热点突变模型可能具有不同于基因缺失模型的功能获得效应，具体结论应结合该研究的模型和实验条件解读[9]。

此外，Jerry等人在2002年Breast Cancer Research期刊发表的综述指出，自从首次Trp53基因敲除小鼠发表以来的十年间，通过使用Trp53转基因和敲除小鼠，科学家们对p53在乳腺组织生物学和肿瘤抑制方面的贡献有了更深入的理解[10]。原始的Trp53缺陷小鼠并未显示出乳腺表型，但使用BALB/c-Trp53缺陷小鼠的研究表明存在延迟的退化表型和乳腺肿瘤表型，这些研究加深了我们对p53在退化中的作用、激素对p53活性的调节、小鼠品系和修饰基因对肿瘤表型的影响，以及p53与其他致癌事件合作的理解。

小结：一个模型，无限可能

从最初的"误会"到如今的科研"顶流"，Trp53基因走过了一段曲折而精彩的历程。而Trp53基因敲除小鼠模型，作为研究这位"基因组守护者"的重要工具，已经在癌症机制研究、药物筛选、基因互作分析等多个领域发挥着不可替代的作用。

正如Attardi在2005年Mutation Research期刊中所总结的，p53突变小鼠模型不仅促进了我们对癌症起始和进展机制的理解，还带来了对p53在胚胎发生和衰老中功能的意外洞察[11]。随着操纵小鼠基因组方法的不断发展，新的p53模型正在不断涌现，这些模型不仅将提供重要的机制洞察，还将带来具有重大临床意义的发现。

未来，随着基因编辑技术的不断进步，Trp53基因敲除小鼠模型必将在精准医学和个性化治疗领域继续发光发热，为人类战胜癌症贡献更多力量！

基因编辑小鼠助力科研：动物模型是开展机制研究和药物评价不可或缺的工具，赛业生物开发了一系列标准化的Trp53基因编辑小鼠模型，小鼠现货提供，科研快人一步！

赛业相关小鼠模型

下表列出本文涉及的Trp53基因敲除及条件性基因敲除小鼠。点击产品编号可查看对应模型详情；实际选型请结合研究问题、遗传背景和模型验证信息判断。

参考文献

1. Zhou L, Tan JH, Zhou WY, Xu J, Ren SJ, Lin ZY, Chen XM, Zhang GW. P53 Activated by ER Stress Aggravates Caerulein-Induced Acute Pancreatitis Progression by Inducing Acinar Cell Apoptosis. Dig Dis Sci. 2020 Nov;65(11):3211-3222.
2. Lane DP. Cancer. p53, guardian of the genome. Nature. 1992 Jul 2;358(6381):15-6.
3. Kastenhuber ER, Lowe SW. Putting p53 in Context. Cell. 2017 Sep 7;170(6):1062-1078.
4. Donehower LA, Harvey M, Slagle BL, McArthur MJ, Montgomery CA Jr, Butel JS, Bradley A. Mice deficient for p53 are developmentally normal but susceptible to spontaneous tumours. Nature. 1992 Mar 19;356(6366):215-21.
5. Donehower LA. Insights into wild-type and mutant p53 functions provided by genetically engineered mice. Hum Mutat. 2014 Jun;35(6):715-27.
6. Kim U, Kim CY, Oh H, Lee JM, Chang SN, Ryu B, Kim J, Lee HW, Park JH. Phenotyping analysis of p53 knockout mice produced by gene editing and comparison with conventional p53 knockout mice. Genes Genomics. 2019 Jun;41(6):701-712.
7. Pritchard JB, French JE, Davis BJ, Haseman JK. The role of transgenic mouse models in carcinogen identification. Environ Health Perspect. 2003 Apr;111(4):444-54.
8. Williams BO, Remington L, Albert DM, Mukai S, Bronson RT, Jacks T. Cooperative tumorigenic effects of germline mutations in Rb and p53. Nat Genet. 1994 Aug;7(4):480-4.
9. Brennan MS, Brinkmann K, Romero Sola G, Healey G, Gibson L, Gangoda L, Potts MA, Lieschke E, Wilcox S, Strasser A, Herold MJ, Janic A. Combined absence of TRP53 target genes ZMAT3, PUMA and p21 cause a high incidence of cancer in mice. Cell Death Differ. 2024 Feb;31(2):159-169.
10. Jaber S, Eldawra E, Rakotopare J, Simeonova I, Lejour V, Gabriel M, Cañeque T, Volochtchouk V, Licaj M, Fajac A, Rodriguez R, Morillon A, Bardot B, Toledo F. Oncogenic and teratogenic effects of Trp53Y217C, an inflammation-prone mouse model of the human hotspot mutant TP53Y220C. Elife. 2025 Apr 14;13:RP102434.
11. Blackburn AC, Jerry DJ. Knockout and transgenic mice of Trp53: what have we learned about p53 in breast cancer? Breast Cancer Res. 2002;4(3):101-11.
12. Attardi LD, Donehower LA. Probing p53 biological functions through the use of genetically engineered mouse models. Mutat Res. 2005 Aug 25;576(1-2):4-21.

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