通过对RNA测序数据的分析，研究人员发现在扩张型心肌病和缺血性心肌病患者的左心室样本中，GRSF1的mRNA水平显著降低，且其表达水平与心脏功能密切相关。与转录数据一致，扩张型心肌病患者心肌组织中的GRSF1蛋白水平显著低于健康对照。分析还显示，GRSF1表达与心力衰竭标志物心房钠尿肽（ANP）、脑钠肽（BNP）和β-肌球蛋白重链（β-MHC）的mRNA水平呈显著负相关。在小鼠心力衰竭模型中，心肌细胞的GRSF1蛋白水平显著下降。这些结果表明，GRSF1可能参与维持心肌稳态。

为了探究GRSF1在调节心肌功能中的作用，研究人员构建了心脏特异性的GRSF1敲除小鼠（GRSF1△CM）。这种小鼠未出现胚胎致死现象，但寿命显著缩短，中位生存期仅为8个月。超声心动图显示，GRSF1△CM小鼠的心脏收缩功能急剧下降，表现为左心室射血分数和缩短分数降低，以及左心室舒张末期内径增大，表明左心室腔扩张。与对照小鼠相比，GRSF1缺失小鼠表现出心脏重量/胫骨长度比值升高、心肌肥厚和纤维化加剧，且ANP、BNP和β-MHC表达上调。这些结果表明，心肌细胞中GRSF1缺失会导致心脏功能障碍和心力衰竭。

之后，他们通过尾静脉注射AAV9-cTNT-GRSF1，实现了心肌细胞特异性的GRSF1过表达。在TAC诱导的心力衰竭小鼠模型中，GRSF1过表达使得小鼠心脏收缩功能显著改善，心肌肥厚和纤维化特征得到逆转，且心力衰竭标志物下调，这表明GRSF1可能防止血流动力学超负荷诱发的心力衰竭。

为了进一步探究GRSF1如何影响心脏功能，研究人员利用6月龄GRSF1fl/fl和GRSF1△CM小鼠的心脏组织开展了非靶向代谢组学分析。结果显示，GRSF1△CM小鼠中共有91种代谢物发生显著改变，其中差异表达的代谢物主要富集于BCAA代谢通路。靶向代谢组学分析证实，GRSF1缺失小鼠的心脏中积累了缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸及其代谢产物支链α-酮酸（BCKA）。此外，在12周龄（心脏功能障碍出现之前），GRSF1△CM小鼠的BCAA代谢已发生改变，并随着年龄增长变得更加明显。这些结果表明，GRSF1缺失可能是心肌BCAA积累的主要驱动因素。

考虑到BCAA和BCKA的再氨化会促进蛋白质合成并在心脏重塑中发挥作用，研究人员推测GRSF1缺失小鼠的蛋白质翻译可能发生改变。与GRSF1fl/fl小鼠相比，GRSF1△CM小鼠心脏中嘌呤霉素的掺入量增加，ERK1/2、mTOR和4E-BP1的磷酸化水平升高，蛋白质合成增加。同时，这些小鼠的线粒体形态出现异常，表现为线粒体体积缩小、数量增加、嵴结构紊乱，基础呼吸和最大呼吸能力显著下降，表明GRSF1缺失后线粒体功能受损。由此可见，GRSF1在心肌细胞中抑制BCAA介导的蛋白质合成和线粒体功能障碍。

之后，研究人员深入解析了背后的分子机制。BCKA脱氢酶（BCKDH）复合物是BCAA分解代谢过程中的限速酶，由三个亚基组成（E1、E2、E3），其中E1亚基由BCKDHA和BCKDHB基因编码。他们发现，心肌细胞中GRSF1敲降显著降低了BCKDHB的蛋白质和mRNA水平，而对其他亚基无影响。

通过RNA pull-down分析，他们发现GRSF1与BCKDHB mRNA的编码区结合，且该区域的G-rich序列是结合的关键位点，该序列的缺失或突变几乎完全消除了二者的相互作用。GRSF1敲降会显著缩短BCKDHB mRNA的半衰期。重要的是，在GRSF1△CM小鼠的心脏组织中，BCKDHB的蛋白质和mRNA水平也降低了。在扩张型心肌病患者和心力衰竭小鼠模型的心脏中都观察到BCKDHB的降低。这些结果显示，GRSF1促进了BCKDHB的表达。

此外，研究人员还发现，在GRSF1的三个qRRM结构域中，qRRM2是其结合BCKDHB mRNA的必需结构域，缺失qRRM2的GRSF1突变体无法稳定BCKDHB mRNA，也无法改善GRSF1敲除小鼠的BCAA代谢紊乱和心脏功能异常。

最后，研究人员开展了一项纵向研究，比较BCKDHBfl/fl和BCKDHB△CM小鼠的心脏功能。结果显示，BCKDHB△CM小鼠会出现进行性心脏功能下降，且心力衰竭表型的出现早于GRSF1△CM小鼠。在BCKDHB敲除小鼠中过表达GRSF1，无法有效改善TAC诱导的心脏收缩功能障碍、心肌肥厚和纤维化，表明GRSF1通过调控BCKDHB发挥心脏保护作用，而BCKDHB表达则能有效缓解GRSF1敲除小鼠的心力衰竭表型，进一步验证了GRSF1-BCKDHB调控轴的关键作用。