基因敲入细胞系

相比于基因敲除（KO），在设计基因敲入（KI）的实验方案时需考虑的影响因素更多，如敲入基因片段的长短、同源重组效率等，且不同细胞系之间的基因敲入效率差异很大，这也使得KI的技术难度更高。赛业生物提供基因敲入细胞株的构建服务，将人源化的Cas蛋白、双靶点gRNA和Oligo DNA（donor DNA）三组分同时转染至目的细胞，产生高效同源重组，实现基因的敲入。基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统，定制KI细胞服务，快至12周交付。

细胞鉴定报告；实验报告（含载体报告、实验流程、测序原始数据等）；基因敲入细胞系

从体内动物实验到体外细胞实验，拥有18年基因编辑经验，每年构建体内体外模型超万例，已有多篇文献引用发表，可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析的全流程服务。

拥有全新升级的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统，轻松实现基因敲除、基因敲入等多种策略，编辑效率高达90%。

我们建设了有各项参数明确、性能稳定的科研细胞库，极大程度规避了基因编辑对细胞的负面影响。

进行细菌、支原体等微生物的双重检测，确保100%无污染，并充分鉴定基因编辑效果；进行细胞活率检测，保证交付质量。

AAVS1位点是一个开放的染色体结构，能保证转入基因能被正常转录。另外很重要的一点是在该位点插入外源目的片段对细胞无已知的副作用。通过CRISPR/Cas基因编辑技术，将8.6kb的片段敲入该位点。如图所示，在该位点上设计sgRNA，利用α-donor体系将gRNA和Donor递送到iPS细胞中，Cell Pool检测到5arm-KI、KI-3arm及KI短片段扩增均有目的条带，且条带明亮，通过制备单克隆获得KI纯合子和杂合子。