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科研笔记(三)|Hep G2细胞培养、Hep G2细胞皮下移植肿瘤CDX模型怎么构建-赛业生物

2024-11-22
基因修饰细胞系常见问题解答
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Hep G2 CDX模型:细胞培养、皮下成瘤与给药窗口|赛业生物

目录

Hep G2 CDX模型研究要点:本文围绕Hep G2细胞培养、基因修饰与皮下移植成瘤展开,介绍从细胞状态准备到体内模型观察的相关信息。

  • 细胞准备:原文使用DMEM+10%FBS培养条件,提醒关注传代比例、细胞团分散与日常观察。
  • 模型宿主:原文展示C-NKG和NOD-Scid小鼠中的Hep G2皮下移植实例。
  • 成瘤与给药观察:原文预计接种后22天达到100–200 mm³,约23天为给药窗口期;这些数值对应本文实验条件,不代表所有Hep G2 CDX项目均相同。
  • 研究衔接:Hep G2可开展基因敲除、点突变、KI、过表达和干扰等修饰,为后续基因功能、靶点及药效研究提供资源。

一、Hep G2细胞信息与应用方向

Hep G2细胞是一种人肝癌细胞系,最初是从一位15岁白人男性肝癌患者的肿瘤组织中分离获得的。这种细胞系具有无限的生命周期、稳定的表型、高可用性和易于处理等特点,在细胞生物学、遗传毒理学、病毒学和肿瘤生物学研究中有着广泛的应用。

Hep G2细胞小卡片

细胞名称:Hep G2(人肝癌细胞)

生长特性:贴壁生长,上皮细胞样形态,常有空泡

培养条件:DMEM+10%FBS

培养环境:95%空气+5%二氧化碳;37℃

Hep G2细胞的五类研究应用

1. 肝癌研究

用于研究肝癌的发病机制、耐药机制和癌症治疗等领域。

2. 药物代谢和肝毒性研究

Hep G2细胞在形态和功能上与人类肝组织相似,可用于药物代谢和肝毒性测试,帮助评估新药的安全性和有效性。

3. 病毒学研究

用于研究乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)等肝炎病毒相关的病毒复制和致病机制。

4. 基因编辑和功能研究

Hep G2细胞可以通过基因编辑技术进行改造,以研究特定基因的功能和在疾病中的作用。

5. 细胞毒理学实验

用于评估化学物质和药物对肝脏的潜在毒性。

二、Hep G2细胞培养条件与注意事项

高质量的胎牛血清有助于细胞贴壁和形成单层细胞。在培养过程中细胞内容易形成空泡,是该细胞的正常特性,不影响细胞生长。细胞培养注意事项如下:

  • 控制好传代比例,避免细胞过于拥挤或稀疏,否则会影响细胞的生长
  • 消化时注意吹散细胞团
  • 培养时需要每天观察培养基的颜色,及时换液,以免影响细胞贴壁

三、CDX研究前的Hep G2基因修饰

基因修饰项目

Hep G2细胞系的基因修饰包括基因敲除、点突变、KI、过表达和干扰等,赛业生物通过优化Hep G2的单克隆制备方法,实现Hep G2基因编辑单克隆交付,可显著提高实验的准确性和可靠性,为肝脏相关疾病研究提供更坚实的基础。

基因编辑注意事项

  • 细胞转染前确保状态良好,细胞密度70%左右;
  • 消化时尽量吹散成单个细胞;
  • 挑克隆法制备单克隆,使用赛业定制条件培养基,将细胞接种至10cm培养皿中,待生长一段时间后挑取克隆至96孔板继续培养。

四、Hep G2 CDX模型:皮下成瘤与给药窗口

本节以Hep G2细胞皮下异种移植为例,说明细胞来源异种移植(CDX)模型中的宿主、接种与肿瘤生长观察信息。实验条件、细胞状态及观察终点应结合具体项目评估。

赛业生物已验证的体内CDX验证肿瘤细胞系超200种,能为大家进行体内体外基因功能研究、药物靶点筛选及药效学研究等提供重要的细胞系资源。我们的细胞系模型验证数据稳定,并具备多项IND评价项目经验,所构建的抗肿瘤药效模型市场覆盖率90%以上,种类全、数量多、质量优。

Hep G2皮下移植瘤体积与小鼠体重变化曲线(n=8)

图1 肝癌细胞Hep G2皮下移植肿瘤及体重生长曲线(n=8)

将细胞以皮下注射的形式接种到7周的C-NKG和8周的NOD-Scid小鼠体内,并在不同的时间点测量成瘤体积。细胞接种量为9×106/只和1×107/只,数据以Mean±SEM形式呈现。结果显示Hep G2在C-NKG和NOD-Scid小鼠上容易建模。肿瘤体积预计在接种后22天达到100-200mm3,在接种后45天达到2000mm3实验终点,给药窗口期预计在23天左右。

Hep G2 CDX模型成瘤时间与接种条件速览

观察项目本文信息理解要点
宿主与周龄7周C-NKG、8周NOD-Scid小鼠沿用原文列示条件
细胞接种量9×10⁶/只、1×10⁷/只原文未逐一标明两组接种量与宿主的对应关系
给药体积参考预计第22天达到100–200 mm³以本文条件下的肿瘤生长观察为依据
原实验终点描述预计第45天达到2000 mm³为原文实验描述,不作为其他项目的通用终点
给药窗口期原文预计约23天结合实际生长曲线评估,不理解为固定给药日期

阅读Hep G2皮下成瘤时间时,应同时查看细胞接种量、宿主与肿瘤体积。上述数据用于理解本文实例,具体研究还需结合实际生长曲线及获批实验方案确定观察与给药安排。

关于宿主背景,可继续阅读NOD-scid小鼠的免疫特征与移植应用;如需配套体内研究支持,可了解肿瘤药效评价服务。

研究服务与技术资料

围绕细胞资源、模型及研究目标,可进一步查看以下入口。

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资料来源

[1] 赛业生物:科研笔记(三)|Hep G2细胞培养、Hep G2细胞皮下移植肿瘤CDX模型怎么构建。本文细胞条件、模型数据和图1均据该原始文章;原文章未附学术参考文献列表。

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围绕细胞、模型和研究问题,可访问iCyagen科研平台辅助梳理资料与前期研究思路。具体模型方案应结合项目资料和研究目标评估。

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CDX模型Hep G2细胞皮下移植模型细胞培养基因修饰肿瘤药效评价

FAQ

Hep G2 CDX模型用了哪些宿主?

本文列出7周C-NKG和8周NOD-Scid小鼠,两组具体实验信息需结合原图及对应资料理解。

Hep G2皮下成瘤后多久可以评估给药?

原文预计接种后22天肿瘤体积达到100–200 mm³,给药窗口期约23天。这是本文实验条件下的信息,不等于统一给药日。

Hep G2细胞培养时要关注什么?

原文提醒控制传代比例、消化时吹散细胞团、每天观察培养基颜色并及时换液,保持适宜的培养状态。