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传统泛表达GFP常使细胞质整体发亮,难以分辨线粒体、内质网、纤毛、突触等精细亚细胞结构;同时,经典EGFP在深层组织中的亮度与光稳定性亦有不足,成为许多高分辨率与多色成像实验的“卡脖”问题。赛业细胞器工具鼠系列以亚细胞特异靶向序列搭配高性能荧光蛋白(mKate2、mScarlet、mNeonGreen、Dendra2等),实现精准定位、更高信噪比及多色兼容,为亚细胞水平的动态研究提供了更多样化的选择。

线粒体工具鼠:远红、光转换与高亮度三线并进

线粒体是细胞能量代谢与信号转导的核心枢纽,其形态重塑、运输轨迹与自噬过程是神经、代谢、肿瘤等多领域的研究热点。本系列产品采用线粒体靶向序列(Mito),将荧光蛋白锚定于线粒体,降低细胞质背景干扰。

产品名称产品编号品系描述荧光蛋白优势亮点订购
RCL-Mito-mKate2C002203携带条件性表达线粒体靶向远红外荧光蛋白(Mito-mKate2)报告基因的小鼠模型。mKate2mKate2属于远红外荧光蛋白,激发/发射波长较长,组织穿透性更优,光稳定性好,适合深层组织成像,并与绿色、黄色等通道兼容,便于多重荧光联用[1]。该品系可用于包括活体线粒体分布观察、与其他细胞器或免疫标记的共定位分析。联系赛业
RCL-Mito-Dendra2C001739携带条件性表达线粒体靶向光转换荧光蛋白(Mito-Dendra2)报告基因的小鼠模型。Dendra2光转换荧光蛋白Dendra2可在特定波长照射下从绿色转换为红色,实现对特定线粒体亚群的时空标记[4]。文献中光转换策略广泛用于追踪线粒体运输、融合分裂及自噬过程,该模型为动态观察提供直接工具[5]。联系赛业
CAG-mito-mNeonGreen-TgI001183携带碱性(组成型荧光)绿/黄色荧光蛋白(mNeonGreen)报告基因的小鼠模型。mNeonGreenmNeonGreen亮度显著高于传统EGFP,光稳定性良好,适合线粒体实时定位与短时程动态成像,信噪比提升明显[3]。联系赛业

已有研究证实,mito::mKate2小鼠可用于体内线粒体动态追踪,文献中的荧光观测结果如下所示(应用参考):

mito-mKate2线粒体荧光成像应用参考图

图1. mito-mKate2应用参考[2]。

研究表明,具有光转换线粒体的小鼠模型可研究线粒体动力学,文献中的代表性荧光结果如下所示(应用参考):

mito-Dendra2线粒体光转换与动力学研究参考图

图2. mito-Dendra2应用参考[5]。

溶酶体与单核-巨噬细胞工具鼠:免疫与溶酶体研究的交叉工具

CD68属于LAMP家族成员,主要定位于晚期内体/溶酶体,并在单核/巨噬细胞中高表达,是连接溶酶体生物学与免疫细胞功能的关键分子[6]。

• Cd68-LSL-DTR(产品编号:C001750):基于Cd68启动子驱动的DTR(白喉毒素受体)表达系统。Cre重组后,Cre重组酶介导表达终止元件(LSL)的删除将导致DTR在Cre阳性细胞中表达,注射白喉毒素(DT)可选择性清除CD68阳性细胞,支持单核/巨噬细胞功能研究。

• Cd68-P2A-iCre(产品编号:I001172)与Cd68-P2A-CreERT2(产品编号:C001734):分别提供组成型与他莫昔芬诱导型Cre重组酶,便于与条件性等位基因结合,实现对CD68阳性细胞的遗传操作。

内质网与突触精细标记

内质网是蛋白质合成与钙信号的关键场所,突触结构则是神经可塑性的物质基础。

• Lrat-P2A-tdTomato-T2A-CreERT2(产品编号:I001205):由小鼠Lrat基因调控元件驱动诱导型CreERT2重组酶的表达。LRAT主要定位于粗面内质网。

• Cyp19a1-IRES-Cre(产品编号:C001382):将IRES-Cre插入小鼠内源性Cyp19a1基因下游。CYP19A1定位于内质网,催化雌激素生物合成的最后步骤。

• H11-UBC-PSD95-GFP(产品编号:C002307):靶向突触后致密区(PSD),便于观察突触密度与形态变化。

• Rosa26-UBC-Syt1-TDT(产品编号:C002330):Synaptotagmin-1定位于突触囊泡,tdTomato提供红色信号。

翻译质量控制系统与初级纤毛:新兴亚细胞功能研究

翻译质量控制与初级纤毛是近年来快速发展的领域。

• Pelo-TagBFP2(产品编号:C001769):PELO(Pelota)是mRNA监控与核糖体救援(No-Go Decay)通路的关键因子,主要参与停滞核糖体的识别与释放[7-8]。TagBFP2作为蓝色荧光蛋白,提供独立光谱通道,便于与其他荧光标记联用。

• Arl13b-P2A-mCherry(产品编号:C002212)与Arl13b-3xEAAAK-EGFP(产品编号:C002213):ARL13B是初级纤毛的经典标志蛋白[9]。将mCherry或EGFP精准定位于初级纤毛,便于观察纤毛长度、分布及信号转导。mCherry的红色通道进一步增强多色成像兼容性。

细胞器工具鼠系列的核心优势在于两点:

• 亚细胞特异靶向序列确保定位精准,有效解决泛表达导致的结构分辨难题;

• 优选荧光蛋白(远红、高亮度、光转换、多色兼容)提升活体与深层成像性能。

建议根据具体实验设计选择合适荧光通道与诱导系统,并在实际应用中结合自身研究体系进行验证。欢迎关注后续产品更新与技术支持,更多前沿创新型工具鼠持续上架中。

参考文献

[1] Shcherbo D, Murphy CS, Ermakova GV, Solovieva EA, Chepurnykh TV, Shcheglov AS, Verkhusha VV, Pletnev VZ, Hazelwood KL, Roche PM, Lukyanov S, Zaraisky AG, Davidson MW, Chudakov DM. Far-red fluorescent tags for protein imaging in living tissues. Biochem J. 2009 Mar 15;418(3):567-74.

[2] Barrasso AP, Tong X, Poché RA. The mito::mKate2 mouse: A far-red fluorescent reporter mouse line for tracking mitochondrial dynamics in vivo. Genesis. 2018 Feb;56(2):10.1002/dvg.23087.

[3] Shaner NC, Lambert GG, Chammas A, Ni Y, Cranfill PJ, Baird MA, Sell BR, Allen JR, Day RN, Israelsson M, Davidson MW, Wang J. A bright monomeric green fluorescent protein derived from Branchiostoma lanceolatum. Nat Methods. 2013 May;10(5):407-9.

[4] Gurskaya NG, Verkhusha VV, Shcheglov AS, Staroverov DB, Chepurnykh TV, Fradkov AF, Lukyanov S, Lukyanov KA. Engineering of a monomeric green-to-red photoactivatable fluorescent protein induced by blue light. Nat Biotechnol. 2006 Apr;24(4):461-5.

[5] Pham AH, McCaffery JM, Chan DC. Mouse lines with photo-activatable mitochondria to study mitochondrial dynamics. Genesis. 2012 Nov;50(11):833-43.

[6] Chistiakov DA, Killingsworth MC, Myasoedova VA, Orekhov AN, Bobryshev YV. CD68/macrosialin: not just a histochemical marker. Lab Invest. 2017 Jan;97(1):4-13.

[7] Alagar Boopathy LR, Beadle E, Garcia-Bueno Rico A, Vera M. Proteostasis regulation through ribosome quality control and no-go-decay. Wiley Interdiscip Rev RNA. 2023 Nov-Dec;14(6):e1809.

[8] Ikeuchi K, Yazaki E, Kudo K, Inada T. Conserved functions of human Pelota in mRNA quality control of nonstop mRNA. FEBS Lett. 2016 Sep;590(18):3254-63.

[9] Caspary T, Larkins CE, Anderson KV. The graded response to Sonic Hedgehog depends on cilia architecture. Dev Cell. 2007 May;12(5):767-78.

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细胞器特异性荧光标记研究可结合靶向组织、荧光通道、Cre诱导系统和实验周期选择合适的模型。具体品系与实验条件应以实际验证为准。

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赛业生物推出的 iCyagen 1.0 是面向生命科学研究场景的科研 AI 平台,以基因编辑设计与科研问答为核心,结合模型构建方案、实验设计逻辑与研究问题分析,为研究者提供基因、疾病和研究模型信息检索及方案梳理的辅助入口。

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需要梳理细胞器标记策略、荧光通道兼容性或 Cre 依赖型工具鼠选择时,可先 访问 iCyagen 科研 AI 平台,结合赛业生物工具鼠资源进一步完善研究方案。

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欢迎联系赛业生物,沟通目标细胞器、荧光通道、Cre 系统及模型验证需求。

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细胞器工具鼠线粒体荧光标记Cre工具鼠亚细胞成像初级纤毛

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常见问题 FAQ

细胞器工具鼠与普通GFP报告小鼠有什么区别?

细胞器工具鼠利用亚细胞定位序列或相关蛋白标记线粒体、突触及纤毛等结构,相比泛表达GFP更有利于区分特定亚细胞区域。

mKate2、Dendra2和mNeonGreen适用于哪些线粒体研究?

mKate2可用于远红通道线粒体成像,Dendra2可进行光转换追踪,mNeonGreen可用于高亮度线粒体定位与动态观察;具体选择应考虑成像系统与实验条件。

RCL-Mito-Dendra2工具鼠的主要用途是什么?

文稿所述RCL-Mito-Dendra2(C001739)携带条件性线粒体靶向光转换荧光蛋白报告基因,可用于线粒体亚群时空标记及动力学研究设计。

CD68相关工具鼠如何用于单核和巨噬细胞研究?

Cd68-LSL-DTR可用于Cre条件下的DTR表达研究,Cd68-P2A-iCre和Cd68-P2A-CreERT2分别提供组成型与诱导型Cre工具。

哪些工具鼠可用于突触与初级纤毛的荧光观察?

文稿介绍了H11-UBC-PSD95-GFP和Rosa26-UBC-Syt1-TDT用于突触相关标记,以及Arl13b-P2A-mCherry和Arl13b-3xEAAAK-EGFP用于初级纤毛相关观察。

选择细胞器荧光报告小鼠时应关注什么?

应综合考虑靶向结构、荧光波长、组织背景、Cre系统、实验成像设备以及对表达定位和功能的验证。

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【工具鼠】 赛业生物可为您提供Cre工具鼠、诱导型Cre工具鼠、荧光标记模型、Dre工具鼠、线粒体工具鼠、离子通道工具鼠等,可实现多组织多器官的重组酶活性验证。
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关于赛业生物
赛业生物2006年成立,是国家高新技术企业、专精特新“小巨人”企业,是深耕生物医药源头创新的全球化创新性生物技术平台型企业。公司立足新一代AI驱动的全人抗体药物研发与转化平台,以自主基因编辑技术为核心,打造一站式抗体药物研发体系,依托完备的上下游技术矩阵,全面赋能全球创新药研发。

公司核心优势为抗体源头创新,通过自主搭建HUGO-Ab®全人源抗体小鼠平台,集成共轻链技术、纳米抗体技术,结合自研的AbSeek®AI智能计算平台,建设起HUGO-LAb™抗体分子库,围绕肿瘤、自免、代谢等重点疾病方向,建立靶点研究、抗体发现、分子筛选与功能验证的一体化数据体系,并持续沉淀具有开发潜力的候选分子与技术数据资产。赛业生物打造的新一代AI驱动的全人抗体药物研发与转化平台,打通靶点验证、抗体筛选、序列优化和体内外验证全闭环,革新传统试错研发模式,实现可预测、高效率、高成药性、规模化抗体研发。配套HUGO-GT®全基因组人源化小鼠平台,精准支撑靶点验证与功能研究,显著提升生物药临床转化效率。

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