本品系为携带条件性表达线粒体靶向光转换荧光蛋白(Mito-Dendra2)报告基因的小鼠模型。该报告基因的表达受CAG启动子调控,并通过loxP-Stop-loxP元件实现条件性阻断。在缺乏Cre重组酶的情况下,Mito-Dendra2的表达受到抑制;在Cre重组酶后,loxP-Stop-loxP序列被切除,CAG启动子即可驱动Mito-Dendra2的表达。CAG启动子是一种经过修饰的复合型启动子,由鸡β-actin基因启动子、巨细胞病毒(CMV)早期增强子、兔β-actin基因剪接受体以及牛球蛋白polyA信号序列组成。该启动子以其在多种哺乳动物细胞中驱动强效且稳定的基因表达而著称,因而成为转基因模型中广泛采用的启动子选择。Mito-Dendra2蛋白通过其N端融合的线粒体定位序列(Mito)特异性地定位于线粒体。该荧光蛋白在未光转换状态下发射绿色荧光(激发/发射峰约490/507 nm)。经特定波长(通常为405 nm)激发后,可发生不可逆的光转换,转变为发射红色荧光(激发/发射峰约553/573 nm)的状态 [1]。这种光转换特性使其成为研究线粒体生物学过程的理想工具,包括但不限于线粒体动力学(融合与分裂)、线粒体运输、线粒体自噬等,为活细胞或活体动物中线粒体的实时追踪和命运示踪提供了有力手段。
RCL-Mito-Dendra2小鼠是通过基因编辑技术将CAG promoter-loxP-PGK-Neo-6xSV40 pA-loxP-Kozak-Mito-Dendra2-BGH pA基因表达组件整合到小鼠Rosa26安全位点1号内含子中构建的,Dendra2蛋白能够特异性地定位于细胞内的线粒体进行条件性表达。