Journal for Immunotherapy of Cancer
靶向TNF-NTF的CAR-T细胞疗法在AML及实体瘤中的治疗潜力

小赛推荐：

本研究通过靶向TNF的N端片段（TNF-NTF）并结合基因编辑技术，有效增强CAR-T细胞在AML和实体瘤中的治疗效果，为克服抗原密度低、T细胞持久性差等挑战提供新策略。

 

文献概述
本文《JAK-STAT活化的抗TNF-NTF CAR-T细胞在AML和实体瘤中展现出高效治疗潜力》，发表于《Journal for Immunotherapy of Cancer》杂志，回顾并总结了通过基因编辑和细胞因子受体工程优化，以增强CAR-T细胞在血液肿瘤和实体瘤中的抗肿瘤活性。研究团队利用单克隆抗体靶向TNF-NTF，结合TNF基因敲除和组成型IL-7信号增强，显著改善CAR-T细胞的持久性和效应功能。

背景知识
尽管CAR-T细胞疗法在B细胞恶性肿瘤和多发性骨髓瘤中取得突破性进展，其在急性髓系白血病（AML）及实体瘤中的疗效仍受限。主要障碍包括靶抗原表达水平低、CAR-T细胞持久性差及潜在的自相残杀（fratricide）。TNF（肿瘤坏死因子）作为II型跨膜蛋白，在部分AML和实体瘤细胞中稳定表达，尤其在细胞表面保留的N端片段（TNF-NTF）可作为新型靶点。本研究通过生成特异性识别TNF-NTF的CAR-T细胞，并结合基因编辑和信号增强策略，有效提升其抗肿瘤活性，同时避免对正常造血干细胞的损伤，为CAR-T细胞疗法在AML及实体瘤中的应用提供新的技术路径。

 

提供CAR-T细胞治疗相关的小鼠模型构建服务，包括免疫缺陷小鼠、人源化小鼠及用于评估CAR-T细胞扩增和持久性的疾病模型。

了解更多

 

研究方法与实验
研究团队首先通过免疫化小鼠并筛选杂交瘤上清，获得特异性识别TNF-NTF的单克隆抗体（cl.12D和cl.35B）。随后构建表达抗TNF-NTF的CAR-T细胞，并通过基因编辑技术敲除TNF以避免自相残杀，同时引入组成型激活的G6/7R受体以增强JAK-STAT信号。通过体外细胞毒性实验、流式细胞术分析、RNA测序及小鼠体内模型评估CAR-T细胞的扩增、持久性及抗肿瘤疗效。

关键结论与观点

• TNF-NTF CAR-T细胞在体外展现出对TNF表达AML细胞的有效杀伤能力，但体内疗效受限于T细胞扩增和持久性差。
• 通过CRISPR/Cas9敲除TNF可显著提升CAR-T细胞的存活与增殖能力，尽管轻微降低其细胞毒性。
• G6/7R的引入通过持续激活JAK-STAT信号通路，显著增强CAR-T细胞在低抗原密度下的效应功能。
• 在小鼠AML模型中，TNF-KO结合G6/7R的CAR-T细胞展现出持久的抗白血病活性，且对TNF表达的卵巢癌细胞也具有显著杀伤力。
• 与传统靶向CD33或CD123的CAR-T细胞不同，TNF-NTF CAR-T细胞对正常造血干细胞无明显细胞毒性，显示出更高的安全性。

研究意义与展望
该研究首次将TNF-NTF作为CAR-T细胞治疗的潜在靶点，为AML和实体瘤的免疫治疗提供了新的策略。未来研究需进一步评估TNF-NTF CAR-T细胞在多种实体瘤模型中的应用，同时优化T细胞工程以提升其持久性并减少移植物抗宿主病（GVHD）等副作用。此外，结合PD-1阻断或双特异性CAR设计可能进一步提升治疗效果，为个体化肿瘤免疫治疗开辟新路径。

 

提供多种肿瘤药效评估服务，涵盖原位成瘤模型构建、CAR-T细胞治疗效果评估、体内成像及肿瘤微环境分析，助力新药开发。

了解更多

 

结语
本研究系统评估了TNF-NTF作为CAR-T细胞治疗新靶点的潜力，结合TNF基因敲除与G6/7R介导的JAK-STAT信号增强，显著改善CAR-T细胞在AML及实体瘤中的治疗效果。该方法不仅提高了CAR-T细胞的扩增与持久性，还保持了对正常造血细胞的无毒性，为未来临床应用提供重要参考。尽管在部分小鼠中观察到GVHD现象，但整体未见恶性转化，表明该策略在安全性方面具备一定可行性。该研究为CAR-T细胞疗法在更广泛肿瘤类型中的应用奠定了理论与实验基础，为后续临床转化提供关键支持。

 

Takahiro Nakashima, Tsunenori Ouchida, Yuichi Ishikawa, Hitoshi Kiyoi, and Yuki Kagoya. JAK-STAT-activated, fratricide-resistant CAR-T cells targeting membrane-bound TNF effectively treat AML and solid tumors. Journal for Immunotherapy of Cancer.