Molecular Cancer
circROR1通过结合HNRNPL调控FOXO4剪接促进皮肤黑色素瘤转移
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该研究揭示了circROR1通过与剪接因子HNRNPL互作，调控FOXO4 pre-mRNA可变剪接，促进黑色素瘤转移，并开发了靶向circROR1的纳米RNAi疗法，为转移性癌症治疗提供了新策略。
文献概述
本文《circROR1 binds HNRNPL to regulate FOXO4 pre-mRNA splicing, promoting cutaneous melanoma metastasis and serving as a therapeutic target via RNAi-loaded PEG-LNPs》，发表于《Molecular Cancer》杂志，回顾并总结了circROR1在皮肤黑色素瘤（CM）中的促癌作用及其分子机制。研究发现circROR1通过与HNRNPL结合，影响其核转位并调控FOXO4 pre-mRNA的内含子保留，促进促转移亚型FOXO4ζ表达，抑制抑癌亚型FOXO4α，从而驱动EMT、迁移和侵袭。同时，该研究开发了靶向circROR1的FA-PEG(si-circ)纳米颗粒，显著抑制体内肺定植，提出circROR1是潜在治疗靶点。整段通顺、有逻辑，结尾用中文句号，段落结尾使用背景知识
皮肤黑色素瘤（Cutaneous Melanoma, CM）是一种高度侵袭性皮肤肿瘤，具有早期转移、预后差和治疗耐药等特点，晚期患者五年生存率不足20%。尽管免疫检查点抑制剂（如抗PD-1/PD-L1）和靶向治疗（如BRAF抑制剂）显著改善了部分患者预后，但多数患者仍会进展，耐药机制复杂，亟需新靶点和治疗策略。环状RNA（circRNA）是一类共价闭合的非编码RNA，因结构稳定、组织特异性强，近年来被广泛研究作为肿瘤标志物和功能分子。部分circRNA可通过“分子海绵”机制吸附miRNA或RNA结合蛋白（RBP），调控基因表达。HNRNPL是一种异质性核糖核蛋白家族成员，作为剪接因子参与pre-mRNA可变剪接调控，影响多种癌症进展。FOXO4是FOXO家族转录因子，具有抑癌功能，其不同剪接亚型可能发挥拮抗作用。然而，circRNA–RBP–剪接轴在CM中的作用尚不明确。该研究聚焦于高表达的circROR1，系统解析其在CM转移中的功能与机制，并探索其作为治疗靶点的可行性，填补了circRNA在CM剪接调控中的研究空白，具有重要理论与转化价值。段落结尾使用
研究方法与实验
研究首先通过circRNA微阵列分析比较低转移性（WM35）与高转移性（WM451）黑色素瘤细胞系及正常人表皮黑色素细胞（HEM）的circRNA表达谱，筛选差异表达circRNA，并通过qRT-PCR在临床样本中验证。利用CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell实验评估circROR1对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。在B16细胞系中构建circROR1过表达和敲低模型，建立裸鼠皮下移植瘤和尾静脉注射肺定植模型，评估其在体内的促瘤和促转移能力，并通过IHC分析EMT标志物表达。为探究机制，进行RNA测序、pull-down结合质谱（pull-down–MS）、RIP、核质分离和FISH实验，确定circROR1的亚细胞定位及其与HNRNPL的相互作用。进一步通过GEO和TCGA数据库分析筛选HNRNPL下游靶标，聚焦FOXO4剪接异构体，验证circROR1/HNRNPL对FOXO4α/ζ表达的调控作用。最后，开发FA-PEG(si-circ)纳米颗粒递送系统，评估其在体内外沉默circROR1的效率及对CM细胞肺定植的影响。关键结论与观点
研究意义与展望
该研究首次揭示了circROR1–HNRNPL–FOXO4剪接轴在黑色素瘤转移中的关键作用，拓展了circRNA通过调控RNA结合蛋白影响可变剪接的分子机制，为理解肿瘤进展提供了新视角。circROR1作为促癌circRNA，其高表达与转移和免疫治疗抵抗相关，提示其可作为潜在预后标志物和治疗靶点。
靶向circROR1的纳米RNAi疗法在小鼠模型中有效抑制转移，展示了RNAi治疗在实体瘤中的应用前景。未来研究可进一步探索该轴在其他癌症中的保守性，优化纳米颗粒的靶向性和生物分布，并评估其联合免疫治疗的潜力，推动其向临床转化。
结语
本研究系统阐明了circROR1在皮肤黑色素瘤中的促转移机制。circROR1在转移性CM中高表达，通过直接结合并稳定剪接因子HNRNPL，调控FOXO4 pre-mRNA的可变剪接，促进促转移亚型FOXO4ζ的表达，同时抑制抑癌亚型FOXO4α，从而驱动EMT、细胞迁移和侵袭。该轴还与抗PD-L1治疗抵抗相关。功能实验证实，circROR1显著促进CM细胞在体外和体内的增殖、迁移及肺定植能力。更重要的是，研究团队开发了基于FA-PEG的siRNA纳米颗粒（FA-PEG(si-circ)），可高效靶向沉默circROR1，显著抑制肿瘤肺转移。综上，circROR1是驱动黑色素瘤进展的关键致癌circRNA，其介导的circROR1–HNRNPL–FOXO4剪接轴是重要的分子通路，靶向该通路的纳米RNAi疗法为治疗转移性黑色素瘤提供了极具前景的新策略。
