J Clin Invest：张存金教授团队揭示多发性硬化中神经炎症的全新靶点
多发性硬化（MS）是一种自身免疫性中枢神经系统疾病，病程复杂且缺乏根治手段。T细胞的异常活化及其介导的炎症反应是 MS 发病的核心环节。特别是 CD4⁺ T细胞及其分化形成的 Th1、Th17 亚群，在炎性浸润、脱髓鞘损伤和中枢神经系统损伤中发挥关键作用，但是T细胞在疾病初始阶段如何被激活、以及分化成致病性亚群的具体机制仍不清楚。多发性硬化中枢急性期的神经炎症治疗在近20年缺乏临床新疗法。
针对上述临床急性期难题，近日张存金教授团队在Journal of Clinical Investigation（IF=13.6）上发表了题为 “ANKRD55 is a key regulator of T cell inflammation in multiple sclerosis”的研究论文。这项工作揭示了ANKRD55是多发性硬化急性期T细胞炎症活化的关键因子，从分子机制层面解释了 T 细胞异常活化的潜在调控途径，为MS等自身免疫性疾病的治疗提供了新的潜在靶点。
研究材料与方法
本研究使用了 MS 患者和健康对照者的 PBMC样本，结合公开单细胞 RNA‑seq 数据集；构建了全身及 T 细胞特异性Ankrd55敲除小鼠（由赛业生物提供）并诱导 EAE 模型；在体外使用 CD4⁺ T 细胞极化培养、流式分析、免疫荧光、Western blot、Co‑IP 等方法，系统研究 ANKRD55 在 T 细胞中的表达、功能及分子机制。
技术路线
单细胞转录组分析筛选候选基因→CD4⁺ T细胞定位及表达富集分析→EAE小鼠模型比较病程和炎症→ANKRD55与CCT互作及免疫突触机制
研究结果
1. ANKRD55 在 MS 患者和 EAE 小鼠中上调
在本项研究中，研究人员通过对临床MS患者外周血和脑脊液的单细胞转录组分析，首次发现一种功能未知的蛋白ANKRD55，其主要表达于活化的炎性CD4⁺ T细胞中，且在MS患者免疫细胞中显著上调，提示ANKRD55参与急性期异常免疫激活。
图1 MS病人单细胞数据[1]
2. ANKRD55 在 CD4⁺ T 细胞中富集，并参与其分化
研究人员检测了EAE发病相关的各组织中ANKRD55的表达量，发现其主要表达于免疫器官脾脏和淋巴结中，进一步分选免疫细胞发现ANKRD55 在 CD4⁺ T 细胞中的表达远高于 CD8⁺、B 细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞。单细胞轨迹分析表明，Naïve CD4⁺ T 细胞（早期状态）中 ANKRD55 表达较高。除此以外，敲除ANKRD55抑制了CD4+T细胞的活化、增殖，以及其向TH1和TH17细胞的分化。
图2 敲除ANKRD55抑制了CD4+T细胞的活化，增殖和分化[1]
3. Ankrd55 缺失减轻 EAE 病情
通过构建ANKRD55敲除小鼠，并诱导EAE模型（MS 动物模型），发现敲除ANKRD55疾病严重程度明显降低，浸润至 CNS 的外周免疫细胞数量显著减少。T 细胞特异性缺失 Ankrd55的小鼠（由赛业生物提供）亦表现出减轻的 EAE 病程。将极化后的Ankrd55‑/‑ Th1／Th17 细胞转移至 WT 受体小鼠后，其致病性明显低于野生型来源的致病细胞。这些发现共同表明，T 细胞内在的ANKRD55对于EAE疾病进展进展是必不可少的。
图3 在T细胞中特异性敲除ANKRD55显著减轻EAE[1]
4. ANKRD55 调控 TCR 信号及免疫突触机制
研究人员进一步通过转录组测序发现ANKRD55敲除显著下调了TCR受体信号通路。Western blot 显示刺激后 CD3ζ、LCK 等关键早期信号分子的磷酸化水平在 Ankrd55‑/‑ 细胞中下降。同时通过免疫共沉淀联合质谱发现ANKRD55和CCT复合物的多个亚基发生相互作用。CCT是一个分子伴侣，作用是帮助tubulin，actin等骨架蛋白的折叠。在免疫突触过程中CCT 复合物在中心体中控制TCR诱导的微管蛋白的极化，从而控制T细胞的活化和极性。研究团队发现ANKRD55 和CCT 在免疫突触过程中在中心体共定位。ANKRD55在CD4+T细胞中通过和CCT5竞争与CCT1/3/6结合帮助CCT复合物正确组装调控免疫突触和TCR进而促进MS中的T细胞炎症。
图4 ANKRD55在CD4+T细胞中帮助CCT复合物正确组装调控免疫突触[1]
研究结论
该研究在多个层面系统地揭示了 ANKRD55 在 CD4⁺ T 细胞及 MS 发病机制中的作用，将一个与自身免疫风险相关、而且机制尚不明确的基因 ANKRD55，定位为 TCR 信号调控、免疫突触形成中的关键分子，从而为治疗 T 细胞介导的自身免疫提供了潜在的新靶点。
参考文献
Wu, C., et al., ANKRD55 is a key regulator of T cell inflammation in multiple sclerosis.The Journal of Clinical Investigation, 2025. 135(20).
