【抗体小课堂】高同源靶点 “难激活”？HUGO-Ab-eKO同源速敲小鼠破局有招！

还在为 “靶点同源性高，小鼠免疫应答弱” 发愁？还在因 “筛选不到高亲和力抗体” 耽误项目进度？赛业生物 HUGO-Ab-eKO™同源速敲小鼠，专为解决抗体研发核心痛点而来，让高难度靶点抗体发现效率直接拉满。

一、什么是eKO™小鼠

做过抗体研发的都懂，面对人与小鼠同源性高的靶点（比如部分细胞因子、跨膜蛋白），普通抗体小鼠往往 “认不出” 靶点差异，免疫应答弱得可怜 —— 血清抗体滴度上不去，筛选到高亲和力抗体的概率更是直线下降，项目很容易卡在 “免疫阶段” 动弹不得。而 HUGO-Ab-eKO™小鼠的核心杀手锏，就是“同源速敲” 技术：基于 HUGO-Ab®全人源抗体小鼠平台，精准敲除小鼠体内与目标靶点同源的鼠源基因。这下小鼠免疫系统 “无干扰”，能更敏锐地识别人类靶点的独特表位，直接触发更强的免疫应答，轻松拿到高亲和力、高特异性的全人源抗体！

ACVR2A、PD-L1 等靶点，人与小鼠的同源性常常超过 85%，普通抗体小鼠的免疫系统会把 “人类靶点” 误认为 “自身蛋白”，免疫后血清抗体滴度极低，甚至连基础的抗体阳性信号都检测不到 —— 就像给小鼠看 “真假难辨的双胞胎”，它根本分不清该 “攻击” 哪个，项目直接卡在免疫启动阶段。而 HUGO-Ab-eKO™小鼠通过同源速敲技术，精准敲除小鼠体内与目标靶点同源的鼠源基因（比如研发人ACVR2A抗体时，敲除小鼠自身的ACVR2A基因）。这下小鼠免疫系统 “没了干扰项”，能清晰识别人类靶点的独特表位，就像去掉了 “视觉干扰滤镜”，一眼锁定 “外来目标”。实验数据显示，针对同源性＞85% 的靶点，eKO 小鼠的抗体阳性率比普通小鼠提升 2-3 倍，免疫后血清抗体滴度轻松达到 1:10⁴以上，彻底解决 “免疫应答弱” 的核心难题。

ACVR2A人、鼠蛋白氨基酸同源性高达99.6%（图1），并且该靶点纯合敲除小鼠可以存活，是理想的eKO验证靶点。

图1. ACVR2A人、鼠蛋白氨基酸同源性分析

ACVR2A eKO验证数据：

• 我们首先对HUGO-Mab™全人单克隆抗体小鼠的ES细胞进行建系，继而在HUGO-Mab™ ES基础上进行mouse ACVR2A基因的纯合敲除，KO后的纯合ES克隆不表达mouse ACVR2A mRNA（图2）。

图2. HUGO-Mab™敲除mouse ACVR2A 后ES克隆mRNA分析

• 将获得的纯合敲除ES克隆通过TurboKnockout®技术显微注射到小鼠胚胎中，出生小鼠4周时采集ACVR2A高表达组织进行mouse ACVR2A 表达量分析，未检测到mouse ACVR2A转录（图3）。

图3. HUGO-Mab™敲除mouse ACVR2A 后小鼠高表达组织mRNA分析

• 待小鼠6周龄后，对KO后小鼠和KO前小鼠分别进行ACVR2A蛋白4次免疫。如图4所示，eKO10小鼠免疫后血清效价明显优于KO前小鼠。

图4. ACVR2A eKO前、后小鼠四免血清效价检测

二、eKO 小鼠的 “超能力”，不止 “强应答”

除了核心的 “同源速敲” 优势，它还自带 HUGO-Ab®平台的 “全 buff 加持”，让研发流程又快又稳：

1、基于HUGO-Mab™全人单克隆抗体小鼠可直接获得全人源抗体，跳过抗体的体外改造环节：HUGO-Mab™全人单克隆抗体小鼠中含有所有的人源抗体可变区序列，抗体多样性更贴近真实人类免疫系统，可产生高效价和多样性抗体，不用再花时间做体外人源化，直接缩短 3-6 个月研发周期；

2、TurboKnockout®技术做基石，知识产权清晰，新药申报更省心：HUGO-Mab™全人单克隆抗体小鼠与HUGO-Ab-eKO™定制服务均依托赛业自研的 Mb 级精准打靶技术，实现基因原位替换，无脱靶效应，知识产权清晰，让新药申报更省心；

3、个性化定制，快速响应需求：HUGO-Ab-eKO™计划精准敲除小鼠体内与目标靶点同源的鼠源基因，让全人源抗体小鼠能更敏锐地识别人类靶点的独特表位，直接触发更强的免疫应答，轻松拿到高亲和力、高特异性的全人源抗体。“HUGO-Ab-eKO™同源速敲” 计划支持定制化服务，从靶点分析到小鼠制备，专业团队全程跟进，最快3个月交付4周龄eKO小鼠，全力满足客户项目需求。 

三、总结

在抗体研发中，“靶点难激活、抗体质量低、流程耗时长” 是常见的 “拦路虎”，赛业生物 HUGO-Ab-eKO™同源速敲小鼠定制服务，用 “精准基因编辑 + 全人源平台” 双优势，帮你攻克高难度靶点，快速推进抗体发现进程。

相关业务推荐