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多类型常见问题解答
常见点突变小鼠如何鉴定?
点突变由于只是单碱基或少数碱基的增加、缺失或替换,在电泳图上突变片段与野生型条带的大小绝大多数是无法区分的。因此只用PCR是无法鉴定的,还需要结合测序或者酶切来鉴定。
- 引物设计

- 预期片段大小及电泳结果
使用F/R扩增,条带1为野生及阳性的条带,扩增产物用F或R做测序引物进行测序。

- 测序结果
纯合子:靶位点测序峰图为目的突变单峰。
杂合子:靶位点测序峰图为目的突变峰及野生型峰图双峰。
野生型或其他阴性:靶位点测序峰图为野生型或其他峰,无目的突变峰。

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