在实际重编程中，大家常会遇到细胞增殖困难、转染效率低、克隆形成效果差等问题，这些难点共同影响重编程效率。

1. 体细胞的选择：无论是PBMC，皮肤成纤维细胞还是绒毛膜细胞，都需要提高初始细胞状态，部分情况还需要加入专属扩增培养基，增大细胞量。

2. 确定转染时间点：目的细胞纯度水平和转染效率高度相关，高纯度目的细胞有利于转染效率的提升，出克隆的效率更高。

3. 克隆生成培养基的选择：相同样本使用不同克隆生成培养基，出现不同克隆形成情况。赛业自研培养基能更有效的促进克隆形成，大大提升重编程成功率。

4. 克隆筛选、验证以及扩增：挑选合适的iPSC克隆，进行单细胞鉴定。鉴定合格，再进行后续的扩增。