1、SB检测为什么膜的条带两边深中间浅？

可能就是压的重物集中在中间部分，导致受力不均，中间的凝胶被压扁，转膜受阻。转膜时，压重物之前，可以在吸水纸上压一块光滑的玻璃板，尺寸不用太大，保证完全覆盖吸水纸，然后再将重物压在上面，保证各部位受力均匀。

2、条带形状为什么是哑铃型？

a.DNA溶解不充分或含盐离子等杂质，导致DNA在凝胶孔内分布不均；

b.制胶不均匀或梳子拔出时孔内残留碎片；

c.上样速度快，且点样完成后就立即电泳导致DNA在孔内扩散不均；一般静置5-10min，让DNA样本在凝胶孔内充分扩散；

d.电泳时电压过大，导致过热或电泳速度过快，亦引发条带扭曲。

e.也有可能时上样体积小，条带在胶孔内分布不均匀。

3、转膜的三明治结构到底怎样算太厚受力不均，又担心太松？

一般情况下，压的重物一般500g左右，压的重物太重就直接将凝胶压扁了，转膜效果会很差。其实不用严格限制重量，也可以轻一点，只要压上吸水纸，能正常往上吸水，转膜就可以正常进行，但一定要保证膜与胶之间能紧密贴合。内部转膜时长一般为20h左右，由于转膜时间长，压的吸水纸厚度最好大于10cm，同时每间隔一段时间（如6-8h），更换下未浸湿的吸水纸，提高转膜效率。