AAV实验中常用报告系统有两种：荧光报告基因；发光报告基因

➢荧光报告基因：EGFP、GFP、RFP和YFP等。我们AAV病毒包装常用的荧光报告基因为EGFP，常用检测方法有以下几种：（眼底直接成像）

核酸水平

1.EGFP DNA拷贝数检测（侵染效果）：提取相应组织DNA，通过qPCR或者ddPCR检测该组织中EGFP的拷贝数。

2.EGFP RNA检测（转录水平和启动子相关）：提取相应组织RNA，反转录后通过qPCR或者ddPCR检测EGFP在该组织中的转录水平。

蛋白水平

1.直接检测：取样—固定（4%PFA）—冷冻包埋—切片—封片—观察。

2.免疫荧光检测：取样—固定（4%PFA）—冷冻包埋或者石蜡包埋—切片—免疫荧光染色—封片—观察。

3.WB

➢发光报告基因：Luc；GLuc等。在AAV实验中，发光报告基因主要用作动物活体成像，也可以和EGFP一样做qPCR、WB和免疫荧光等。

活体成像：麻醉小鼠—准备、注射荧光素（静脉或者腹腔）—等待成像（5-10min）—成像