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冻存小鼠胚胎进行留种的技术要点?
冻存小鼠胚胎进行留种的技术要点:
1)自然合笼方式:雌鼠促排后与雄鼠合笼,次日检栓,见栓小鼠获取胚胎进行胚胎冻存;
2)体外受精方式:雌鼠促排后取卵子与雄鼠精子进行IVF,获得早期胚胎进行胚胎冻存;
3)小鼠周龄:无论自然合笼还是体外受精的方式,雄鼠至少8周以上(性成熟),有交配经验的雄鼠优先使用;雌鼠周龄根据促排适宜周龄(数量和质量)选择合适的周龄,特殊品系如珍贵品系、免疫缺陷品系等等优选9周以上小鼠促排自然合笼的方式,可以获得质量相对较好的早期胚胎进行冻存;
4)胚胎类型:一般可以冻存受精卵、二细胞、囊胚;
5)冻存条件:液氮冻存。
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