常见问题
多类型常见问题解答
细胞药筛流程包括哪些步骤？
- 确定药物种类：应根据载体携带的抗性基因来选择，例如neo(G418)、puro(puromycin)、hygro(hygromycin)等。
- 浓度梯度预实验：设定一系列浓度梯度，在目的细胞上进行预实验，以便获得最佳药物浓度和筛选时间。
- 接种细胞：细胞汇合度最好在50%~80%左右，确保细胞状态良好，处于对数生长期。
- 药物筛选：药物稀释到合适的浓度加到细胞培养基，根据预实验结果设定合理的药物处理时间。需要同时设置WT对照孔以便观察药筛效果。
- 半药维持：待WT对照孔的细胞完全死亡时药筛完成，可以进行下一步操作。后续培养过程中可添加一半浓度的药维持培养。
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