1. 方案设计：包括确定检测标志物，依据检测指标表达特性进行配色；

2. 样本处理：依据样本是细胞还是组织样本确定样本的处理方法；

3. 染色：依据所用抗体的特性和检测指标的特性确定染色顺序和染色条件；

4. 上机检测：进行逻辑设门，对检测指标进行分析。