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McF-7细胞系的免疫缺陷小鼠模型如何构建?

构建McF-7细胞系的免疫缺陷小鼠模型需要综合考虑细胞特性、宿主小鼠的免疫缺陷程度、雌激素支持以及基质胶的使用等因素。以下是详细的构建方法:


一、模型构建步骤


1. 选择合适的宿主小鼠

• 赛业NKG小鼠:赛业NKG小鼠是一种高度免疫缺陷的小鼠模型,适合用于McF-7细胞系的移植。由于其免疫系统缺陷程度高,可以降低细胞接种量,减少宿主对肿瘤细胞的免疫排斥反应。在NKG小鼠上,推荐的McF-7细胞接种量为500万细胞/只小鼠(5M/mouse)。

• 裸鼠(Nude mice):裸鼠是一种常用的免疫缺陷小鼠模型,但其免疫缺陷程度相对较低。在裸鼠上构建McF-7模型时,需要更高的细胞接种量。在裸鼠上,推荐的McF-7细胞接种量为1000万细胞/只小鼠(10M/mouse)。


2. 细胞准备

• 细胞活性和活率:细胞接种时,细胞活性和活率要求较高。细胞活率应达到90%以上,以确保肿瘤能够成功生长。

• 基质胶的使用:为了提高细胞的附着和生长能力,建议在细胞悬液中添加基质胶(Matrigel)。基质胶可以模拟细胞外基质环境,促进肿瘤细胞的生长。


3. 雌激素支持

• 雌激素药片:McF-7细胞是雌激素受体阳性(ER+)的乳腺癌细胞,需要雌激素支持才能在体内生长。在构建模型时,需要在小鼠体内植入雌激素药片。

• 药片类型:建议使用缓释型雌激素药片,最好能够持续释放60天以上。

• 植入方法:通常通过皮下植入雌激素药片,确保雌激素在小鼠体内的稳定释放。


4. 细胞接种

• 接种部位:通常选择小鼠的乳腺脂肪垫进行细胞接种,因为这是乳腺癌细胞的自然生长环境。

• 接种方法:将准备好的McF-7细胞悬液(含基质胶)注射到小鼠的乳腺脂肪垫中。注射时需要确保细胞均匀分布,避免形成大的细胞团。


5. 监测肿瘤生长

• 生长周期:McF-7细胞在免疫缺陷小鼠体内的生长周期一般为78周。

• 肿瘤体积测量:定期测量肿瘤体积,当肿瘤体积达到2000mm³时,可以认为达到了实验终点。

• 测量方法:使用卡尺测量肿瘤的长径和宽径,计算肿瘤体积(体积=长径×宽径²×0.5)。


二、注意事项

1. 细胞状态:确保细胞在接种前处于良好的生长状态,细胞活率和活性是成功构建模型的关键因素。

2. 雌激素药片的稳定性:确保雌激素药片在小鼠体内能够稳定释放,避免因雌激素水平不足导致肿瘤生长缓慢或失败。

3. 免疫缺陷程度:选择免疫缺陷程度较高的小鼠模型(如赛业NKG小鼠),可以降低细胞接种量,减少宿主对肿瘤细胞的免疫排斥反应。

4. 基质胶的使用:基质胶可以提高细胞的附着和生长能力,但需要确保基质胶的浓度和使用方法适当。


构建McF-7细胞系的免疫缺陷小鼠模型需要综合考虑宿主小鼠的免疫缺陷程度、细胞活性和活率、雌激素支持以及基质胶的使用等因素。通过选择合适的宿主小鼠(如赛业NKG小鼠)、确保细胞活性、添加雌激素药片和基质胶,可以有效提高模型的成功率和稳定性。定期监测肿瘤生长,确保实验终点的准确性,是构建成功模型的重要环节。

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