影响 AAV 注射总量的因素很多,主要的有血清型、目标组织类型、注射方式(局部 or 全身)、动物模型(如大鼠 or小鼠等等)等。对于有文献报道的,可参考文献的注射方法/用量,并且以文献的注射方法/用量为基线,进行梯度式病毒用量摸索预实验,摸索出最佳的病毒用量。
以下列举一些常见的注射方法和用量(仅供参考,建议做梯度式病毒用量摸索预实验):
脑立体定位注射,单点注射的体积有限(小鼠的每个注射点是约1-2uL;大鼠的每个注射点是约1-5uL),因此液体的体积量固定的情况下,滴度(浓度)才是关键。滴度越高,一次注射的病毒含量越多,效果就越显著。例如1E+12vg规格(滴度≥5E+12vg/mL,约200uL)大概能注射约50-100只小鼠。
尾静脉注射,推荐1~10E+11vg/小鼠。
尾静脉注射,推荐0.5~3E+11vg/小鼠。
气管内注射,推荐1~5E+11vg/小鼠。
尾静脉注射,病毒用量较大,一般5-10E+11vg/只小鼠。