小鼠眼球小，以较为常用的C57BL/6为例，小鼠眼轴长度约3.188±0.032mm，且与人相比，小鼠的晶状体较大，近乎球形，占据眼球体积约3/4，玻璃体腔较小，视网膜厚度较厚，因此小鼠进行眼部注射会比较困难。难以判断注射效果：缺乏有效的仪器监测注射过程，只能依靠操作人员的经验进行实验。