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PCR如何选择胶浓度?

根据PCR条带大小来确定,一般1 kb以内用2.0~2.5%的TBE胶(0.5× TBE 缓冲液来配制);1 kb以上用1.0~1.2%的TAE胶(1× TAE 缓冲液来配制)。

 

  • 5×TBE缓冲液母液的配制

  1. 分别用电子天平称取下列物品放入烧杯中。

    Tris

    108 g

    硼酸

    55 g

    Na2EDTA·2H2O

    7.44 g

  2. 加800 mL ddH2O使试剂溶解,倒入2L瓶中,定容至2 L。
  3. 使用时稀释十倍成0.5×TBE。

 

  • 50×TAE缓冲液母液的配制
  1. 分别用电子天平称取下列物品放入烧杯中。

    Tris

    484 g

    Na2EDTA·2H2O

    74.4 g

  2. 向烧杯中加入ddH2O约1500 mL,充分搅拌溶解。
  3. 加入2 mL的冰乙酸,充分搅拌。
  4. 用ddH2O定容至2L后,室温保存,待用。
  5. 使用时稀释50倍,即1×TAE。

备注:配制完成后进行平行实验测试配制试剂是否可用。

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