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PCR如何选择胶浓度?

      根据PCR条带大小来确定,一般1kb以内用2.0~2.5%的TBE胶( 0.5×TBE 缓冲液来配置);1kb以上用1.0~1.2%的TAE胶( 1×TAE 缓冲液来配置)。

 

  • 5×TBE缓冲液母液的配制

1. 分别用电子天平称取下列物品放入烧杯中。

Tris

108 g

硼酸

55 g

Na2EDTA·2H2O

7.44 g

2. 加800 mL ddH2O使试剂溶解,倒入2L瓶中,定容至2 L。

3. 使用时稀释十倍成0.5×TBE。

 

  • 50×TAE缓冲液母液的配制

1. 称量Tris 484 g,Na2EDTA·2H2O 74.4 g于2 L烧杯中。

2. 向烧杯中加入ddH2O约1500 mL,充分搅拌溶解。

3. 加入114.2 mL的冰乙酸,充分搅拌。

4. 用ddH2O定容至2L后,室温保存,待用。

5. 使用时稀释50倍,即1×TAE。

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