AAV递送PCSK9诱导的动脉粥样硬化（AS）模型

图1. 从左到右为不同时间点血浆生化检测总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的含量变化。总胆固醇（T-Thol）：对照组（AAV8-non coding，蓝色）维持在低水平。实验组（AAV8-AAT-mPCSK9，红色）从D0开始迅速上升，至D84达到约35 mmol/L，呈持续升高趋势，表明PCSK9过表达导致严重高胆固醇血症。甘油三酯（TG）：对照组保持稳定低水平。模型组从D0上升，在D28-D42间略有波动后继续升高，至D84约12-15 mmol/L，显示高甘油三酯血症。低密度脂蛋白（LDL）：对照组几乎无变化。模型组快速上升，至D84约15-18 mmol/L，主要反映LDL显著积累，这是PCSK9抑制肝脏LDL受体降解的典型效应。

图2. 主动脉弓大体油红O染色结果。对照组（AAV8-noncoding）主动脉弓呈淡粉色，几乎无明显红色染色，仅有极少量散在红色点状脂质沉积，表明无显著动脉粥样硬化斑块形成，血管壁清洁。模型组（AAV8-AAT-mPCSK9）主动脉弓显示大量鲜红色或深红色脂质染色区，主要集中在主动脉弓弯曲部（内曲面）和分支开口处（如无名动脉、左颈总动脉和左锁骨下动脉起点），斑块呈不规则片状分布，红色面积显著增加，表明严重脂质沉积和动脉粥样硬化斑块负荷。此结果典型反映AAV-PCSK9诱导的高胆固醇血症小鼠模型中，实验组斑块明显增多，而对照组几乎无病变。

图3. 肝脏组织冰冻切片油红O染色结果对比，评估肝脏中性脂质（主要为甘油三酯）沉积情况。对照组（AAV8-noncoding）肝组织背景呈浅蓝色，几乎无红色染色，仅有极少量散在蓝色细胞核和微量脂质点，表明肝细胞内几乎无脂质滴积累，肝脏正常无脂肪变性。模型组（AAV8-AAT-mPCSK9）肝组织显示大量鲜红色或橙红色脂质滴染色，脂滴呈大小不一的圆形空泡状广泛分布于肝细胞胞质内，部分区域脂滴融合成大泡，背景细胞核被挤压至边缘，表明严重肝脂肪变性和脂质过度积累。此结果典型反映在高脂血症或脂肪肝小鼠模型中，实验组肝脏脂质沉积显著增加，而对照组肝脏正常。

图4. 主动脉弓、主动脉窦H＆E染色结果。对照组（AAV8-noncoding）的主动脉弓、主动脉窦血管壁结构完整，内膜薄而光滑，无明显增厚或细胞浸润。模型组（AAV8-AAT-mPCSK9）主动脉窦及弓部内膜显著增厚，形成明显粥样斑块，伴泡沫细胞聚集、炎症细胞浸润和坏死核心。

图5. 主动脉弓Sirius Red染色结果。天狼猩红染色明场下，对照组（AAV8-noncoding）血管壁呈均匀粉红色，胶原染色轻微；模型组（AAV8-AAT-mPCSK9）血管壁胶原染色明显增强，呈较厚粉红色层。偏振光下，对照组显示较弱的双折射，主要为黄色-橙色纤维；模型组双折射显著增强，呈现强烈黄色-橙色至红色纤维，表明胶原含量增加，以成熟的I型胶原为主。

图6. 主动脉窦Sirius Red染色结果。天狼猩红染色明场下，对照组（AAV8-noncoding）血管壁胶原染色较少，呈薄层粉红色；模型组（AAV8-AAT-mPCSK9）斑块区域胶原染色显著增多，呈较厚粉红色纤维帽结构。偏振光下，对照组双折射弱，主要为黄色纤维；模型组斑块内双折射强烈，呈现明亮黄色-橙色至红色纤维，胶原沉积明显增加，提示纤维帽中I型胶原丰富。

图7. 主动脉弓、主动脉窦油红O染色结果。对照组（AAV8-noncoding）几乎无红色脂质沉积，血管壁清洁；模型组（AAV8-AAT-mPCSK9）斑块内大量红色脂质沉积，表明脂质负荷显著增加。