实现B细胞特异性表达的工具鼠——Cd19-iCre小鼠

Cd19是B淋巴细胞谱系特异性表面标志物，在B细胞发育的全过程中持续表达。Cd19-iCre工具鼠模型利用基因编辑技术，将经过密码子优化后，重组活性更高的Cre重组酶——iCre插入小鼠内源性Cd19基因中，使其在内源性Cd19启动子的调控下特异性表达。该模型可实现对B细胞谱系的高度特异性Cre-LoxP介导的基因重组，是研究B细胞发育、功能以及B细胞相关疾病（如自身免疫性疾病和B细胞淋巴瘤）的理想工具。

 

CD19：B细胞关键标志物与肿瘤免疫治疗的重要靶点

CD19是一种B细胞谱系特异性表面糖蛋白，作为B细胞受体（BCR）共受体复合物的关键组分，在B细胞活化、增殖和信号转导中发挥核心作用。它在前B细胞至成熟B细胞阶段持续表达，通过与CD21、CD81等分子形成复合物，显著增强BCR信号并降低B细胞活化阈值 ^[1]。由于CD19在大多数B细胞恶性肿瘤（如B-ALL、DLBCL）中呈现稳定高表达特征，这使其成为肿瘤免疫治疗的重要分子靶点。目前基于CD19的靶向治疗策略主要包括靶向CD19的CAR-T细胞（如Kymriah®、Yescarta®）、双特异性抗体（如Blincyto®）和抗体偶联药物。虽然CD19靶向治疗在血液系统恶性肿瘤中已取得显著临床疗效，但由抗原逃逸导致的治疗耐药性仍是待解决的临床挑战，这也推动了双靶点CAR-T等新型治疗策略的研发。此外，CD19在自身免疫性疾病中的作用也备受关注，使其成为免疫调控研究的重要分子。

 

图1. CD19通过正向调节B细胞抗原受体（BCR）信号传导 ^[2]。

 

Cd19-iCre工具鼠

由于CD19在B细胞发育和疾病中的关键作用，开发能够精准调控B细胞基因表达的工具鼠模型具有重要意义。为了解决传统Cd19-Cre工具鼠可能面临重组效率不够高、不完全，而导致嵌合体小鼠比例高、实验结果背景噪音大、表型分析困难等问题。赛业生物开发的Cd19-iCre小鼠模型（产品编号：C001741），通过优化Cre重组酶活性，为B细胞发育及免疫调控研究提供了精准的遗传操作工具。

 

一. 检测方法

怎么做？：将Cd19-iCre小鼠与RCL-tdTomato（产品编号：C001742）小鼠交配，获得双基因杂合子代。

看什么？：Cre重组酶介导表达终止元件（LSL）元件的删除，使tdTomato在Cre阳性细胞中表达。

查哪里？：检查免疫器官！5周龄时，取外周血、脾脏和骨髓组织，检测T、B细胞的tdTomato表达。

比什么？：设置对照组 (Cre-)，确保验证Cre重组酶活性的准确性。

 

二. 检测结果

a. 外周血 (PB)：FACS结果显示在Cre+小鼠的外周血B淋巴细胞（mCD19+）中存在极强的tdTomato表达，B淋巴细胞的重组效率约为98%，而在外周血T淋巴细胞（mCD3+）中几乎未发生Cre重组。

 

 

图2. 外周血B淋巴细胞、T淋巴细胞中tdTomato蛋白的表达情况。

 

b. 脾脏 (Spleen)：FACS结果显示在Cre+小鼠的脾脏B淋巴细胞（mCD19+）中存在极强的tdTomato表达，B淋巴细胞的重组效率约为88%。在Cre+小鼠的脾脏T淋巴细胞（mCD3+）中发现有微弱的Cre重组。

 

 

图3. 脾脏B淋巴细胞、T淋巴细胞中tdTomato蛋白的表达情况。

 

c. 骨髓 (BM)：FACS结果显示在Cre+小鼠的骨髓B淋巴细胞（mCD19+）中存在极强的tdTomato表达，B淋巴细胞的重组效率约为86%~90%。

 

图4. 骨髓B淋巴细胞中tdTomato蛋白的表达情况。

 

• 核心优势总结

Cd19-iCre工具鼠是一种基于B细胞谱系特异性标志物CD19开发的基因编辑模型。该模型通过将优化后的iCre重组酶精准敲入小鼠Cd19基因位点，使其表达受内源性Cd19启动子调控。当Cd19-iCre小鼠与含有loxP位点的条件性基因修饰小鼠杂交后，其子代小鼠可实现B细胞特异性的Cre-loxP重组，从而实现对B细胞谱系的精准遗传操控。

 

• 赛业生物免疫学Cre工具鼠

此外，为推动免疫学研究，赛业生物开发了多款Cre工具鼠，成功助力相关领域的疗法研发。

 

• 免疫细胞特异性Cre工具模型

 

免疫细胞	产品编号	产品名称	启动子	重组酶
CD8+ T细胞	I001090	Rosa26-Cd8a-Cre	Cd8a	Cre
B细胞	C001552	Mb1-iCre	Cd79a	iCre
	C001741	Cd19-iCre	Cd19	iCre
T细胞、B细胞	I001170	Cd2-P2A-CreERT2	Cd2	CreERT2
	I001171	Cd2-IRES-iCre	Cd2	iCre
生发中心B细胞、滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)	I001071	Bcl6-P2A-CreERT2	Bcl6	CreERT2
NK细胞	I001173	Klrd1-P2A-iCre	Klrd1	iCre
NK细胞、CD8+ T细胞	I001110	Nkg7-iCre	Nkg7	iCre
树突状细胞	C001662	Itgax-Dre	Itgax	Dre
经典型树突状细胞	C001574	Zbtb46-IRES-iCre	Zbtb46	iCre
	C001575	Zbtb46-P2A-CreERT2	Zbtb46	CreERT2
Ⅰ型经典型树突状细胞(cDC1细胞)	C001573	Xcr1-IRES-iCre	Xcr1	iCre
巨噬细胞	I001169	Adgre1-P2A-CreERT2	Adgre1	CreERT2
Kupffer细胞	C001353	Clec4f-iCre	Clec4f	iCre
嗜酸性粒细胞	I001140	Epx-iCre	Epx	iCre
中性粒细胞	I001072	Cxcr2-P2A-CreERT2-T2A-EYFP	Cxcr2	CreERT2
单核细胞、巨噬细胞	I001172	Cd68-P2A-iCre	Cd68	iCre
	C001734	Cd68-P2A-CreERT2	Cd68	CreERT2
单核细胞、巨噬细胞、粒细胞	C001358	Lyz2-IRES-iCre	Lyz2	iCre
	C001499	Lyz2-IRES-CreERT2	Lyz2	CreERT2
单核细胞、巨噬细胞、小胶质细胞	C001391	Cx3cr1-iCre	Cx3cr1	iCre
巨噬细胞、树突状细胞和骨髓来源的粒细胞	I001160	Csf1r-IRES-iCre	Csf1r	iCre
树突状细胞、巨噬细胞、造血干细胞以及Clec3b+细胞	C001652	Clec3b-iCre	Clec3b	iCre
嗜酸性粒细胞、效应T细胞和中性粒细胞等	I001082	Ltb4r1-P2A-Cre	Ltb4r1	Cre
小胶质细胞、巨噬细胞、树突状细胞、单核细胞以及Trem2+细胞	I001080	Trem2-P2A-Cre	Trem2	Cre
	C001677	H11-Trem2-iCre	Trem2	iCre
	C001678	Trem2-IRES-CreERT2	Trem2	CreERT2
肥大细胞、嗜碱性粒细胞以及Cpa3+细胞	C001661	H11-Cpa3-Cre	Cpa3	Cre
免疫系统（淋巴细胞祖细胞）	C001572	Il7r-iCre	Il7r	iCre
造血干细胞	C001357	H11-Vav1-iCre	Vav1	iCre

 

Cre重组酶结合荧光报告基因可进一步实现对特定细胞的荧光标记和谱系示踪，赛业生物可提供携带报告基因的免疫细胞特异性工具模型，可直接对某一类免疫细胞进行追踪。

 

• 免疫细胞荧光标记工具模型

 

免疫细胞	产品编号	产品名称	启动子	重组酶	荧光蛋白
中性粒细胞	I001072	Cxcr2-P2A-CreERT2-T2A-EYFP	Cxcr2	CreERT2	EYFP
肥大细胞、嗜碱性粒细胞以及Cpa3+细胞	I001146	Cpa3-P2A-iCre-EGFP	Cpa3	iCre	EGFP
树突状细胞，巨噬细胞以及Cd209a+细胞	C001651	Cd209a-IRES-iCreERT2-P2A-EGFP	Cd209a	iCreERT2	EGFP
巨噬细胞、活化T细胞、小胶质细胞以及Cxcl10+细胞	C001653	Cxcl10-P2A-EGFP	Cxcl10	Cxcl10	EGFP

 

CD19基因及其编码的蛋白在B细胞生物学中发挥着关键作用，不仅是B细胞发育和功能的标志，也是B细胞相关疾病的重要治疗靶点。对CD19基因的研究有助于深入理解B细胞生物学和疾病发生机制，赛业生物可提供免疫细胞模型为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。

 

• 赛业免疫细胞模型

 

商品类型	产品编号	产品名称	产品规格	细胞名称	细胞类型
敲除细胞系	SY-KO-00458	Human CD19 knockout HMy2.CIR cell line	1*10^6	人B淋巴母细胞 （HMy2.CIR ）	悬浮细胞

 

此外，为推动免疫学研究，赛业生物开发了多款Cre工具鼠，成功助力相关领域的疗法研发。

 

参考文献

• Aribi M. Introductory Chapter: B-Cells. Normal and Malignant B-Cell. IntechOpen; 2020. doi:10.5772/intechopen.90636.
• Li X, Ding Y, Zi M, Sun L, Zhang W, Chen S, Xu Y. CD19, from bench to bedside. Immunol Lett. 2017 Mar;183:86-95. doi: 10.1016/j.imlet.2017.01.010. Epub 2017 Jan 30. PMID: 28153605.