“不会吧,还有人对自家的小鼠傻傻分不清?”
给小鼠做标记的重要性就来了——想必小鼠铲屎官们在小鼠实验过程当中都会遇到需要对小鼠进行编号分组的情况。想要编号清楚、易于辨识又操作简便,比较通用的做法就是给小鼠剪脚趾。那么,给小鼠剪脚趾应该注意哪些事项呢?快来跟随赛博士一起学习下吧,带你get实验新技能。
一、不同标记方法的对比
❖目前有三种不同的方法,适用于新生B6小鼠的个体标记:剪趾法、脚趾纹身、皮下植入芯片。
❖对于新生幼仔:剪趾影响最小;其次是脚趾纹身;皮下植入芯片影响最大。
❖剪脚趾在幼仔很小的时候是允许的,特别是需要进行基因鉴定的情况。
❖脚趾纹身也可以在幼仔很小的时候进行。
❖皮下植入芯片需要在离乳后进行,会给幼仔带来疼痛。
❖这三种标记方法,不会影响小鼠成年后的日常行为(图1)。通过简化SHIRPA组测试以及旋转迷宫和升高迷宫测试评估,不会显著干扰成年动物的一般正常行为(例如移动、抓握和攀爬的能力)和感觉运动功能。
图1 7日龄剪爪(白色箭头指示)的小鼠,生长发育到12周龄时前爪的样子[1]
二、剪脚趾对小鼠的影响
❖总体来说,无论是从形态学、生理学还是动物福利的角度来看,剪脚趾都是个体标记和基因鉴定的一种可接受方法。
❖剪趾是一种比较常用的方法,对动物影响很小。如果剪下的脚趾用于基因检测,推荐剪趾法。
❖剪脚趾组和对照组的后代,在生长发育上接近,也未出现食仔,母鼠仍然继续照顾剪趾后的仔鼠。
三、剪脚趾的日龄要求
❖仅允许在小于等于7日龄的小鼠上使用剪趾法。其中,在5~7日龄小鼠身上操作最方便。
❖一般小于5日龄的小鼠,脚趾分区不明显。如果剪去的脚趾部分过多,会影响成年后小鼠的抓握力。
四、剪脚趾的具体操作
❖操作前,操作人员手套表面浸泡或喷雾消毒。
❖左手抓取小仔鼠,腹部面向操作者,头部朝上,用左手食指和拇指固定住需要断趾的脚爪,用酒精棉球消毒脚趾。
❖用眼科剪(高压灭菌进入设施,使用前经75%酒精棉球消毒)剪去脚趾。
❖剪脚趾操作剪取的鼠爪量为鼠爪趾尖组织1~2mm,大约为整个脚趾的前端1/3,对应人的第一指节。尽量减少剪断的脚趾对小鼠运动的影响。
❖每取完一只小鼠,眼科剪需75%酒精擦拭消毒,以防小鼠交叉感染和样品污染。
❖如眼科剪疑似接触到污物,不得继续使用。
❖当天使用完毕后,眼科剪需要高压灭菌消毒。
五、剪爪编号规则
❖剪爪编号规则如图2所示,仅供参考。
❖编号要点:小鼠腹部朝上进行剪爪或者读数;编号剪爪的数字可以为1-99,成百数字默认不剪爪或者不识别(例如:100,200,1300……)。
图2 小鼠剪爪编号示例
图源:赛业生物