“外源性过表达”与“定点整合”是两种截然不同的基因操作策略。

（1）外源性过表达（随机整合）：将含有目的基因的载体（如慢病毒）导入细胞，载体随机整合至基因组中，再通过抗性筛选（如嘌呤霉素）获得表达该基因的阳性细胞池。这种方法操作简便、快速，适用于基因功能的初步验证（如快速验证某蛋白是否诱导凋亡）或少量蛋白生产。

（2）定点整合（安全位点敲入）：首先利用编辑系统在预设的“安全位点”（如AAVS1、ROSA26等）制造双链断裂。随后，通过同源定向修复（HDR）途径，将带有同源臂的供体载体（Donor）精准插入该位点。最后通过PCR、测序验证插入的位点与序列的正确性，并筛选无脱靶的纯合克隆。该方法能实现单拷贝、稳定且可预测的表达，适用于需要长期传代的稳定细胞系构建、药物筛选或临床级细胞疗法开发。