iPSC-CN（皮质神经元）

产品信息

服务编号	SY-iCN-00001
来源	iPSC（成纤维细胞）
基因型	WT
应用	阿尔茨海默病（AD）
培养体系	iPSC-CN培养基

培养条件	95% 空气；5% CO₂；37℃
产品状态	对数生长期；神经细胞样；轴突萌发
规格	1×10⁶个/管
保存条件	液氮（-196℃）

产品用途：本产品主要适用于神经系统疾病的基础研究、药物筛选以及细胞治疗领域的相关研究。常用于探索阿尔茨海默病等神经系统疾病的发病机制，筛选治疗神经系统关联疾病的潜在药物，探究细胞治疗在神经系统疾病治疗中的应用等。

注意：本产品在生产过程中严格控制无菌，后续培养过程请根据实际情况是否添加抗生素。

产品制备流程和细胞鉴定

产品制备流程和明场图

图1. 皮质神经元示例

iPSC培养：iPSC使用专用培养基进行培养，置于37℃、5% CO₂ 的恒温培养箱中，定期更换培养基，保持细胞处于良好的生长状态。
神经诱导分化：当iPSC生长至一定密度时，更换为神经诱导培养基，进行神经诱导分化。在诱导过程中，通过调整培养基成分和培养条件，引导iPSC向神经外胚层方向分化。
细胞消化：利用酶解法（Accutase 酶）将细胞从培养皿中分离出来。
皮质神经元前体细胞培养：将收获的神经前体细胞接种到含有皮质神经元完全培养基的培养皿中进行分化培养，待细胞生长至合适时间收获实验验证。

注意：该部分展示从iPSC到成熟皮质神经元的全流程，本产品即为D3天的前体细胞，复苏后继续分化培养至D14即可。

免疫荧光检测皮质神经元特异性标志物（NeuN、MAP2）

图2. iPSC来源皮质神经元特异性标志物的免疫荧光染色

免疫荧光染色显示iPSC分化的皮质神经元（第14天）表达神经元特异性标志物NeuN（红色）和MAP2（绿色），细胞核由DAPI复染（蓝色）。合并图显示NeuN与MAP2共定位，确认神经元身份及成熟状态。

成熟皮质神经元膜片钳电生理测试

图3. iPSC来源皮质神经元膜片钳电生理检测

（图A）iPSC来源皮质神经元的电压门控钠/钾电流记录全细胞膜片钳记录显示，在去极化步阶刺激下，神经元产生典型的快速内向钠电流（向下deflection）和缓慢外向钾电流（向上deflection），表明功能性电压门控离子通道的表达。（图B）iPSC来源皮质神经元诱发的动作电位在电流钳模式下，向神经元注入去极化电流脉冲可诱发单次或多次动作电位，显示神经元具备兴奋性和动作电位发放能力。（图C）iPSC来源皮质神经元自发的动作电位在无外加刺激条件下，记录到神经元自发性动作电位发放，提示神经元具备自主电活动能力，进一步证实其功能成熟度。

图4. iPSC来源皮质神经元表达血脑屏障靶向相关分子TFR和CD98

流式细胞术检测iPSC分化的皮质神经元中与血脑屏障（BBB）靶向递送相关的表面标志物表达。结果显示，绝大多数活细胞（Zombie阴性）共表达TFR（转铁蛋白受体）和CD98（LAT1/CD98hc）。

TFR是经典的血脑屏障受体介导转cytosis（RMT）靶点，CD98则与氨基酸转运及BBB内皮细胞功能调控相关。该结果提示iPSC来源神经元不仅具备神经元功能特性，同时可能保留或共表达与BBB靶向递送相关的分子特征，为其作为体外BBB模型或中枢神经系统靶向药物筛选模型提供了依据。

质量控制

1.
通过细菌、真菌、支原体检测。

iPSC-皮层神经元BBB相关靶点流式验证指南

处理原则

1.
本产品仅供科研使用，不得用于临床治疗、诊断或其他非科研用途。
2.
在操作本产品前，操作人员应具备相应的细胞培养技能和生物安全防护知识，严格遵守生物安全操作规程，穿戴好无菌手套、口罩、防护服等防护用品，在超净工作台中进行无菌操作，避免细胞受到污染。
3.
冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出后，应迅速解冻，避免细胞在解冻过程中受到损伤；解冻后的细胞应尽快进行复苏和培养，不宜长时间放置。
4.
细胞培养过程中，应严格控制培养条件（如温度、CO₂浓度、pH值等），保持培养环境的稳定；培养基应在有效期内使用，使用前应检查培养基是否有浑浊、变色、沉淀等异常现象，若有异常，不得使用。
5.
在进行细胞传代、冻存等操作时，应避免过度消化或用力吹打细胞，以免损伤细胞；传代比例应根据细胞的生长速度和特性进行适当调整。
6.
本产品应按照规定的储存条件进行储存和运输，在储存和运输过程中，应定期检查储存设备和运输箱的温度，确保温度符合要求；若发现储存设备或运输箱出现故障，应及时采取措施，避免影响细胞质量。
7.
每批产品的质量控制报告应妥善保存，以备查阅；若在使用过程中发现产品质量问题，应及时与生产厂家联系，以便及时处理。