AAV诱导的小鼠阿尔茨海默病（AD）模型

赛业生物采用AAV介导的基因递送技术，将携带人源APP（含K670N、M671L、I176V、V717L突变）和PSEN1（含M146L、L286V突变）的AAV载体通过双侧立体定位注射递送至C57BL/6J小鼠海马区。该模型的主要特征包括：

• 造模周期明确：单次注射后2.5个月开始行为学改变，5-6个月出现显著Aβ斑块沉积
• 病理特征典型：海马区出现致密的Methoxy-X04⁺ Aβ斑块，伴随小胶质细胞活化及局部炎症反应
• 行为表现突出：雌性小鼠表现出显著的空间学习记忆缺陷（水迷宫），雌雄小鼠新物体识别能力均下降
• 适用性广：可用于AD病理机制研究及抗Aβ、抗炎、神经保护等药物的临床前评价

AAV诱导的小鼠阿尔茨海默病（AD）模型数据

实验概况

表1. AAV诱导AD小鼠模型的实验分组。G1组为溶剂对照组，接受双侧海马立体定位注射溶剂；G2组接受双侧海马立体定位注射AAV-APP和AAV-PSEN1。AAV载体分别携带含K670N、M671L、I176V、V717L突变的人源APP基因，以及含M146L、L286V突变的人源PSEN1基因。各组均包含雄性和雌性小鼠。

图1. 8周龄雄性和雌性C57BL/6J小鼠于第1天接受单次脑立体定位注射。注射2.5个月后进行行为学评估（包括旷场实验、新物体识别和水迷宫），注射5-6个月后取脑组织进行病理学研究。

行为学研究

图2. 注射2.5个月后旷场实验结果。雌性G2小鼠总移动距离较G1显著减少，表明自主活动能力下降；各组中央区停留时间无统计学差异。

图3. 注射后2.5个月后新物体识别结果。G1组小鼠表现出显著的新物体偏好，提示其识别记忆功能正常；而G2组小鼠无论是雄性还是雌性，均未表现出对新物体的显著探索偏好，无法有效区分新旧物体，表明G2组小鼠整体已出现明显的认知功能受损。

图4. 注射2.5个月后NORT实验辨别指数结果。G2组平均辨别指数较G1组呈下降趋势，雌性尤为明显，但未达统计学显著性。

图5. 注射3个月后雄性小鼠水迷宫结果。G1组自第4天起逃避潜伏期显著缩短；G2组自第3天起亦表现出显著的学习能力。数据以平均值±标准误差表示。

图6. 注射3个月后雌性小鼠水迷宫结果。G1组自第2天起表现出快速且高度显著的学习能力。G2组整个训练期内逃避潜伏期较第1天均无显著缩短，结果表明G2雌性小鼠存在空间学习能力缺陷。数据以平均值±标准误差表示。

病理学研究

图7. 注射5-6个月后海马区Aβ斑块检测（Methoxy-X04染色）。Methoxy-X04阳性Aβ斑块仅在G2组中检测到，G1对照组未见任何信号。Aβ斑块特异性表达于海马区域，呈致密的细胞外聚集形态，符合淀粉样蛋白沉积的典型特征。

图8. 注射5-6个月后海马区小胶质细胞活化（Iba1染色）。G1组Iba1阳性细胞呈分枝状静息形态；G2组小胶质细胞转变为阿米巴状活化状态，胞体增大、突起回缩，并常聚集于Aβ斑块周围，表明淀粉样蛋白沉积激发了强烈的局部炎症反应。