热门靶点ANGPT2及VEGFA/ANGPT2双靶人源化模型的应用

血管生成素-2（ANG2）作为调控血管稳态的关键因子，其异常表达与肿瘤和糖尿病视网膜病变等疾病密切相关，已成为药物研发的重要靶点。近年来，靶向ANG2/VEGF的双特异性抗体药物（如罗氏Faricimab）凭借显著临床疗效迅速成为市场热点，推动了对高预测性动物模型的需求。为此，赛业生物开发了ANGPT2人源化及VEGFA/ANGPT2双人源化小鼠模型，通过精准基因替换实现人源蛋白表达调控，不仅可支持单一靶点药物评价，更能为当前热门的双抗药物及联合疗法提供高度临床相关的实验平台，助力突破抗血管生成治疗的疗效瓶颈。

 

ANG2：血管稳态与重塑的核心调控因子

血管生成素-2（ANG2）是由ANGPT2基因编码的分泌型糖蛋白，通过特异性结合TIE2受体调控血管稳定性和病理性重塑。该蛋白以二聚体形式发挥功能，其浓度依赖性调控特征表现为：在VEGF存在条件下，低浓度ANG2促进血管生成，而高浓度则通过拮抗TIE2受体信号通路削弱血管稳定性，导致血管渗漏和炎症反应。这种精确调控依赖于三个特征性结构域：C端纤维蛋白原样域直接介导TIE2受体结合，中央coiled-coil结构域维持蛋白二聚化状态，N端超家族域则调控蛋白分泌和亚细胞定位。ANGPT2基因表达失调与多种病理过程密切相关，包括肿瘤血管异常增生、糖尿病视网膜病变微血管损伤以及慢性炎症性疾病中的血管重塑异常。

 

图1. Ang/Tie信号通路的调节机制 ^[1]。

 

VEGFA/ANGPT2：血管生成的双重调控枢纽

VEGFA（血管内皮生长因子A）和ANGPT2是协同调控血管生成的核心分子。VEGFA通过结合VEGFR2（KDR/Flk-1）直接驱动内皮细胞增殖和迁移，而ANGPT2则通过调节TIE2信号通路，影响血管成熟和稳定性。两者共同构成血管生成的"开关"机制：VEGFA诱导初始血管出芽，ANGPT2则决定新生血管的命运——稳定（当TIE2活化时）或退化（当ANGPT2抑制TIE2时）。它们的相互作用依赖微环境信号，如缺氧（HIF-1α上调VEGFA）和炎症（TNF-α诱导ANGPT2释放）。在病理状态下（如肿瘤、眼底病变），VEGFA/ANGPT2的过度激活会导致血管异常增生和渗漏，而双重靶向抑制（如抗VEGF/抗ANGPT2联合疗法）可更有效地阻断病理性血管生成。

 

 

图2. 靶向ANG2和VEGF实现血管稳定化 ^[2]。

 

ANG2/VEGFA靶向药物新进展
ANG2通路的复杂性决定了单一靶向治疗的局限性，其在血管生成和炎症调控中具有多效性和环境依赖性，甚至可能在不同病理条件下发挥相反作用。这种生物学特性促使研究者转向联合治疗策略，例如同时靶向VEGFA和ANG2的双特异性抗体，或将ANG2抑制剂与免疫检查点阻断剂联用，通过多通路协同干预来更有效地调控血管异常和免疫微环境，从而克服单药治疗的耐药性并提升临床疗效。2025年，靶向ANG2和VEGFA的疗法在眼底新生血管疾病（如nAMD和DME）及部分实体瘤治疗中持续发挥重要作用。

 

眼科领域，罗氏的Vabysmo（Faricimab）凭借双靶点抑制优势，以2024年全球销售额38.64亿瑞士法郎(约46.0亿美元)的业绩领跑市场，其疗效持续得到真实世界数据支持 ^[3]。中国药企如康哲药业正加速研发同类四价双抗，其纳米抗体设计具有高亲和力、低给药频率等优势，在2025年持续推进针对nAMD的临床试验，并在今年3月发布的2024年年度报告中提及药物已完成I期临床试验，并启动了II期临床试验的首例患者给药 ^[4]。

 

肿瘤领域，双靶点抑制通过重塑微环境促进CD8+ T细胞浸润，成为联合免疫治疗（如联合VEGF和ANG2抑制剂与PD-1抗体）的研究热点，尤其在胶质母细胞瘤等难治性肿瘤中探索协同机制以克服耐药性。

 

当前，靶向ANG2和VEGFA的疗法在眼科已实现成熟应用，而在肿瘤治疗中仍处于机制深化与临床突破阶段。

 

图3. 法瑞西单抗作用机制概览——导致血管渗漏减少和新生血管过程的抑制。 ^[5]。

 

ANGPT2/VEGFA人源化小鼠：抗血管生成治疗新工具

赛业生物开发的ANGPT2基因人源化小鼠模型（产品编号：C001615）和VEGFA/ANGPT2双基因人源化小鼠模型（产品编号：C001691），为肿瘤及眼血管疾病研究提供了高效的工具平台。这些模型能够：1）加速验证ANGPT2作为血管及炎症性疾病治疗靶点的转化医学价值；2）促进开发更高效的VEGFA/ANGPT2双靶点治疗药物；3）提升现有抗血管生成药物的临床疗效评估效率，为创新药物研发提供强有力的临床前研究支持。

 

产品名称	产品编号	品系全称	类型
B6-hANG2(ANGPT2)小鼠	C001615	C57BL/6JCya-Angpt2tm1(hANGPT2)/Cya	ANGPT2基因人源化
B6-hVEGFA/hANGPT2小鼠	C001691	C57BL/6JCya-Vegfatm1(hVEGFA)Angpt2tm1(hANGPT2)/Cya	VEGFA/ANGPT2基因人源化

部分验证数据如下（详见品系说明书）。

 

mRNA表达水平检测

RT-qPCR检测结果显示，纯合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠体内人源ANGPT2基因显著表达，鼠源Angpt2基因无表达。

 

图4. 5周龄雄性纯合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）的Angpt2 mRNA表达检测。

 

蛋白水平表达检测

Western Blot检测结果显示，WT小鼠和B6-hANG2(ANGPT2)小鼠血浆中均检出目的条带，推测可能由人鼠同源性过高所致，B6-hANG2(ANGPT2)小鼠的ANG2蛋白表达量略高于WT小鼠。

 

图5. 8周龄雄性B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）的蛋白表达检测。

 

蛋白水平表达检测

ELISA结果显示，B6-hANG2(ANGPT2)小鼠血清和血浆中存在人源ANG2蛋白的显著表达，并且血清和血浆中的蛋白含量无差异，而WT小鼠中未检测到人源ANG2蛋白。

 

图6. 8周龄雄性B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）血清和血浆中人源蛋白表达检测。

 

视网膜表型检测

纯合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠的眼底形态和视网膜OCT结果与野生型一致。

 

 

图7. 6周龄纯合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠和野生型小鼠（WT）的眼底形态（Fundus）和光学相干断层扫描（OCT）检测结果。

 

*OD (Oculus Dexter)：右眼；OS (Oculus Sinister)：左眼。

 

视网膜电图（ERG）检测

6周龄纯合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠暗适应（Scotopic）和明适应（Photopic）的a波、b波振幅几乎与野生型相同。

 

图8. 6周龄野生型小鼠（WT）和纯合B6-hANG2(ANGPT2)小鼠眼部ERG检测结果。

 

模型总结

综上，赛业生物开发的ANGPT2人源化小鼠（产品编号：C001615）和VEGFA/ANGPT2双人源化小鼠（产品编号：C001691）成功模拟了人类血管生成调控的关键通路，为血管相关疾病（如肿瘤、糖尿病视网膜病变）的机制研究提供了可靠平台。其高度临床相关性使其成为靶向ANG2/VEGFA药物开发、联合疗法评估和临床前药效验证的理想工具，可显著加速抗血管生成治疗方案的研发进程。

 

参考文献

• Sha L, Zhao Y, Li S, Wei D, Tao Y, Wang Y. Insights to Ang/Tie signaling pathway: another rosy dawn for treating retinal and choroidal vascular diseases. J Transl Med. 2024 Oct 4;22(1):898. doi: 10.1186/s12967-024-05441-y. PMID: 39367441; PMCID: PMC11451039.
• Leong A, Kim M. The Angiopoietin-2 and TIE Pathway as a Therapeutic Target for Enhancing Antiangiogenic Therapy and Immunotherapy in Patients with Advanced Cancer. Int J Mol Sci. 2020 Nov 18;21(22):8689. doi: 10.3390/ijms21228689. PMID: 33217955; PMCID: PMC7698611.
• China Medical System Holdings Limited. 2024 Annual Report. Hong Kong: China Medical System Holdings Limited; 2024. [Accessed June 7, 2025].
• Hoffmann-La Roche Ltd. Communications appendix tables_FY 2024 Sales + Results [Internet]. Basel, Switzerland: F. Hoffmann-La Roche Ltd.; 2025. Vabysmo sales. Available from: https://roche.com/appendix-tables-fy-2024.pdf. Accessed June 7, 2025.
• Ferro Desideri L, Traverso CE, Nicolò M, Munk MR. Faricimab for the Treatment of Diabetic Macular Edema and Neovascular Age-Related Macular Degeneration. Pharmaceutics. 2023 May 5;15(5):1413. doi: 10.3390/pharmaceutics15051413. PMID: 37242655; PMCID: PMC10222467.