在基因功能研究中，基因敲入（KI）模型的构建常面临效率低、周期长、嵌合体不确定性等挑战。传统方法从ES细胞打靶到获得稳定遗传的纯合子小鼠，往往需要12个月以上的多代繁育，且易受基因表达泄露、遗传背景不纯等因素干扰，严重拖慢科研进程。

依托于专属Cre-ES细胞系与TurboKnockout®基因编辑技术，赛业生物可直接在ES细胞水平完成精准敲入，并通过技术实现100% ES细胞来源的Founder小鼠，F0代即为目标基因纯合敲入，无需额外繁育交配。通过将周期缩短至5-6个月，重新定义基因敲入模型构建效率！欢迎拨打400-680-8038或邮件至info@cyagen.com或点击侧边栏在线咨询联系我们。

活动时间：2026年7月9日至2026年9月1日

活动对象：全国科研终端客户

Cre-ES细胞系构建方案核心优势：F0代纯合子，周期更短，品系纯正
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传统基因修饰构建方案核心特点：构建成本相对较低，适合时间安排更宽裕的项目
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CKO纯合子小鼠构建流程

Cre-ES细胞系构建方案（5-6个月）

载体构建

Cre-ES细胞电转

阳性克隆显微注射，获得100%嵌合目标基因敲入纯合子鼠：KI/KI

• 传统基因修饰构建方案（10.6-15.6个月）

载体构建

原核显微注射获得F0鼠

F0鼠

WT鼠

获得稳定遗传的F1代鼠：KI/+

F1鼠

Cre/Dre工具鼠

获得组织特异性敲入的纯合子F3鼠：KI/KI, Cre

F2鼠：KI/+, Cre

鼠：KI/+

获得组织特异性敲入的杂合子F2鼠：
KI/+, Cre 或KI/+

不止于“快”，更在于“稳”：两大核心技术支撑

Cre-ES细胞系

基于ES打靶技术的
TurboKnockout®基因编辑技术

专为条件性基因调控设计，稳定携带经验证的Cre重组酶表达系统，无表达沉默隐患，为模型质量奠定基础。

Cre-ES细胞系精选	对应Cre小鼠精选	Cre表达组织	订购
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*数百种Cre工具鼠现货模型，欢迎前往智鼠商城查询订购，或点击侧边栏在线咨询联系我们>>

突破传统ES打靶的嵌合率瓶颈，实现100%嵌合Founder小鼠构建，确保F0代即为纯合子，无需后续筛选，效率与质量双保险。

Cre-ES纯合子小鼠三大核心优势

周期极速，效率革新

颠覆“ES打靶+多代繁育”的传统流程。依托预验证的Cre-ES细胞系与TurboKnockout®技术，实现“从ES细胞打靶到100%嵌合Founder小鼠”的无缝衔接，F0代即为纯合子，快至5个月，让您的科研进度快人一步。

品系背景高度统一，数据可靠可追溯

确保100% ES细胞来源，从源头避免传统混配导致的品系混杂问题（如C57BL/6N与6J混淆），让你的实验数据更稳定、可追溯。

显著降低成本，高效应对复杂调控

无需额外采购Cre工具鼠，无需多代繁育，直接节约多重成本。依托ES细胞平台可预先验证编辑效果，大幅降低失败风险与隐形成本，并能高效支持复杂的多基因调控研究。

Cre-ES纯合子小鼠构建案例——CD8-Cre ES

1 首先对CD8-Cre小鼠的ES细胞进行建系，继而在CD8-Cre ES基础上进行Rosa26-LSL-tdTomato的KI，KI后的ES克隆未检测到tdTomato的泄露表达。

图1. CD8-Cre ES及打靶Rosa26-LSL-tdTomato后ES克隆tdTomato的表达情况

2 将获得的Rosa26-LSL-tdTomato的KI ES阳性克隆和未编辑的CD8-Cre野生型克隆通过TurboKnockout®技术显微注射到小鼠胚胎中，Cre酶介导的重组将导致tdTomato蛋白在阳性Founder鼠Cre阳性细胞中表达。Founder小鼠4周时采集外周血和脾脏组织通过流式细胞术检进行tdTomato蛋白的表达情况以确定Cre重组酶的活性。

如图2所示，90%以上的外周血和脾脏CD8+T细胞都表达Cre重组酶，图3显示CD4+T细胞中不存在重组酶的活性。