【抗体小课堂】HUGO-Mab、HUGO-light和HUGO-nano抗体小鼠，如何精准选择？

在抗体药物研发的 “战场” 上，选对小鼠模型至关重要。上期我们剖析了 C57BL/6、BALB/c 和 SJL 背景全人源化抗体鼠的特性与应用，本期聚焦赛业生物的明星产品 ——HUGO-Mab^TM、HUGO-Light^TM和 HUGO-Nano^TM小鼠模型，它们就像三位身怀绝技的"超级英雄"，看看它们如何各展神通，为你的研发之路精准导航。我们先来看下三位英雄的档案：

一、HUGO-Mab^TM：经典全人单抗研发的 “全能战士”

（一）核心特性：复刻人类抗体的 “原汁原味”
赛业生物的HUGO-Mab^TM小鼠使用TurboKnockout® ES打靶技术，将（i）小鼠抗体重链和Kappa轻链可变区序列在原位被替换为人源可变区基因序列，不表达小鼠V(D)J序列，但保留了小鼠恒定区编码基因和调控元件，以支持抗体类型转换；另外将（ii）小鼠Lambda轻链可变区及恒定区序列全部替换为人源基因序列，不表达小鼠Lambda轻链序列。HUGO-Mab™小鼠中含有所有的人源抗体可变区序列，其多样性丰富。面对抗原刺激时，能够产生与野生型小鼠相同水准的强烈免疫反应，产生高效价和多样性抗体。

因此，HUGO-Mab^TM小鼠携带全套人类免疫球蛋白基因，包括重链、Kappa 和 Lambda 轻链可变区 germline 基因，如同搭建了一座完整的人类抗体 “生产工厂”。这意味着它能在体内产生接近人类天然抗体的全人源抗体，免疫原性低，亲和力成熟机制完备，就像战士配备了全套装备，能在不同战场灵活应对，HUGO-Mab^TM对多种靶点和研发场景都有出色表现 。

（二）适用场景：单抗研发的 “主战场”
1、针对构象型表位的治疗性抗体开发：构象型表位依赖抗原蛋白的三维结构，需重链和轻链可变区协同识别（单一链难以精准结合），例如CXCR4 的活性表位是其胞外区折叠形成的构象结构，需重链和轻链可变区通过多样性组合 “匹配” 这一构象。HUGO-Mab^TM小鼠的重链 + 轻链可变区自然配对，能筛选出高特异性结合活性构象 CXCR4 的抗体，阻断其与配体（如 SDF-1）结合，抑制肿瘤转移或 HIV 入侵。

2、弱免疫原性抗原的抗体开发：部分抗原（如自身抗原、保守性强的病毒抗原）免疫原性弱，需依赖重链 + 轻链可变区的多样性组合才能产生足够亲和力的抗体。例如针对某些免疫原性很弱的多肽类抗原，传统的方法只能通过免疫兔子来获得高亲和力抗体。HUGO-Mab^TM小鼠经过四次免疫后也可以产生大约243,000的免疫效价。并且，免疫后的HUGO-Mab^TM小鼠脾脏B细胞经过单B技术筛选，可以获得亲和力在纳摩尔（nM）水平的多肽抗原特异性抗体。

3、诊断用抗体开发（需高特异性区分相似抗原）：诊断抗体需精准识别目标抗原，避免与同源蛋白交叉反应。例如PS（前列腺特异性抗原，前列腺癌标志物） 存在多种亚型（如游离 PSA、结合 PSA），且与其他丝氨酸蛋白酶（如激肽释放酶）同源性高。HUGO-Mab^TM小鼠的重链 + 轻链可变区可通过多样性组合识别 PSA 特有的构象表位，开发出高特异性诊断抗体，避免假阳性。

二、HUGO-Light^TM： 共轻链抗体的 “轻链专家”

（一）核心特性：标准化轻链的 “协同作战”
赛业生物的HUGO-Light^TM小鼠的独特之处在于其共轻链设计。该品系小鼠（i）重链使用HUGO-Mab™小鼠重链，可变区替换为人源VDJ可变区全长序列；（ii）Kappa轻链经TurboKnockout® ES打靶技术改造，使得小鼠Kappa light chain可变区固定仅表达1个VJ可变区组合；（iii）Lambda light chain完全缺失，这种基因编辑方式使小鼠产生的抗体具有相同的轻链。

HUGO-Light^TM小鼠如同一位擅长 “标准化协作” 的专家，让不同重链都能与它产生的抗体统一轻链高效配对。这种设计与Knob-into-hole技术搭配使用，既可以省去了某些双抗结构专利的高额授权费，也避免了传统抗体轻链错配的问题。这就像部队采用标准化装备，大幅提升协同作战效率，显著简化双抗、多抗的工程化改造流程。

（二）适用场景：双抗 / 多抗研发的 “协同战场”
1、双特异性抗体开发：在双抗研发中，需要两种不同的抗体片段精准组合，识别两个不同的靶点。HUGO-Light^TM小鼠的共轻链特性，可使两条不同的重链分别与共轻链配对，形成双抗结构，减少错配杂质，是双抗研发的理想工具。这就像 “轻链专家” 协调两支特种部队，精准打击两个靶点。

2、多特异性抗体构建：对于更复杂的多特异性抗体，HUGO-Light^TM小鼠同样能发挥优势。其共轻链可作为通用 “配件”，与多种重链组合，构建出能同时识别多个靶点的多特异性抗体，为攻克复杂疾病（如多靶点驱动的肿瘤）提供有力武器。

三、HUGO-Nano^TM：纳米抗体的 “纳米特种兵”

（一）核心特性：小巧灵活的“精准突破”

HUGO-Nano^TM全人纳米抗体小鼠（Fully Human Heavy Chain Antibody Mice）是一种经过基因改造的小鼠模型，用于产生完全人源化的仅重链抗体。HUGO-Nano^TM小鼠产生的抗体由单一的重链组成，无需轻链辅助即可与抗原结合，类似于骆驼科动物的重链抗体。HUGO-Nano^TM小鼠结合了全人源抗体的临床优势和仅重链抗体的结构特点，具有高稳定性、小分子量和工程化潜力，适合用于复杂疾病靶点的开发。这种技术推动了抗体药物在新靶点开发、双特异性抗体设计及诊断工具开发中的广泛应用。

赛业生物的HUGO-Nano^TM小鼠专注于纳米抗体的生产，如同一位身材小巧、行动敏捷的 “纳米特种兵”。纳米抗体具有分子量小、穿透力强、稳定性高的特点，能深入传统抗体难以抵达的 “阵地”（如细胞内靶点、肿瘤微环境深处），在药物研发中展现出独特的应用潜力。

（二）适用场景：特殊靶点的 “攻坚战场”
1、需穿透血脑屏障的中枢神经系统疾病治疗：血脑屏障对大分子（如常规抗体，150kDa）穿透性极差，纳米抗体由于其小尺寸可通过被动扩散或受体介导进入脑内。如Tau 蛋白聚集在脑内神经元中，常规抗体难以穿透血脑屏障。若通过HUGO-Nano^TM小鼠筛选出抗 Tau 纳米抗体可穿过血脑屏障，结合过度磷酸化的 Tau（阻止其聚集），且小尺寸可更均匀分布于脑组织（覆盖更多病灶）。

2、实体瘤深部靶点的抗体开发：实体瘤（如胰腺癌、肝癌）存在致密基质（纤维化组织），常规抗体难以穿透至肿瘤内部，纳米抗体可通过基质缝隙到达深部病灶，如Claudin 18.2在胃癌细胞表面，高表达，但肿瘤中心被纤维基质包裹（常规抗体穿透率 < 10%）。而纳米抗体可穿透基质到达肿瘤深部，提高肿瘤治疗的精准性和疗效。

3、识别 “隐蔽表位” 的抗体开发：功能表位隐藏在蛋白的缝隙或凹槽中（如酶的活性中心），常规抗体因抗原结合位点 “体积大” 难以插入，如KRAS G12C 的致癌性依赖其活性中心的 GDP/GTP 结合口袋（隐蔽表位，开口狭窄），常规抗体难以进入。纳米抗体可通过灵活的重链可变区插入口袋，结合 G12C 突变位点（阻止 GDP 释放，抑制 KRAS 激活），且小尺寸可与小分子抑制剂协同（抗体阻断蛋白相互作用，小分子抑制酶活性）。纳米抗体小鼠可产生针对这些特殊靶点的纳米抗体，为开发针对 “隐蔽表位” 靶点的药物开辟新途径。

四、选择策略：按 “战场需求” 匹配英雄
1、研发目标导向：

• 如果您的研发目标是开发针对常见靶点的经典单克隆抗体，追求抗体的人源化程度和亲和力成熟，“全能战士” HUGO-Mab^TM小鼠无疑是首选，它能您提供最接近人体天然抗体的产品。

• 若聚焦于双抗或多抗研发，没有自主知识产权的双抗结构，希望简化双抗构建过程、提高筛选效率， “轻链专家” HUGO-Light^TM小鼠的共轻链设计将为你减少冗余工作（赛业目前有Top 8 κ轻链胚系基因和2款4个高频的轻链V基因的共同轻链小鼠可供选择）。

• 而当面对特殊靶点、需要开发纳米抗体时，“纳米特种兵” HUGO-Nano^TM小鼠则是不二之选，其在纳米抗体生产方面的优势无可替代。

2、靶点特性适配：考虑靶点的位置、结构和功能特性。

• 对于细胞表面或胞外靶点，三种模型都有各自的应对策略；

• 然而，针对细胞内靶点及需要穿透实体瘤致密微环境的靶点，HUGO-Nano^TM小鼠产生的纳米抗体可能更具优势。

同时，若靶点具有人鼠高度同源性，可能需要借助 HUGO-Ab-eKO^TM小鼠（基于 HUGO-Ab 系列，敲除小鼠靶点基因，增强免疫应答）来提高抗体筛选成功率。

（下下期“抗体小课堂”将为大家介绍HUGO-Ab-eKO^TM小鼠的构建方式与应用场景，敬请期待！）

HUGO-Mab^TM、HUGO-Light^TM和 HUGO-Nano^TM小鼠模型各有千秋，在抗体药物研发中扮演着不同但至关重要的角色。通过精准把握研发目标和靶点特性，选对 “英雄” 才能在抗体药物的研发战场上事半功倍。