iPSC基因编辑
赛业生物拥有成熟稳定的基因编辑平台以及上万例基因编辑项目经验，iPSC项目成功经验丰富。由罕见病数据中心（RDDC）开发的RNA剪接模型工具提供支持，可辅助筛选WB阴性克隆；基于Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统，轻松实现基因敲除、基因敲入、定点突变、稳转株等多种策略，编辑效率高达90%。适用于疾病机制研究、药物筛选平台构建、细胞治疗开发等领域，助力科研与转化医学项目高效推进。
iPSC基因编辑服务及交付标准
| 类型 | 项目 | 交付标准 | 质控标准 | 周期 | 订购 |
|---|---|---|---|---|---|
| 基因编辑细胞系（iPSC） | 基因敲除（KO） | 1个单克隆细胞株和1个野生型对照iPSC（2管/株，1×106细胞/管），实验报告 | PCR和测序，免疫荧光，细胞明场观察，无菌支原体 | 8周起 | |
| 定点突变（PM） | 8周起 | ||||
| 基因敲入（KI） | 12周起 | ||||
| 稳转细胞株（iPSC） | 干扰稳转株 | 稳转细胞株和对照细胞株（2管/株，1×106细胞/管），实验报告 | qPCR，免疫荧光，细胞明场观察，无菌支原体 | Cell Pool 9周起；单克隆13周起 | |
| 过表达稳转株 | Cell Pool 8周起+基因合成；单克隆12周起+基因合成 |
iPSC基因编辑服务流程
基因分析
载体构建
细胞转染
单克隆制备
QC检测
- 基因致死性/同源性分析
- 人工智能系统设计方案
Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统
- RNP递送
- 优化的α-donor
- 高效的电转系统
- 多克隆分析技术
- 优化的单克隆制备工艺
- 单克隆筛选分析技术
- Sanger测序和免疫荧光
- 无菌支原体
- qPCR/WB/FC/核型/off-target（可选）
iPSC基因编辑服务优势
- 干细胞专家：近20年干细胞和基因编辑经验，拥有品种齐全的科研干细胞库。
- 品质保障：自研的α-donor载体HDR系统：HDR效率高达87%，远高于市面上的编辑效率，纯合子交付。选择RNP递送提升gRNA切割效率和转染细胞活率，降低脱靶效率，KO效率高达95%。高品质培养基和标准化操作；质量控制远超行业标准。
- 快速交付：定制快至8周，及时交付率≥99％。
- AI赋能：Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统支持多种策略，实现高达90%以上编辑效率。罕见病数据中心（RDDC）开发的RNA剪接模型工具辅助筛选WB阴性克隆。
- 博士级技术支持：专业的项目管理团队和博士级别专家技术支持。
iPSC基因编辑服务案例
1. 在iPSC AAVS1位点敲入EGFP基因
通过基因编辑技术，在诱导性多能干细胞iPSC中的AAVS1位点敲入EGFP。通过电转法向iPSC中转入RNP复合物和α-donor，成功将EGFP敲入到AAVS1位点。
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图1. （A）iPSC-AAVS1-EGFP 构建策略图；（B）Sanger测序确认EGFP成功敲入靶位点；（C）荧光显微镜观察显示，敲入EGFP标记的细胞显示明亮的EGFP荧光；（D）细胞培养后经G显带进行染色体核型分析，显示染色体数为46数目正常，染色体结构无明显异常；（E）EGFP敲入的iPSC中多能性标记物（NANOG、OCT4和SOX2）的免疫荧光结果，均能检测出阳性信号，表明该敲入细胞具有干性。
2. iPSC/CTCF enhancer（>10kb）敲除细胞株构建（由中山大学眼科中心委托赛业制备）
通过基因编辑技术，在诱导性多能干细胞iPSC中的敲除CTCF enhancer。通过电转法向iPSC中转入RNP复合物，成功敲除>10kb CTCF enhancer。
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图2. （A）iPSC/CTCF enhancer敲除构建策略图；（B）PCR验证敲除克隆，敲除克隆F1R2扩增短条带约1kb，两端接口均扩增不出条带；（C）Sanger测序确认敲除成功，Allele1敲除10604bp，Allele2敲除10605bp。
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