在小鼠模型中实现小核酸药物的肝外递送是一个具有挑战性但正在取得进展的领域。尽管Alnylam公司开发的GalNAc技术在肝脏递送方面取得了显著成功，但在肝外递送方面尚未有革命性突破。以下是一些可以在小鼠模型中实现肝外递送的策略：

1. 利用靶向配体和偶联技术

• GalNAc技术的拓展：虽然GalNAc主要用于肝脏递送，但最新的研究表明，通过对其结构进行调整，GalNAc偶联的siRNA可以实现对中枢神经系统（CNS）、眼睛和肺部的递送。例如，2022年有研究显示，局部给药的C16偶联siRNA能够在啮齿动物和非人灵长类动物的CNS、眼睛和肺部实现有效且持久的基因沉默。

• 其他靶向配体：除了GalNAc，还可以利用其他靶向配体或偶联物来实现肝外递送。例如，使用抗转铁蛋白受体1（TfR1）抗体偶联的siRNA可以实现对骨骼肌、心肌和血管平滑肌的递送。在小鼠模型中，这种抗体偶联的siRNA能够显著降低目标mRNA的水平。

• 脂质偶联物：脂质偶联物如二十二酸（DCA）和磷脂胆碱-DCA（PC-DCA）能够显著改善siRNA的系统分布，并在多种肝外组织（如肌肉、心脏和脂肪）中显示出疗效。这些脂质偶联物通过与血浆脂蛋白和白蛋白结合，延长了siRNA在血液中的循环时间，从而提高了其在肝外组织的积累。

2. 局部给药技术

• 局部注射（IT）：对于某些特定的靶器官，如眼睛、肺部或肿瘤组织，可以通过局部注射的方式直接将小核酸药物递送到目标部位。这种方法可以避免全身给药可能带来的副作用，并且能够提高药物在靶组织中的浓度。例如，在眼科疾病的研究中，通过玻璃体注射将ASO药物递送到眼睛中，能够有效治疗视网膜病变。

• 组织特异性递送：利用组织特异性的递送系统，可以将小核酸药物靶向递送到特定的细胞类型或组织中。例如，通过设计能够识别肿瘤细胞表面标志物的纳米载体，可以将药物特异性地递送到肿瘤组织中。这种方法可以提高药物的疗效，同时减少对正常组织的毒性。

3. 纳米载体技术

• 脂质纳米颗粒（LNP）：脂质纳米颗粒是一种常用的递送系统，可以包裹小核酸药物并将其递送到特定的组织中。通过调整LNP的组成和表面修饰，可以实现对肝外组织的递送。例如，有研究利用氧化胆固醇修饰的LNP将mRNA递送到肝脏微环境中。类似地，通过设计能够靶向特定受体的LNP，可以将小核酸药物递送到其他器官，如肺部或肿瘤组织。

• 聚合物纳米载体：聚合物纳米载体也可以用于小核酸药物的递送。例如，聚乙二醇（PEG）修饰的聚合物纳米载体可以提高药物的稳定性和生物利用度。通过设计具有靶向功能的聚合物纳米载体，可以实现对特定组织的递送。例如，有研究利用聚乙二醇化的聚合物纳米载体将siRNA递送到肿瘤组织中。

4. 化学修饰与稳定性增强

• 化学修饰：为了提高小核酸药物在肝外组织中的稳定性和生物利用度，可以对其进行化学修饰。例如，2'-O-甲基（2'-OMe）、2'-氟（2'-F）和硫代磷酸酯（PS）修饰可以增强siRNA的代谢稳定性。这些修饰可以减少siRNA在体内的降解，从而提高其在靶组织中的积累和疗效。

• 稳定性增强：除了化学修饰，还可以通过设计更稳定的药物结构来提高其在肝外组织中的生物利用度。例如，通过增加siRNA的分子量或调整其亲疏水性，可以延长其在血液中的循环时间，从而提高其在肝外组织的分布。

5. 利用小鼠模型的特点

• 小鼠模型的优势：小鼠模型具有实验操作简便、成本较低和繁殖速度快等优点，适合进行肝外递送的研究。在小鼠模型中，可以通过多种给药途径（如静脉注射、腹腔注射、局部注射等）来研究小核酸药物的递送效果。

• 组织特异性模型：利用特定的小鼠模型，如肿瘤小鼠模型或疾病模型，可以更好地研究小核酸药物在特定组织中的递送和疗效。例如，在肿瘤小鼠模型中，可以通过监测肿瘤组织中的药物分布和疗效来评估递送系统的有效性。

在小鼠模型中实现小核酸药物的肝外递送需要综合运用多种技术和策略。虽然目前在肝外递送方面尚未有革命性突破，但通过靶向配体和偶联技术、局部给药技术、纳米载体技术以及化学修饰等方法，已经取得了一定的进展。未来，随着技术的不断进步和创新，有望进一步提高小核酸药物在肝外组织中的递送效率和疗效，为小核酸药物的临床应用提供更广阔的空间。