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huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠

Name: huSLC6A19/Pah-R243Q人源化小鼠-现货-赛业生物
Brand: 赛业生物 (Cyagen)
SKU: C002064

复苏/繁育服务

产品名称

huSLC6A19/Pah-R243Q

产品编号

C002064

品系全称

C57BL/6NCya-Slc6a19^{tm1(hSLC6A19)}Pah^em2(R243Q)/Cya

品系背景

C57BL/6NCya

品系状态

使用本品系发表的文献需注明： huSLC6A19/Pah-R243Q mice (Catalog C002064) were purchased from Cyagen.

交付类型

周龄

性别

基因型

数量

小计：

询价

HUGO-GT人源化动物模型代谢靶点人源化动物模型疾病动物模型

基本信息

应用领域

验证数据

基因

Pah & SLC6A19

基因别称

NCBI ID

18478 (Mouse) & 340024 (Human)

染色体号

Chr 10 (Mouse)，Chr 5 (Human)

MGI ID

MGI:1921588；MGI:97473

更多详情

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品系介绍

huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠是在Pah-R243Q小鼠（产品编号：C001738）的基础上，将内源性小鼠Slc6a19基因从起始密码子至3'UTR的序列替换为人SLC6A19基因从起始密码子至3'UTR的序列而构建的模型。该模型可用于苯丙酮尿症（PKU）、氨基酸代谢紊乱的研究以及SLC6A19抑制剂的筛选和临床前评价。

参考文献

Wobst HJ, Viader A, Muncipinto G, Hollibaugh R, van Kalken D, Burkhart CT, Cantin SM, Bates RM, Regimbald-Dumas Y, Gross L, Antalek MT, Zweig JE, Wu F, Rettenmaier TJ, Labenski MT, Pullen N, Blanchette HS, Henderson JL, Weng HH, Vaughn TA, Brown DG, Throup JP, Barrish JC. SLC6A19 inhibition facilitates urinary neutral amino acid excretion and lowers plasma phenylalanine. JCI Insight. 2024 Nov 8;9(21):e182876.

构建方案

图1. huSLC6A19小鼠的基因编辑策略。通过基因编辑技术将内源性小鼠Slc6a19基因从起始密码子至3'UTR的序列替换为人SLC6A19基因从起始密码子至3'UTR的序列。小鼠Slc6a19os基因的表达可能受到该KI区域的影响。

图2. Pah-R243Q小鼠基因编辑策略。通过基因编辑技术，将p.R243Q (CGT to CAA) 突变引入至小鼠Pah基因7号外显子中。

1. 测序

测序结果显示，在纯合huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠的肾脏、十二指肠中鼠源Pah基因点突变（CGT→CAA）阳性。

图3. 纯合huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠和野生型（WT）小鼠肾脏（Kidney）、十二指肠（Duodenum）组织的测序结果。

2. 基因表达检测

在双基因纯合huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠和野生型（WT）小鼠的肾脏（Kidney）和十二指肠（Duodenum）组织中，分别使用特异性引物检测人源SLC6A19与鼠源Slc6a19转录本，以鼠源β-actin作为内参基因，计算各基因在每种组织中的相对表达量，数据表示为mean±SD。RT-qPCR结果显示，在huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠的肾脏、十二指肠组织中检测出人源SLC6A19转录本，未检测出鼠源Slc6a19转录本。相比之下，在WT小鼠的肾脏、十二指肠组织中检测出鼠源Slc6a19转录本，未检测出人源SLC6A19转录本。

图4. 通过RT-qPCR检测huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠和野生型（WT）小鼠肾脏（Kidney）和十二指肠（Duodenum）组织中人源SLC6A19与鼠源Slc6a19的转录水平（6~7周龄，雄性，纯合，n=3）。

3. 免疫组织化学（IHC）

IHC结果显示，在纯合huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠的肾脏组织中检测出人源SLC6A19蛋白（红箭头为阳性信号，指向肾小管管腔面），而在WT小鼠的肾脏中未检测出人源SLC6A19蛋白。

图5. huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠和野生型（WT）小鼠肾脏组织的免疫组化（IHC）结果（5~7周龄，♂/♀，纯合，n=2）。

4. 小分子药物药效验证

（A）单次灌胃给予JNT-517*（100 mpk）或溶媒（Vehicle）后，不同时间点血浆（Plasma）苯丙氨酸（Phe）浓度的变化。

（B）给药后0–24 h时间段内尿液（Urinary）Phe浓度的分布情况。尿液Phe数据通过浓度检测获得，由于未记录尿量，无法计算Phe的绝对尿排泄量。

图6. JNT-517对huSLC6A19/Pah-R243Q小鼠血浆（Plasma）和尿液（Urinary）苯丙氨酸（Phe）水平的影响（12~13周龄，雄性，纯合，n=3）。数据以均值±SEM表示。 *该数据由赛业生物合作伙伴提供。 *JNT-517是一种口服小分子变构抑制剂，通过抑制肾脏SLC6A19转运蛋白，促进苯丙氨酸经尿液排泄，用于治疗苯丙酮尿症^[1]。