C-NKG-huTHPO小鼠

C-NKG小鼠是由赛业生物在NOD-Scid背景品系上敲除Il2rg基因而自主研发的一种重度免疫缺陷小鼠，该品系缺乏成熟的T、B和NK免疫细胞，补体活性降低，巨噬细胞对人源细胞的吞噬作用较弱。因此，C-NKG小鼠能够高效地移植人造血干细胞（HSC）、外周血单个核细胞（PBMC）、患者肿瘤组织异种移植（PDX）或成体干细胞和组织。

在免疫学研究领域，人类和小鼠在生理和免疫系统方面存在差异，因此直接在小鼠身上进行的研究并不能完全反映人类的情况。通过将人外周血单个核细胞（PBMC）或人造血干细胞（HSC）移植到免疫缺陷小鼠中，使小鼠的免疫系统部分或全部被人类免疫系统所替代，可以在活体内模拟人类免疫系统的功能，为研究人类免疫系统提供了一个有效的模型。然而在实际的人鼠异种移植中，由于小鼠体内缺乏特定的人类细胞因子和支持基质细胞等，使用一般的免疫缺陷小鼠进行移植很可能造成免疫重建效率的差异。通过基因编辑技术对免疫缺陷小鼠进行改造，在小鼠体内建立人源免疫微环境，促进人源细胞功能成熟，是改善异种移植免疫重建效率的通用策略。

THPO基因（血小板生成素编码基因）负责编码血小板生成素蛋白，该蛋白是造血过程中至关重要的体液生长因子。该基因在肝脏和肾脏中表达最为显著，同时也存在于骨髓、脾脏及横纹肌等其他组织中 ^[1]。作为谱系特异性细胞因子，血小板生成素是血小板生成的主要生理调节因子：其通过与巨核细胞和造血干细胞表面的c-MPL受体结合，促进巨核细胞（即负责血小板生成的骨髓细胞）的增殖与成熟。THPO基因突变与多种疾病相关，包括遗传性血小板增多症（血小板计数异常升高）及先天性无巨核细胞性血小板减少症（出生时血小板严重缺乏） ^[2]。这些病症既可源于血小板生成素的过度分泌，也可因基因功能丧失导致其调节血小板水平的能力受损。通过人源化改造小鼠的血小板生成素（THPO）基因，可有效解决人类造血干细胞与小鼠生长因子之间的物种兼容性问题，有效促进人造血干细胞在小鼠体内的长期维持与自我更新，使未经过辐照预处理的小鼠也能较好地重建人类免疫系统，并能促进造血细胞的多谱系分化 ^[3-4]。

C-NKG-huTHPO小鼠是通过基因编辑技术，在C-NKG品系背景上将小鼠内源性血小板生成素（Thpo）基因编码胞外结构域的序列替换为人类THPO基因编码胞外结构域的序列而构建的模型。小鼠的信号肽予以保留。与C-NKG小鼠相比，C-NKG-huTHPO小鼠在HSC移植研究中能够表达人源血小板生成素，有效促进HSC在小鼠体内的长期维持与自我更新，直接支持HSC分化成各种人类血细胞类型。未经过辐照处理的C-NKG-huTHPO小鼠也能较好地重建人类免疫系统，并支持HSC多谱系分化和人巨核细胞发育 ^[3-4]。该模型为研究HSCs功能受限的造血疾病（如再生障碍性贫血），以及在更具临床相关性的模型中测试THPO新型药物提供了优质实验平台。