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C57BL/6JCya-Cklfem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称:
Cklf-flox
产品编号:
S-CKO-16228
品系背景:
C57BL/6JCya
小鼠资源库
* 使用本品系发表的文献需注明:Cklf-flox mice (Strain S-CKO-16228) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Cklfem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-75458-Cklf-B6J-VA
产品编号
S-CKO-16228
基因名
Cklf
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
C32;CKLF1;CKLF3;CKLF4;CKLF5;Cklf2;Cklf6;UCK-1;HSPC224;1700001C14Rik;1810018M11Rik;A730028G07Rik
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成,建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献,以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1922708 Mice homozygous for a null allele exhibit complete preweaning lethality.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Cklf位于小鼠的8号染色体,采用基因编辑技术,通过高通量电转受精卵方式,获得Cklf基因条件性敲除小鼠,性成熟后取精子冻存。
Cklf-flox小鼠模型是由赛业生物(Cyagen)采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Cklf基因位于小鼠8号染色体上,由3个外显子组成,其中ATG起始密码子在1号外显子,TAG终止密码子在3号外显子。条件性敲除区域(cKO区域)位于1号外显子,包含78个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Cklf基因功能的丧失。Cklf-flox小鼠模型的构建过程包括将核糖核蛋白(RNP)和靶向载体共同注入受精卵。随后,对出生的小鼠进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外,赛业生物(Cyagen)发现,对于携带敲除等位基因的小鼠,表现出完全的断奶前致死性。1号外显子覆盖了编码区域的27.08%。第一个内含子的大小为6189个碱基对。有效的cKO区域大小约为0.4千碱基对。该策略是基于现有数据库中的遗传信息设计的。由于生物过程的复杂性,所有关于loxP插入对基因转录、RNA剪接和蛋白质翻译的风险,在现有技术水平下无法预测。
基因研究概述
CKLF,全称Chemokine-like factor,是一种在脑中可诱导的趋化因子。CKLF通过触发缺陷型线粒体自噬和线粒体功能障碍,诱导小胶质细胞活化和神经炎症。研究发现,CKLF处理后,小胶质细胞中的线粒体自噬标记物如DNM1L、PINK1、PRKN和OPTN水平升高,同时自噬体形成增加,表现为BECN1和MAP1LC3B-II水平的升高。然而,CKLF处理也导致自噬底物SQSTM1的积累,提示线粒体自噬通量降低,自噬体积累。这些发现通过透射电子显微镜和共聚焦显微镜得到证实。研究发现,CKLF处理后,小胶质细胞中受损线粒体的积累是由于溶酶体功能受损,包括自噬体-溶酶体融合、溶酶体生成和酸化受损。进一步分析发现,通过药物阻断或基因沉默线粒体自噬可以抑制CKLF介导的小胶质细胞活化,表现为小胶质细胞标记物AIF1的表达和促炎细胞因子(Tnf和Il6)的mRNA水平降低。最终,CKLF诱导的缺陷型线粒体自噬导致小胶质细胞活化和炎症,为治疗神经炎症性疾病提供了潜在的方法[1]。
CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing member (CMTM)家族是一种新的基因家族,包括CKLF和CMTM1-CMTM8,它们位于不同的染色体上。CMTM家族除了表现出广泛的趋化活性外,还在造血系统、免疫系统、心血管系统和男性生殖系统中发挥着重要作用。近年来,深入研究还发现CMTM与肿瘤的发生、发展和转移密切相关,在多种人类肿瘤中表现出相反的作用。CMTM家族在诊断和治疗与肿瘤和免疫系统相关的疾病方面具有重要的临床价值[2][3]。
CMTM家族成员在非小细胞肺癌的发生、发展和转移中起着重要作用。研究发现,与正常组织相比,CKLF、CMTM1、CMTM3、CMTM4、CMTM7和CMTM8在非小细胞肺癌中的表达显著上调,而CMTM2、CMTM5和CMTM6的表达在非小细胞肺癌中显著下调。单变量和多变量Cox回归分析表明,CKLF是非小细胞肺癌患者总生存期(OS)的独立预后生物标志物。在非小细胞肺癌中,CKLF的表达与免疫细胞浸润、免疫相关功能和免疫检查点基因相关。定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组织化学(IHC)进一步证实了CKLF在非小细胞肺癌中的高表达。总的来说,这项研究表明CKLF参与免疫细胞浸润,并可能作为非小细胞肺癌的重要预后生物标志物,为非小细胞肺癌的治疗提供了新的思路[4]。
综上所述,CKLF和CMTM家族在多种生物学过程中发挥着重要作用,包括神经炎症、肿瘤的发生、发展和转移。CKLF通过触发缺陷型线粒体自噬和线粒体功能障碍,诱导小胶质细胞活化和神经炎症。CMTM家族成员激活并趋化免疫细胞,影响肿瘤细胞的增殖和侵袭。CKLF和CMTM家族的研究有助于深入理解这些基因在生物学过程中的作用,为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。
参考文献:
1. Wang, Hongyun, Ye, Junrui, Peng, Ye, Zhang, Zhao, Chen, Naihong. 2023. CKLF induces microglial activation via triggering defective mitophagy and mitochondrial dysfunction. In Autophagy, 20, 590-613. doi:10.1080/15548627.2023.2276639. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37908119/
2. Wu, Keheng, Li, Xiaoman, Gu, Huadi, Liu, Yingying, Wang, Liang. 2019. Research Advances in CKLF-like MARVEL Transmembrane Domain-containing Family in Non-small Cell Lung Cancer. In International journal of biological sciences, 15, 2576-2583. doi:10.7150/ijbs.33733. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31754330/
3. Lu, Jia, Wu, Qian-Qian, Zhou, Ya-Bo, Zheng, Wei, Liu, Wei. . Cancer Research Advance in CKLF-like MARVEL Transmembrane Domain Containing Member Family (Review). In Asian Pacific journal of cancer prevention : APJCP, 17, 2741-4. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27356683/
4. Li, Dan, Huang, Shenglan, Luo, Chen, Liu, Kan, Wu, Jianbing. 2023. CKLF as a Prognostic Biomarker and Its Association with Immune Infiltration in Hepatocellular Carcinoma. In Current oncology (Toronto, Ont.), 30, 2653-2672. doi:10.3390/curroncol30030202. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36975415/
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