Rnf185-KO 基因敲除小鼠

RNF185是一种包含RING finger结构域的泛素连接酶，参与内质网相关降解（ERAD）过程。该基因在多种生物学过程中发挥重要作用，包括细胞迁移、侵袭、增殖、免疫反应以及肿瘤的发生和发展。

研究表明，RNF185在前列腺癌中发挥抑癌基因的作用。前列腺肿瘤患者数据分析显示，RNF185的表达与前列腺癌的进展和转移呈负相关。在前列腺癌细胞系中，RNF185的敲低会增强细胞的迁移和侵袭能力，而小鼠前列腺癌MPC3细胞稳定表达RNF185 shRNA后，接种到小鼠体内会导致更大的肿瘤和更频繁的肺转移。RNA测序和Ingenuity Pathway分析显示，RNF185敲低的前列腺癌细胞中伤口愈合和细胞运动等通路显著上调。基因集富集分析证实，RNF185低表达的样本和RNF185敲低细胞系中，上皮-间质转化（EMT）相关基因表达失调。其中，COL3A1被确定为RNF185影响迁移表型的关键介质。RNF185敲低的前列腺癌细胞的迁移和转移能力在COL3A1共抑制后减弱。这些结果表明，RNF185是前列腺癌转移的守门人，部分通过控制COL3A1的可用性来实现[1,2]。

RNF185还参与先天免疫反应的调节。研究表明，RNF185与环状GMP-AMP合成酶（cGAS）相互作用，并通过K27连接的泛素化促进cGAS的酶活性。系统性红斑狼疮（SLE）患者中，RNF185 mRNA的表达水平升高。这些发现揭示了RNF185作为cGAS的第一个E3泛素连接酶，在先天免疫反应中调节cGAS活性的机制[3]。

在肝细胞癌（HCC）中，RNF185的 antisense RNA 1（RNF185-AS1）被证明是一种新的致癌lncRNA。RNF185-AS1在HCC组织和细胞系中高表达，其高水平与肿瘤晚期TNM分期、远处转移和较差的总生存率相关。RNF185-AS1的敲低可以抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。此外，RNF185-AS1可以作为miR-221-5p的海绵，并识别整合素β5作为miR-221-5p的靶基因。挽救实验表明，miR-221-5p抑制剂或整合素β5过表达可以恢复RNF185-AS1敲低对细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。此外，RNF185-AS1敲低可以抑制肿瘤生长和转移。这项研究表明，RNF185-AS1/miR-221-5p/整合素β5轴可能是HCC的潜在治疗靶点[4]。

RNF185-AS1在乳头状甲状腺癌（PTC）中也发挥重要作用。RNF185-AS1在PTC肿瘤和细胞中显著过表达，其高水平与肿瘤较大、淋巴结转移和肿瘤-淋巴结-转移（TNM）分期较晚相关。RNF185-AS1的沉默可以抑制细胞在体外和体内的增殖、迁移和侵袭。机制研究表明，RNF185-AS1可以作为miR-429的海绵来调节脂蛋白受体相关蛋白（LRP4）的表达。此外，miR-429的下调或LRP4的上调可以缓解RNF185-AS1敲低对IHH-4和TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。RNF185-AS1的下调可以通过作为miR-429的海绵来抑制LRP4的表达，从而抑制PTC的进展。RNF185-AS1/miR-429/LRP4轴为PTC的未来治疗策略奠定了基础[5]。

RNF185还参与胃癌的转移。研究表明，RNF185直接与JWA相互作用，并促进其在K158位点的泛素化，导致其降解。RNF185的蛋白水平与胃癌组织中JWA的水平呈负相关。高水平的RNF185与较短的生存期相关。此外，RNF185的表达增加可以促进胃癌细胞在体外迁移，并在体内促进胃癌转移，通过下调JWA的表达来实现。然而，通过补充JWA可以逆转这种作用。这些发现表明，RNF185通过泛素-蛋白酶体途径介导JWA的降解来促进胃癌转移，JWA的K158位点对其在胃癌细胞中的泛素化至关重要。这些发现表明，RNF185是胃癌的一个新的预后标志物和潜在的治疗靶点[6]。

此外，研究表明，D-甘露糖可以通过上调RNF185的表达来促进IDH2的降解，从而抑制乳腺癌的生长。D-甘露糖可以增加活性氧（ROS）的产生，而IDH2对于NADPH的生成至关重要。D-甘露糖处理可以上调E3连接酶RNF185的表达，RNF185可以与IDH2相互作用，促进其蛋白酶体降解。因此，D-甘露糖通过抑制IDH2介导的NADPH产生来抑制乳腺癌细胞的增殖，并使乳腺癌细胞对促氧化剂治疗更加敏感。这项研究表明，D-甘露糖可以通过RNF185介导的蛋白酶体降解来降解IDH2，并抑制NADPH的产生，从而抑制乳腺癌细胞的增殖，并使乳腺癌细胞对促氧化剂治疗更加敏感[7]。

RNF185还在囊性纤维化（CF）的病理生理中发挥作用。研究表明，RNF5是CFTR-F508del ERAD的关键E3连接酶，而RNF185是CFTR-F508del ERAD的冗余连接酶。小分子矫正剂可以稳定连续的、RNF5抗性的折叠状态，从而将CFTR-F508del从ERAD中转移。这项研究表明，小分子矫正剂通过稳定连续的、RNF5抗性的折叠状态来将CFTR-F508del从ERAD中转移[8]。

此外，基因组范围的CRISPR/Cas9敲除筛选表明，RNF185是胶质母细胞瘤（GBM）的一个新的肿瘤抑制因子，其表达下调是由启动子高甲基化和miR-587上调引起的。RNF185在两个胶质瘤细胞系中过表达的细胞表型显示，RNF185是一个肿瘤抑制因子。这项研究为GBM的发病机制和治疗方法提供了新的视角[9]。

综上所述，RNF185是一种重要的RING finger结构域蛋白，在多种生物学过程中发挥重要作用。RNF185参与调节细胞迁移、侵袭、增殖、免疫反应以及肿瘤的发生和发展。RNF185的研究有助于深入理解其生物学功能和疾病发生机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。