Tacstd2-KO 基因敲除小鼠

TACSTD2，也称为Trop2，是一种编码跨膜糖蛋白的基因。Trop2是一种细胞内钙信号转导蛋白，在多种癌症中表现出差异性表达，并在细胞自我更新、增殖、侵袭和生存等方面发挥作用。Trop2具有干细胞样的特性，在许多正常组织中都有表达，但在许多癌症中却过度表达，并且这种过度表达具有预后意义。Trop2通过与多种配体相互作用，通过不同的信号通路传导信号，并受到复杂网络中多个转录因子的转录调控。Trop2在癌细胞中的表达与药物耐药性相关。多种策略针对癌细胞上的Trop2，包括抗体、抗体融合蛋白、化学抑制剂、纳米颗粒等。使用这些各种治疗方法的体外研究和临床前研究，在体外和体内的小鼠中显著抑制了肿瘤细胞生长。目前，正在使用IMMU-132（hrS7连接到SN38）对上皮癌患者进行临床试验。这项综述简要描述了过度表达Trop2的癌细胞的各种特征，以及Trop2作为预后生物标志物和治疗靶点的潜在应用，以逆转耐药性[1]。

Trop2基因（TACSTD2）的表达在所有乳腺癌亚型中均可检测到，具有广泛的表达范围。TACSTD2基因表达在HER2+肿瘤中低于HR+/HER2-和TNBC，并且在HER2+富集和Luminal B乳腺癌中更低。TACSTD2表达在I级肿瘤中高于II/III级肿瘤。TACSTD2表达与化疗反应或无复发生存率没有关联。TACSTD2与上皮/粘附基因和增殖基因的表达呈显著正相关，但与免疫基因呈负相关。这些结果表明，TACSTD2在所有乳腺癌亚型中均有表达，尤其是Luminal A和TNBC，并与涉及细胞上皮转化、粘附和增殖的基因的表达相关，这些基因有助于肿瘤生长。这些结果支持在所有乳腺癌亚型中研究TROP2抗体-药物偶联物[2]。

TACSTD2在mCRPC的luminal和基底肿瘤中表达，但在神经内分泌前列腺癌患者中表达较低。与AR-V7表达检测呈阳性相关的患者相比，之前接受过ARSI治疗的患者TACSTD2表达没有显著差异。观察到TROP-2可以作为细胞表面靶点用于分离CTC，这可以作为ADC的预测生物标志物。还证明前列腺癌细胞系异种移植可以在体内被标记的抗TROP-2剂特异性靶向。这些结果表明，TROP-2是mCRPC的潜在治疗和诊断靶点[3]。

TACSTD2表达与某些实体瘤的总体生存期（OS）降低相关，并且TROP2靶向抗体-药物偶联物（ADC）sacituzumab govitecan已获准用于乳腺癌和尿路上皮癌。我们旨在探索与TACSTD2基因表达相关的多组学景观，以确定最有可能从这种方法中获益的患者。根据TACSTD2基因表达，将乳腺癌、结直肠癌、肝细胞癌、胰腺癌和尿路上皮癌分为四分位数，在Caris Life Sciences（亚利桑那州凤凰城）进行下一代DNA测序、全转录组测序和免疫组织化学分析。生存数据从保险索赔中获得，并使用分子定义的队列计算Kaplan-Meier估计。与TACSTD2高肿瘤相关的几种致病性突变包括：乳腺癌、结直肠癌（CRC）、胰腺癌和肝细胞癌中的TP53；胰腺癌和CRC中的KRAS；尿路上皮癌中的ARID1A和FGFR3；肝细胞癌中的CTNNB1。TACSTD2低乳腺癌肿瘤富含CCND1和FGF/R家族成员基因的拷贝数扩增。TACSTD2高通常与更多的免疫细胞浸润和更高的T细胞炎症评分相关。TACSTD2高的乳腺癌、CRC和胰腺癌患者表现出比TACSTD2低肿瘤明显更短的OS。这仅限于微卫星稳定肿瘤的CRC和KRAS突变肿瘤的胰腺癌患者。TACSTD2高的乳腺癌患者在接受免疫检查点抑制剂治疗后也表现出明显更差的OS。TACSTD2表达与关键驱动因子改变和更活跃的免疫微环境相关，这表明可能与TROP2靶向ADC加免疫疗法在各种实体瘤中联合使用[4]。

TROP2/TACSTD2和NECTIN-4/NECTIN-4在aUC中高度表达，其表达状态在两个队列中与患者生存期无关。NECTIN-4/NECTIN-4在Luminal肿瘤中表达较高，在鳞状aUC中降低。NECTIN-4在10.6%的样本中呈阴性，18.4%的样本表达较低（H-score <15）。TROP2阴性率为6.5%。TACSTD2和NECTIN-4表达在神经内分泌样和/或基于蛋白的双重阴性肿瘤中降低。TROP2-和NECTIN-4阴性肿瘤包括1例肉瘤样和4例神经内分泌aUC。FGFR3改变和PD-L1在肿瘤和免疫细胞上的表达与TROP2或NECTIN-4表达无关。TACSTD2/TROP2和NECTIN-4/NECTIN-4在aUC中广泛表达，独立于FGFR3改变或PD-L1表达，因此是aUC中大多数ADC治疗的合适靶点。表达丢失与侵袭性形态分子aUC亚型相关，即神经内分泌样和肉瘤样aUC[5]。

在转移性或局部晚期UC中，治疗选择仅限于化疗和免疫检查点抑制剂。已经开发了新的靶点和药物，如针对nectin-4的enfortumab vedotin和针对TACSTD2基因蛋白产物Trophoblast细胞表面抗原2（TROP-2）的sacituzumab govitecan（SG）的抗体-药物偶联物。研究了TROP-2在UC和其他类型癌症中的表达，以及在不同健康器官的组织中表达，以了解治疗反应和毒性。回顾性分析了42例UC患者、13例其他类型癌症患者和11例正常组织患者的TROP-2蛋白表达。对TROP-2蛋白进行了免疫组织化学染色，使用BenchMark ULTRA IHC/ISH系统（罗氏组织诊断；罗氏诊断有限公司）根据经认证的染色方案，在免疫组织化学实验室的常规免疫组织化学认证和认证设施中进行。观察到TROP-2的不同表达水平，并且观察到UC中TROP-2的最高表达率，与肿瘤分期无关。然而，正常尿路上皮细胞具有相似的表达水平。除了导管原位癌外，在其他类型癌症和来自其他器官的健康组织中，TROP-2的表达降低，包括胰腺、胆囊、结肠和前列腺。鉴于基于TROP-2表达水平的治疗反应，SG几乎在所有UC病例中都是有效的。然而，它也会对正常尿路上皮产生影响[6]。

在当前研究中，我们对六个有亲缘关系的伊朗家庭中的TACSTD2基因进行了突变筛查，这些家庭患有胶状滴状角膜营养不良（GDLD），以找到致病突变。眼科医生通过详细的眼科检查来确认患者的GDLD。为了检测可能的突变，对所有患者进行了TACSTD2基因唯一外显子和其边界区域的直接Sanger测序。GDLD患者的角膜表面表现出不同形状的病变，从轻微到严重形式，这取决于疾病的进展。患者表现出灰色的角膜沉积，呈典型的桑葚状，角膜营养不良伴有角膜脂质沉积和血管化。在TACSTD2基因中进行的靶向Sanger测序揭示了在所有研究家庭中该基因中的致病突变。我们的研究扩大了TACSTD2的突变谱，该基因及其相关症状可以帮助诊断和管理该疾病[7]。

综上所述，TACSTD2是一种编码跨膜糖蛋白的基因，在多种癌症中表现出差异性表达，并在细胞自我更新、增殖、侵袭和生存等方面发挥作用。TACSTD2在乳腺癌、前列腺癌和尿路上皮癌等多种癌症中均有表达，并且其表达水平与患者的预后相关。TACSTD2的表达还与免疫微环境和关键驱动因子改变相关，这表明TACSTD2可能成为各种实体瘤的治疗和诊断靶点。此外，TACSTD2的研究还表明，TACSTD2在GDLD的发病机制中起着重要作用。这些研究结果为深入理解TACSTD2在癌症和GDLD中的作用提供了新的见解，并为疾病的治疗和预防提供了新的思路和策略[2-8]。