Prss34-KO 基因敲除小鼠

Prss34基因编码的蛋白质是小鼠的Mast Cell Protease 11（mMCP-11），属于Mast Cell Tryptase家族。mMCP-11是一种丝氨酸蛋白酶，主要在肥大细胞中储存和分泌，参与多种生物功能。然而，与肥大细胞相比，mMCP-11在嗜碱性粒细胞中的表达更为突出。在正常组织中，mMCP-11主要在骨髓和脾脏中表达，而在其他肥大细胞丝氨酸蛋白酶中则不是这样。研究表明，mMCP-11主要由原代嗜碱性粒细胞表达，并且在过敏炎症和寄生虫感染期间侵入受影响组织的嗜碱性粒细胞中表达。相比之下，原代肥大细胞中mMCP-11的表达水平较低。因此，嗜碱性粒细胞而不是肥大细胞是mMCP-11的主要来源[2]。

为了阐明嗜碱性粒细胞和肥大细胞之间的分化机制，研究人员分析了调节嗜碱性粒细胞特异性酶基因表达的转录因子和表观遗传修饰。研究发现，转录因子C/EBPα和GATA2以及TGF-β信号通路在转录水平上正向调控Prss34基因的表达。C/EBPα和GATA2的敲低实验显示，它们能够显著降低Prss34 mRNA的水平，而TGF-β处理则增加了Prss34 mRNA的水平。此外，组蛋白去乙酰化酶的上调和DNA甲基转移酶的下调也能够上调Prss34 mRNA的水平。这些结果表明，嗜碱性粒细胞特异性蛋白酶基因的表达受到C/EBPα、GATA2、TGF-β信号通路以及表观遗传调控的影响[1]。

在另一个研究中，研究人员发现，RBL-2H3细胞系作为肥大细胞模型，在研究毒物机制方面被广泛使用。然而，尽管RBL-2H3细胞系中存在肥大细胞特征性的β-己糖胺酶基因表达，但并未检测到肥大细胞特征性的蛋白酶——蛋白酶原的表达。研究人员尝试使用BAPNA和tosyl-Gly-Pro-Lys-pNA两种底物，以及酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，均未能在RBL-2H3细胞中检测到蛋白酶原蛋白的释放。进一步研究发现，RBL-2H3细胞中未检测到8种大鼠蛋白酶原基因的表达，尽管这些基因在RBL-2H3细胞的基因组DNA中都有发现。因此，研究人员建议在RBL-2H3细胞脱颗粒研究中使用β-己糖胺酶或其他可靠的标记物，而不是蛋白酶原。这一发现为比较毒理学研究提供了重要的参考信息，提示在体外和体内肥大细胞毒理学研究中需要使用不同的脱颗粒报告分子[3]。

综上所述，Prss34基因编码的mMCP-11是一种在嗜碱性粒细胞中表达的丝氨酸蛋白酶，其在肥大细胞中的表达相对较低。Prss34基因的表达受到C/EBPα、GATA2、TGF-β信号通路以及表观遗传调控的影响。在体外肥大细胞模型RBL-2H3细胞中，mMCP-11的表达较低，因此研究人员建议在RBL-2H3细胞脱颗粒研究中使用其他可靠的标记物。这些研究为深入理解mMCP-11的生物学功能和疾病发生机制提供了重要的基础，并为相关疾病的治疗和预防提供了新的思路和策略。