Kir3dl2-KO 基因敲除小鼠

基因KIR3DL2，也称为CD158k，是自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）家族的成员之一。KIR是一类表达在自然杀伤细胞（NK）表面的受体，负责识别并结合人类白细胞抗原（HLA）I类分子。KIR3DL2在NK细胞表面以二硫键连接的同源二聚体形式存在。每个链由三个免疫球蛋白样结构域和一个长细胞质尾组成，细胞质尾含有两个免疫受体酪氨酸抑制基序。除了在NK细胞上的表达外，KIR3DL2还存在于少数循环的T淋巴细胞上，主要是CD8+ T细胞。尽管KIR基因的数量在不同单倍型之间有所变化，但KIR3DL2是一个存在于所有人的框架基因。KIR3DL2具有独特的基因组调节序列，这表明与其他KIR家族成员相比，KIR3DL2可能具有特定的功能。KIR3DL2的几个配体已被鉴定。与其他KIRs一样，结合HLA I类分子对于NK细胞的发育至关重要，通过促进许可和驱动NK细胞成熟等现象。对于KIR3DL2来说，这包括结合HLA-A3和HLA-A11以及HLA-B27的自由重链形式。此外，KIR3DL2还结合CpG寡核苷酸（ODN）并确保其运输到内体Toll样受体9，从而促进细胞活化。这些特性使KIR3DL2与多种疾病有关，包括强直性脊柱炎和皮肤T细胞淋巴瘤，如Sezary综合征、CD30+皮肤淋巴瘤和转化性蕈样肉芽肿。因此，针对KIR3DL2的新型人源化单克隆抗体（mAbs）对诊断、随访和治疗这些疾病非常有益。此外，使用抗KIR3DL2 mAb IPH4102对皮肤T细胞淋巴瘤进行的新型靶向免疫疗法的初步临床试验正在进行中。在这篇综述中，我们将讨论KIR3DL2对CD4+ T细胞功能的影响，以及如何通过靶向这个受体来开发创新的治疗策略[1]。

成人T细胞白血病（ATL）是一种由人类T细胞白血病病毒1型（HTLV-1）引起的淋巴瘤。ATL分为4个亚型：潜伏型、慢性型、急性型和淋巴瘤型。研究人员发现，KIR3DL2是唯一一个在急性型ATL中频繁表达的NKR，而在淋巴瘤型和慢性/潜伏型ATL中表达较少。此外，KIR3DL2的表达与启动子去甲基化相关。为了探索HTLV-1的作用，研究人员评估了KIR3DL2和TAX mRNA的表达水平。结果显示，TAX mRNA和KIR3DL2蛋白的表达在ATL细胞中相关。HTLV-1感染可以触发CD4+细胞表达KIR3DL2，但TAX单独并不能诱导KIR3DL2的表达。在体外实验中，使用lacutamab（一种新型的抗KIR3DL2人源化抗体）进行自体抗体依赖性细胞毒性，可以特异性地杀死KIR3DL2+的ATL细胞。因此，KIR3DL2的表达与急性型ATL相关。KIR3DL2的转录可能是由HTLV-1感染触发的，并与启动子的低甲基化相关。针对KIR3DL2使用lacutamab的治疗效果正在进一步探索中[2]。

KIR3DL1和KIR3DL2基因拷贝数的变异与中轴型脊柱关节炎有关。研究人员发现，KIR3DL1和KIR3DL2基因拷贝数的变异与中轴型脊柱关节炎的易感性相关。这表明KIR3DL1和KIR3DL2基因的拷贝数变异可能在脊柱关节炎的发病机制中发挥作用[3]。

子痫前期是一种妊娠并发症，其特征为妊娠20周后出现高血压和蛋白尿。子痫前期具有明显的遗传成分。KIR基因的基因多态性可能与子痫前期的遗传易感性相关。研究发现，子痫前期患者的KIR3DL2基因表达明显降低。这可能导致滋养层细胞受到母体免疫细胞的攻击，进而导致早期妊娠中滋养层细胞侵袭不足，引起子宫-胎盘血流不足和胎盘种植缺陷[4]。

在汉族人群中，KIR3DL2等位基因的分布已经确定。研究人员发现，在208个汉族献血者中，133人为KIR3DL2杂合子，75人为KIR3DL2纯合子。共检测到46种KIR3DL2基因型。KIR3DL2*00201、KIR3DL2*00701和KIR3DL2*01001的频率分别为57.45%、13.46%和9.13%。汉族人群的KIR3DL2等位基因分布符合遗传多态性的标准[5]。

在中国汉族人群中，研究人员建立了聚合酶链反应-序列分析（PCR-SBT）方法来鉴定KIR3DL2基因的等位基因。在104个健康、无血缘关系的中国汉族个体中，共观察到18种不同的基因型和8种KIR3DL2等位基因。KIR3DL2*002的频率最高，为0.558。研究还确认了新的KIR3DL2*015等位基因。数据表明，建立的PCR-SBT方法对于KIR3DL2等位基因分型是可靠的，中国汉族人群的KIR3DL2等位基因频率与其他人群存在差异[6]。

KIR2DS4是一种人类组织相容性白细胞抗原（HLA）I类受体，具有对HLA-A*11的特异性结合。KIR2DS4通过与KIR3DL2的基因转换引入了对HLA-A*11的特异性结合，同时降低了与HLA-C的结合亲和力。全长的KIR2DS4可以结合C1+和C2+ HLA-C以及HLA-A*11，而缺失的KIR2DS4则无功能。使用A*1102作为配体可以激活KIR2DS4+的NKL细胞，但不能与A*1101或HLA-C结合。KIR2DS4与其他KIR2DS的区别在于71-72位点的脯氨酸-缬氨酸基序，该基序与KIR3DL2共享，并由基因转换引入，在人类和黑猩猩谱系分离之前。位点定向突变实验表明，这两个残基在很大程度上负责KIR2DS4独特的HLA I类特异性。KIR2DS4的晶体结构测定显示，与KIR2DL相比，有两个主要差异：接触环L2的位移和71、72位点的取代导致的结合潜能改变。功能性KIR2DS4和HLA-A*11在世界范围内的分布相关性表明，它们之间的相互作用在生理上具有重要意义[7]。

新的KIR3DL2等位基因KIR3DL2*113被发现，与KIR3DL2*0020101在密码子345处有一个核苷酸差异[8]。

在B细胞靶向的CAR T细胞治疗中，B细胞靶向的CAR T细胞可以激活CD8+ CARneg旁观者T细胞。在非人灵长类动物（NHP）和患者来源的T细胞上进行单细胞RNA测序，以确定CARneg旁观者T细胞在B细胞靶向CAR T细胞治疗后的表型和转录组特征。使用高度可转化的CD20 CAR NHP模型，研究人员观察到在CAR T细胞扩增过程中出现了一个独特的激活CD8+ CARneg T细胞群体。这些旁观者CD8+ CARneg T细胞表现出独特的转录组特征，上调了自然杀伤细胞标记（KIR3DL2、CD160和KLRD1）、趋化因子和趋化因子受体（CCL5、XCL1和CCR9），下调了幼稚T细胞相关基因（SELL和CD28）。在tisagenlecleucel输注后，患者中也发现了具有相似转录特征的细胞群。机制研究表明，IL-2和IL-15可以以剂量依赖性方式诱导旁观者样CD8+ T细胞。体外激活的和患者来源的具有旁观者表型的T细胞可以通过T细胞受体非依赖性机制有效地杀死白血病细胞。这些数据首次全面识别和分析了B细胞靶向CAR T细胞治疗后的CARneg旁观者CD8+ T细胞，并提示CAR T细胞输注可能通过触发增强的抗白血病反应来发挥作用[9]。

综上所述，KIR3DL2是一种重要的KIR家族成员，参与调节NK细胞和T细胞的功能。KIR3DL2的表达与多种疾病相关，包括强直性脊柱炎、皮肤T细胞淋巴瘤、成人T细胞白血病和子痫前期。KIR3DL2的基因多态性在不同人群中存在差异，这可能与疾病的易感性相关。此外，KIR3DL2与其他KIR家族成员的基因转换和相互作用也影响了其功能和疾病发生。对KIR3DL2的深入研究有助于更好地理解KIR家族在免疫系统和疾病中的作用，为开发新的治疗策略提供理论基础[10]。