Klre1-KO 基因敲除小鼠

Klre1是一种在自然杀伤（NK）细胞上表达的受体，属于C型凝集素超家族。C型凝集素超家族是一类重要的免疫受体，在免疫细胞的功能中发挥着重要作用。Klre1是一种跨膜蛋白，具有一个COOH末端的凝集素样结构域，构成了一种新的KLR家族。Klre1在大鼠中被定位到NK基因复合体中，通过Northern blot和流式细胞术分析，发现Klre1在NK细胞和一部分CD3+细胞上表达，且存在显著的菌株间差异。Western blot分析表明，Klre1可以在NK细胞表面表达为二硫键连接的二聚体。预测的Klre1蛋白不包含免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIMs）或跨膜结构域中的正电荷氨基酸。然而，在重定向裂解试验中，全IgG的存在，而不是抗Klre1抗体的F(ab')2片段，可以抑制Fc受体携带的肿瘤靶细胞的裂解。此外，酪氨酸磷酸酶SHP-1与Klre1从 pervanadate处理的IL-2激活的NK细胞中共同免疫沉淀。这些结果表明，Klre1可能与一个尚未确定的带有ITIM的伴侣形成功能性异源二聚体，招募SHP-1生成抑制性受体复合物[1]。

在大鼠中，NK细胞基因复合体（NKC）编码的受体属于C型凝集素超家族，主要由NK细胞和其他白细胞表达。在大鼠中，从Nkrp1a位点开始到Ly49i8位点的染色体区域，预测含有67个V组C型凝集素超家族基因，使其成为脊椎动物中最大的旁系同源基因聚集区之一。基于这些基因的物理邻近性和系统发育关系，大鼠NKC可以被分为四个主要部分。先前已经报道了大部分属于着丝粒Nkrp1/Clr簇和两个端粒群（Klre1-Klri2和Ly49簇）的基因的cDNA克隆。这里，通过呈现从Cd69到Dectin1的8个基因的cDNA克隆和转录模式，包括新的Clec2m基因，我们填补了Nkrp1/Clr簇和Klre1-Klri2簇之间的空缺。讨论了大鼠NKC的定义、组织和进化[2]。

T细胞在急性肾损伤（AKI）的发病机制中起着重要作用，TCR+CD4-CD8-（双阴性-DN）T细胞具有调节性。然而，与传统的CD4+和CD8+细胞相比，关于DN T细胞的信息有限。为了阐明DN T细胞在AKI期间分子特征和空间动态，我们对分离的鼠DN、CD4+和CD8+细胞进行了单细胞RNA测序（scRNA-seq），并结合正常和AKI后小鼠肾脏的空间转录组分析。scRNA-seq揭示了鼠肾脏DN、CD4+和CD8+ T细胞中独特的转录组特征，与正常肾脏组织中的CD4+和CD8+ T细胞相比，DN T细胞中Kcnq5、Klrb1c、Fcer1g和Klre1的表达富集。使用RT-PCR和NIH人类肾脏精确医学项目（KPMP）验证了这些基因在小鼠肾脏DN、CD4+和CD8+ T细胞中的表达。正常和缺血性小鼠肾脏组织中的空间转录组学显示，在肾外髓质中存在一个表达DN T细胞基因包括Fcer1g的T细胞簇。这些结果为未来DN T细胞以及CD4+和CD8+细胞在正常和疾病肾脏中的研究提供了一个模板[3]。

在鼠系统中，天然杀伤（NK）细胞的细胞溶解活性由NK细胞表面表达的免疫受体控制，这些受体与靶细胞上的MHC I分子相互作用。到目前为止，已从该区域克隆出30多个受体基因，这些基因主要表现出淋巴细胞限制性表达。随着该区域基因组测序的完成，基于部分表达序列标签（EST）证据的基因预测允许识别集群中的潜在新基因。在这项研究中，我们调查了其中一个预测的基因，并表明它是一个真正的基因，在鼠和鼠中转录，但在人类中不存在。系统发育比较还表明，新基因Klre-1与CD94最为相似。值得注意的是，Klre-1基因位于CD94基因非常近的位置（2.3 kb）内。因此，我们通过定量实时聚合酶链反应研究了Klre-1的表达模式，并发现CD94和Klre-1在原代细胞和细胞系中的表达之间存在相关性。这一发现为进一步表征NKC中基因的转录控制提供了可能性[4]。

综上所述，Klre1是一种在NK细胞上表达的受体，属于C型凝集素超家族。Klre1在大鼠中被定位到NK基因复合体中，并通过Northern blot和流式细胞术分析，发现Klre1在NK细胞和一部分CD3+细胞上表达。Klre1可能与一个尚未确定的带有ITIM的伴侣形成功能性异源二聚体，招募SHP-1生成抑制性受体复合物。在大鼠中，NK细胞基因复合体（NKC）编码的受体属于C型凝集素超家族，主要由NK细胞和其他白细胞表达。在大鼠中，从Nkrp1a位点开始到Ly49i8位点的染色体区域，预测含有67个V组C型凝集素超家族基因，使其成为脊椎动物中最大的旁系同源基因聚集区之一。在正常肾脏组织中的DN T细胞中，Klre1的表达富集。此外，Klre-1基因与CD94基因非常近，可能存在一定的相关性。这些发现为进一步研究Klre1在NK细胞功能和免疫调节中的作用提供了基础。