Cnst-KO 基因敲除小鼠

Cnst，也称为Consortin，是一种蛋白质，位于细胞的转高尔基网络中，能够将跨膜蛋白靶向到细胞膜上。尽管Cnst在十多年前就被发现，但其功能的研究仍然不足。在寻找急性髓性白血病（AML）的新标记物时，研究人员发现Cnst在几乎所有AML患者中过度表达。通过分析公共数据库中的数据，发现Cnst的表达与AML患者的总生存期呈负相关。Cnst在不同亚型的AML中表达水平有很大差异，在t(8,21)亚型中表达水平最高，这可能是因为RUNX1-RUNX1T1直接调节Cnst的转录。此外，研究人员分析了Cnst在不同造血系统细胞中的表达，发现Cnst与造血细胞的低分化程度相关，并在白血病干细胞（LSCs）中表达水平最高。最后，分析了Cnst相关的基因网络，发现与Cnst负相关的基因参与了各种免疫相关途径，这表明Cnst可能与免疫逃逸、LSC生态位保留和应激颗粒的组装有关。综上所述，该研究建议Cnst有可能成为AML的诊断和预后生物标志物[1]。

circRNA CNST（circ-CNST）是骨肉瘤（OS）预后的一种新生物标志物。然而，其在OS进展中的作用尚未得到充分记录。通过定量实时聚合酶链反应和Western印迹检测circ-CNST、microRNA（miR）-578、乳酸脱氢酶A（LDHA）和丙酮酸脱氢酶激酶1（PDK1）的表达。通过双荧光素酶报告基因测定确认了物理相互作用。通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四唑溴化物（MTT）试验、集落形成试验、流式细胞术、Transwell试验、异种移植实验和商业试剂盒测量了细胞行为和糖酵解。circ-CNST在人类OS组织和细胞中上调，伴随着miR-578下调和LDHA、PDK1上调。在OS组织中，miR-578表达与circ-CNST或LDHA/PDK1呈负相关。此外，circ-CNST/LDHA/PDK1高表达或miR-578低表达可能预示着较短的总体生存期、TNM分期较晚和淋巴结转移。物理上，miR-578被circ-CNST靶向，miR-578可以靶向LDHA/PDK1。功能上，阻断circ-CNST和恢复miR-578增强了143B和U2OS细胞的凋亡率，并抑制了细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭，伴随着葡萄糖消耗、乳酸产生和腺苷三磷酸（ATP）/腺苷二磷酸（ADP）比率的降低。此外，沉默circ-CNST可以抑制U2OS细胞的体内生长。耗竭miR-578可以抵消circ-CNST缺陷在143B和U2OS细胞中的抑制作用，而LDHA或PDK1的恢复部分逆转了miR-578抑制的作用。circ-CNST敲低可以通过调节miR-578-LDHA/PDK1轴来拮抗OS细胞的恶性行为和糖酵解[2]。

Circular RNA_CNST通过吸附miR-421促进骨肉瘤细胞的肿瘤发生。环状RNA（circRNAs）在包括骨肉瘤（OS）在内的多种恶性肿瘤的进展中起着重要作用。然而，hsa_circ_0017311（circCNST）在OS肿瘤发生中发挥作用的确切机制尚未被充分理解。本研究旨在探讨circCNST在OS肿瘤发生中的作用和机制。通过基因表达综合数据库鉴定了差异表达的circRNAs。通过RNA荧光原位杂交（FISH）和定量实时聚合酶链反应（PCR）分析，分析了circCNST与OS患者临床病理特征和预后的关系。通过MTT、集落形成试验和异种移植肿瘤模型评估circCNST在体外和体内OS细胞中的作用。通过FISH、荧光素酶基因报告和RNA免疫沉淀测定证实circCNST与miR-421特异性结合。结果显示，与相邻的正常组织相比，circCNST在OS组织和细胞系中的表达水平显著升高，并且与OS患者的肿瘤大小和较差的生存率相关。circCNST的敲低抑制了细胞的活力、集落形成和异种移植肿瘤的生长，而circCNST的表达恢复则逆转了这些作用。此外，circCNST与miR-421在细胞质中共同定位，并作为miR-421的海绵，通过靶向SLC25A3减弱了circCNST诱导的OS细胞增殖促进作用。综上所述，我们的研究结果表明，circCNST通过吸附miR-421促进OS细胞的肿瘤发生，并为OS患者提供了潜在的生物标志物[3]。

综上所述，Cnst是一种重要的蛋白质，参与调控跨膜蛋白的定位和AML、OS等疾病的进展。Cnst在不同亚型的AML中表达水平有很大差异，与AML患者的总生存期呈负相关，并与白血病干细胞（LSCs）相关。circ-CNST在OS组织中上调，与miR-578和LDHA/PDK1呈负相关，并通过调节miR-578-LDHA/PDK1轴来拮抗OS细胞的恶性行为和糖酵解。Circular RNA_CNST通过吸附miR-421促进OS细胞的肿瘤发生。这些研究结果为Cnst在AML、OS等疾病中的作用提供了新的见解，并为这些疾病的治疗和预后提供了潜在的生物标志物。