Tent4b-KO 基因敲除小鼠

TENT4b，也称为PAPD5，是一种非典型的多聚腺苷酸聚合酶，负责在RNA的3'端添加非模板核苷酸，从而产生混合的多聚腺苷酸尾巴。这种混合尾巴由腺苷酸和非腺苷酸（如鸟苷酸和胞嘧啶）组成，能够保护mRNA免受快速脱腺苷酸化，从而延长其半衰期和稳定性。TENT4b在细胞内RNA质量控制和病毒RNA稳定性维持中发挥重要作用。

研究表明，TENT4b与TENT4A（PAPD7）一起，通过产生混合尾巴来保护mRNA免受快速脱腺苷酸化。TENT4b的纯化蛋白可以生成一个混合的多聚腺苷酸尾巴，其中最常见的是鸟苷酸。一个鸟苷酸残基足以阻碍脱腺苷酸化酶CCR4-NOT复合体，该复合体可以修剪尾巴并在3'端暴露鸟苷酸。TENT4b的消耗导致细胞中mRNA半衰期和丰度的下降，从而表明TENT4b在保护mRNA免受快速脱腺苷酸化中发挥重要作用[1]。

除了在mRNA稳定性中的作用外，TENT4b还参与RNA的表观遗传修饰。RNA的3'端尿苷化是一种非模板的尿苷添加到RNA末端的过程，是表观遗传修饰的一种形式。尿苷化在调节基因表达中发挥重要作用。研究表明，TENT4b与TUT4和TUT7共同参与RNA的3'端尿苷化。尿苷化可以促进许多多腺苷酸化mRNA的周转，以及缺乏多聚腺苷酸尾巴的依赖复制组蛋白mRNA和结构异常的非编码RNA。此外，尿苷化还可以调节一些microRNA的生物发生，并生成具有改变功能的isomiRs。例如，RNA结合蛋白和原癌基因LIN28A与TUT4一起，通过多尿苷酸化pre-let-7，从而阻断肿瘤抑制因子let-7 microRNA家族的生物发生和功能。相反，Group II pre-miRNA的尿苷化可以创建一个最佳的3'突出部分，从而促进Dicer-TRBP复合物的识别和随后的切割，产生成熟的microRNA。此外，尿苷化可能在非典型microRNA生物发生中发挥作用[2]。

在人卵母细胞到胚胎的转变过程中，TENT4b也发挥着重要作用。研究表明，在人类卵母细胞到胚胎的转变过程中，多聚腺苷酸尾巴的长度和内部非A残基高度动态变化。母体mRNA在脱腺苷酸化或部分降解成3'-UTR后，被重新多聚腺苷酸化，产生多聚腺苷酸降解中间体，同时伴随着非A残基，特别是内部长连续U残基，被新合成的多聚腺苷酸尾巴大量吸收。TUT4和TUT7促进了这些U残基的吸收，BTG4介导的脱腺苷酸化产生了母体mRNA重新多聚腺苷酸化的底物，而TENT4A和TENT4B则促进了内部G残基的吸收。母体mRNA的重塑进一步通过PAIso-seq2得到证实。重要的是，母体mRNA的重塑对于人类胚胎的第一次裂解至关重要。这些发现拓宽了我们对人类卵母细胞到胚胎转变过程中母体mRNA的表观遗传调控的理解[3]。

TENT4b还在病毒RNA的稳定性维持中发挥作用。研究表明，TENT4b与ZCCHC14复合物一起，通过产生混合尾巴来保护病毒RNA免受快速脱腺苷酸化。TENT4A和TENT4B负责产生混合尾巴，并保护HBV和HCMV的poly(A)尾巴。HBV的转录后调控元件（PRE），特别是CNGGN型五联体，是TENT4依赖性调节的关键。HCMV使用类似的五联体，这是一个有趣的趋同进化的例子。这个五联体被ZCCHC14蛋白识别，该蛋白反过来招募TENT4。这些发现揭示了PRE的作用机制，并确定了TENT4-ZCCHC14复合物作为抗病毒疗法的潜在靶点[5]。

TENT4b的活性还可以被化学抑制剂RG7834抑制。RG7834是一种口服可用的小分子，可以抑制宿主RNA多聚腺苷酸聚合酶PAPD5和PAPD7，导致HBV RNA的快速选择性降解，从而减少病毒基因产物的数量。RG7834是一种新型的抗HBV药物，可以代表HBV抗病毒药物的一个全新类别。PAPD5和PAPD7是非典型的细胞特异性多聚腺苷酸聚合酶，也称为TENT4B和TENT4A，它们参与降解低质量的细胞转录本，主要是非编码RNA，并在一些转录本的成熟中发挥作用。它们似乎还在保护一些mRNA免受降解中发挥作用。DHQ的研究结果以及其他最近的研究结果表明，抑制细胞RNA“质量控制系统”的PAPD5/7分支，会导致HBV前基因组、前核心和HBsAg mRNA水平在组织培养和动物模型中显著（多倍）减少，而不是增加。因此，靶向宿主RNA“质量控制系统”可能是一种抗病毒策略[4]。

TENT4b的活性还可以被化学抑制剂RG7834抑制。RG7834是一种口服可用的小分子，可以抑制宿主RNA多聚腺苷酸聚合酶PAPD5和PAPD7，导致HBV RNA的快速选择性降解，从而减少病毒基因产物的数量。RG7834是一种新型的抗HBV药物，可以代表HBV抗病毒药物的一个全新类别。PAPD5和PAPD7是非典型的细胞特异性多聚腺苷酸聚合酶，也称为TENT4B和TENT4A，它们参与降解低质量的细胞转录本，主要是非编码RNA，并在一些转录本的成熟中发挥作用。它们似乎还在保护一些mRNA免受降解中发挥作用。DHQ的研究结果以及其他最近的研究结果表明，抑制细胞RNA“质量控制系统”的PAPD5/7分支，会导致HBV前基因组、前核心和HBsAg mRNA水平在组织培养和动物模型中显著（多倍）减少，而不是增加。因此，靶向宿主RNA“质量控制系统”可能是一种抗病毒策略[4]。

综上所述，TENT4b是一种非典型的多聚腺苷酸聚合酶，负责在RNA的3'端添加非模板核苷酸，从而产生混合的多聚腺苷酸尾巴。这种混合尾巴可以保护mRNA免受快速脱腺苷酸化，从而延长其半衰期和稳定性。TENT4b在细胞内RNA质量控制和病毒RNA稳定性维持中发挥重要作用。此外，TENT4b还参与RNA的表观遗传修饰，如尿苷化，调节基因表达。TENT4b的活性可以被化学抑制剂RG7834抑制，RG7834是一种新型的抗HBV药物，可以代表HBV抗病毒药物的一个全新类别。靶向TENT4b可能是一种有潜力的抗病毒策略。