Rbmx-KO 基因敲除小鼠

RBMX，即RNA结合基序蛋白X连锁，是一种位于X染色体上的核RNA结合蛋白。它属于一个小的蛋白质家族，该家族的其他成员由哺乳动物Y染色体和其他染色体上的同源基因编码。RBMX家族蛋白在正常发育中起着重要作用，并与癌症和病毒感染有关。在分子水平上，RBMX家族蛋白有助于剪接控制、转录和基因组完整性。了解RBMX及其同源基因控制的内源基因和途径将对理解染色体生物学、DNA修复和哺乳动物发育具有重要意义。

RBMX及其同源基因在多种疾病中发挥着重要作用。在急性髓系白血病（AML）中，RBMX和其逆基因RBMXL1被发现是小鼠和人髓系白血病发生所必需的。与正常个体相比，AML原发性患者中RBMX/L1的表达升高，而RBMX/L1的缺失则延迟了白血病的发展。RBMX/L1的缺失导致染色质可及性的显著变化，以及染色体的断裂和间隙。研究发现，RBMX/L1直接结合到mRNA上，影响多个位点的转录，包括CBX5（HP1α），并控制CBX5位点的起始转录。强制CBX5表达挽救了RBMX/L1耗尽对细胞生长和凋亡的影响。总的来说，RBMX/L1通过其下游靶点CBX5调节染色质状态来控制白血病细胞的存活，这些发现揭示了RNA结合蛋白（RBPs）直接促进转录的机制，并表明RBMX/L1和CBX5可能是髓系恶性肿瘤的潜在治疗靶点[1]。

RBMX基因在斑马鱼脑发育中也起着至关重要的作用。斑马鱼rbmx在胚胎发育过程中广泛表达，在胚胎发育的后期阶段，rbmx转录本主要定位于大脑、鳃弓和肝原基。RBMX的功能在胚胎发育过程中通过使用针对rbmx的antisense morpholino进行了研究。RBMX-morphants表现出头部和眼睛发育不全、体型缩小、体节模式缺陷和颌骨缺失。此外，在功能缺失rbmx的情况下，前脑和后脑的特异性标记表达（otx2，krox20）显著降低。这些研究表明，RBMX对正常胚胎发育至关重要，尤其是在大脑发育方面，这与X连锁智力障碍的作用一致[2]。

RBMX还参与了端粒稳定性的维持。端粒重复RNA（TERRA）是一类从染色体的端粒区域转录的长非编码RNA（lncRNA）。TERRA倾向于在端粒处形成R环结构，通过侵入端粒DNA。过度的端粒R环导致端粒不稳定，因此TERRA水平需要得到精细的调节。然而，控制TERRA水平的分子机制和因素仍 largely 未知。研究表明，RNA结合蛋白RBMX是TERRA水平和端粒完整性的新型调节因子。RBMX耗尽细胞的TERRA表达水平显著升高，导致端粒R环形成增强、复制应激和端粒不稳定。RBMX还与TERRA和核外体靶向蛋白ZCCHC8同时结合，并且在RBMX耗尽的情况下，TERRA的降解减慢，这表明RBMX通过调节其转运到核外体来促进TERRA的降解，核外体降解核RNA。总的来说，这些发现揭示了RBMX在TERRA表达调节和端粒完整性维持中的新作用，并将RBMX作为癌症治疗的潜在靶点[3]。

RBMX基因也被认为与X连锁智力障碍综合征（XLID）有关。在一项研究中，研究人员发现了一个23bp的移码缺失，位于RBMX基因中，该基因位于Xq26，在受影响的男性中存在，而在未受影响的男性和对照组数据库中不存在。RBMX基因的功能丧失导致异常的大脑发育，这些发现表明RBMX是XLID的候选基因[5]。

此外，RBMX与肿瘤的发生和发展也有关。在一项研究中，研究人员报告了一种新的RBMX-TFE3基因融合，该融合发生在Xp11易位血管周围上皮样细胞肿瘤（PEComa）中。这种肿瘤发生在一名健康的12岁男孩身上，他出现了一个大的左肾肿块，并扩展到下腔静脉。该患者被诊断为多发肺部转移，并在诊断后的3个月死亡。该肿瘤的形态（上皮样透明细胞，具有肺泡和巢状结构）和免疫表型（TFE3和HMB45强阳性；肌动蛋白、结蛋白和PAX8阴性）与Xp11易位PEComa一致。然而，TFE3重排最初没有通过常规TFE3断裂荧光原位杂交（FISH）检测到。进一步的RNA测序揭示了新的RBMX-TFE3基因融合，随后通过融合检测FISH得到证实，使用定制的RBMX和TFE3融合探针。该报告描述了一种新的TFE3基因融合伙伴，RBMX，在儿科肾PEComa患者中与爆发性临床过程相关。正如其他内染色体Xp11.2易位中所记录的，如与NONO、RBM10或GRIPAP1基因的融合，TFE3断裂可能低于FISH分辨率，导致假阴性结果[4]。

RBMX的表达也与结直肠癌的预后有关。在一项研究中，研究人员发现RBMX在结直肠癌组织中的表达显著高于正常结肠组织。高RBMX表达患者的总生存期（OS）显著低于低表达患者（P=0.04）。RBMX基因的蛋白表达显示出拷贝数扩增、突变和深度缺失。RBMX表达水平与滤泡辅助性T细胞、嗜酸性粒细胞和初始B细胞水平呈正相关（P<0.05）。与RBMX表达显著正相关基因包括HNRNPA1L2、SFRS13A、HNRNPA1等，这些基因主要富集于细胞分裂、mRNA剪接、RNA结合和mRNA 3'-UTR结合等生物学过程。RBMX可能作为ESCA预后不良的生物标志物。RBMX与ESCA患者的生存和预后、基因突变和免疫细胞浸润密切相关[6]。

综上所述，RBMX是一种重要的RNA结合蛋白，在多种生物学过程中发挥着重要作用。RBMX及其同源基因在正常发育、染色质状态维持、端粒稳定性维持、疾病发生和发展中发挥着重要作用。RBMX的研究有助于深入理解RNA结合蛋白的生物学功能和疾病发生机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。