Lrwd1-flox 基因敲除小鼠

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产品名称

Lrwd1-flox 基因敲除小鼠

产品编号

S-CKO-18280

品系全称

C57BL/6JCya-Lrwd1em1flox/Cya

品系背景

C57BL/6JCya

品系编号

CKOCMP-71735-Lrwd1-B6J-VB

品系状态

使用本品系发表的文献需注明: Lrwd1-flox 基因敲除小鼠 mice (Strain S-CKO-18280) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
cKO小鼠库模型

基本信息

基因研究概述

质控标准

基因
基因全称
leucine-rich repeats and WD repeat domain containing 1
基因别称
1200011O22Rik,Orca
染色体号
Chr 5 (Mouse)
转录本 ID
NCBI: NM_027891 | Ensembl: ENSMUST00000006301
修饰方式
条件性基因敲除
靶向范围
Exon 2~5
敲除长度
~2.4 kb
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成,建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献,以获取最准确的表型信息。
表型提示
LRWD1,也称为ORCA(Origin Recognition Complex Associated),是一种核蛋白,在多种生物学过程中发挥着重要作用。LRWD1包含一个WD40结构域,该结构域能够与抑制性的组蛋白标记相互作用,从而维持哺乳动物细胞中异染色质区域的沉默状态[6]。此外,LRWD1还与起源识别复合物(ORC)结合,促进晚期复制起始位点的预复制复合物形成[6]。

LRWD1在发育过程中的作用以及其在体内的功能意义目前尚不清楚。通过基因捕获技术,研究者们生成了Lrwd1基因敲除小鼠,并研究了Lrwd1在胚胎发育过程中的表达情况。研究发现,Lrwd1在大多数发育中的小鼠胚胎中普遍表达。LRWD1的耗竭并没有影响胚胎发育,但同型突变体的出生后生长却受到了抑制[1]。体外培养的耗竭了LRWD1的鼠胚成纤维细胞(MEFs)表现出比野生型细胞更低的增殖能力。此外,LRWD1在MEFs中的敲除增加了表观遗传沉默的重复元件的表达,但对蛋白质编码基因的表达影响较小。这些结果表明,LRWD1通过调节DNA复制在出生后发育中发挥着重要作用,但并非必不可少[1]。

LRWD1基因在人类精子生成过程中也发挥着重要作用。LRWD1基因的表达对于精子生长和成熟至关重要。LRWD1蛋白主要在精子颈部表达,该区域是中心体的所在地。LRWD1在精子生成过程中的作用机制尚未得到深入研究。研究发现,LRWD1的缺乏会导致精子颈部缺陷,从而影响精子运动能力。LRWD1的亚细胞定位显示其在中心体中存在,并且其中心体定位不依赖于微管运输。LRWD1的耗竭不会导致中心体复制,但会抑制微管成核。此外,LRWD1耗竭的细胞还会出现G1期阻滞,细胞周期进展受到抑制。过表达LRWD1可以促进细胞增殖。这些结果表明,LRWD1在控制微管成核和细胞周期进展方面发挥着重要作用[2]。

LRWD1的表达受到DNA甲基化的调控。研究发现,LRWD1启动子上存在一个CpG岛,该区域的甲基化状态与LRWD1的表达水平密切相关。LRWD1启动子的超甲基化与转录活性的降低相关,而5-Aza-2'-脱氧胞苷(5-Aza-dc,甲基化抑制剂)则可以显著提高LRWD1启动子的活性和LRWD1 mRNA及蛋白的表达水平。此外,LRWD1启动子的甲基化状态与精子活性相关。这些结果表明,LRWD1的表达受到DNA甲基化的调控,而LRWD1启动子的甲基化状态可能在男性不育的诊断和治疗中具有重要作用[3]。

LRWD1的表达还受到其他分子的调控。研究发现,microRNA-320a可以通过AGO2/FXR1依赖性途径增强LRWD1的表达,从而影响细胞行为和氧化应激反应。microRNA-320a与LRWD1的表达水平呈正相关,与NT2D1细胞增殖呈正相关,与细胞迁移和侵袭能力呈负相关。此外,microRNA-320a和LRWD1对氧化应激具有响应性,而NRF2的表达则受到microRNA-320a的影响。这些结果表明,microRNA-320a在LRWD1的上调中发挥重要作用,而AGO2/FXR1复合物在microRNA-320a介导的LRWD1上调中起着关键作用[4]。

LRWD1蛋白的稳定性受到其结构域的影响。研究发现,LRR结构域的缺失会显著降低LRWD1蛋白的表达水平。LRR结构域可能通过防止LRWD1蛋白被蛋白酶体介导的降解来维持其稳定性。此外,肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)与LRR缺失的LRWD1蛋白特异性结合,这表明LRR结构域与LRWD1蛋白的稳定性密切相关[5]。

综上所述,LRWD1是一种在多种生物学过程中发挥重要作用的核蛋白。LRWD1通过其WD40结构域与抑制性的组蛋白标记相互作用,维持异染色质区域的沉默状态。LRWD1还与ORC结合,促进晚期复制起始位点的预复制复合物形成。LRWD1在发育过程中发挥着重要作用,但其并非必不可少。LRWD1在精子生成过程中也发挥着重要作用,其表达受到DNA甲基化和microRNA的调控。LRWD1蛋白的稳定性受到其结构域的影响。LRWD1的研究有助于深入理解其在生物学过程中的功能和疾病发生机制,为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。

参考文献:
1. Kang, Tze Zhen Evangeline, Wan, Yi Ching Esther, Zhang, Zhiguo, Chan, Kui Ming. 2022. Lrwd1 impacts cell proliferation and the silencing of repetitive DNA elements. In Genesis (New York, N.Y. : 2000), 60, e23475. doi:10.1002/dvg.23475. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35451548/
2. Wang, Chia-Yih, Hong, Yu-Han, Syu, Jhih-Siang, Lin, Yung-Ming, Teng, Yen-Ni. 2017. LRWD1 Regulates Microtubule Nucleation and Proper Cell Cycle Progression in the Human Testicular Embryonic Carcinoma Cells. In Journal of cellular biochemistry, 119, 314-326. doi:10.1002/jcb.26180. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28569402/
3. Hung, Jui-Hsiang, Cheng, Han-Yi, Tsai, Yung-Chieh, Lin, Yung-Ming, Teng, Yen-Ni. 2021. LRWD1 expression is regulated through DNA methylation in human testicular embryonal carcinoma cells. In Basic and clinical andrology, 31, 12. doi:10.1186/s12610-021-00130-y. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34011267/
4. Lin, Yi-Hsiung, Su, Chia-Hui, Chen, Hsin-Mei, Chiu, Chien-Chih, Teng, Yen-Ni. 2024. MicroRNA-320a enhances LRWD1 expression through the AGO2/FXR1-dependent pathway to affect cell behaviors and the oxidative stress response in human testicular embryonic carcinoma cells. In Aging, 16, 3973-3988. doi:10.18632/aging.205571. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38385979/
5. Tsai, Yung-Chieh, Teng, Yen-Ni, Hung, Jui-Hsiang, Chiu, Chien-Chih, Huang, Bin. 2014. Correlation between leucine rich domain and the stability of LRWD1 protein in human NT2/D1 cells. In Advances in medical sciences, 59, 266-72. doi:10.1016/j.advms.2014.07.002. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25170821/
6. Chan, Kui Ming, Zhang, Zhiguo. 2012. Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1 is recruited to pericentric heterochromatin by trimethylated lysine 9 of histone H3 and maintains heterochromatin silencing. In The Journal of biological chemistry, 287, 15024-33. doi:10.1074/jbc.M111.337980. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22427655/