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Pfpl-flox 基因敲除小鼠

Pfpl-flox 基因敲除小鼠

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复苏/繁育服务
产品名称

Pfpl-flox 基因敲除小鼠

产品编号

S-CKO-11950

品系全称

C57BL/6JCya-Pfplem1flox/Cya

品系背景

C57BL/6JCya

品系编号

CKOCMP-56093-Pfpl-B6J-VA

品系状态

使用本品系发表的文献需注明： Pfpl-flox 基因敲除小鼠 mice (Strain S-CKO-11950) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
cKO小鼠库模型

基本信息

基因研究概述

质控标准

基因
基因全称
pore forming protein-like
基因别称
Epcs5，Epcs50
染色体号
Chr 19 (Mouse)
NCBI ID
转录本 ID
NCBI: NM_019540 | Ensembl: ENSMUST00000168148
修饰方式
条件性基因敲除
靶向范围
Exon 2
敲除长度
~3.9 kb
下载方案
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
表型提示
更多信息
基因Pfpl是一种在真菌中用于高通量蛋白定位实验的载体系统，它通过Gateway重组克隆技术，将基因的启动子和编码序列与增强型青色荧光蛋白、绿色荧光蛋白（GFP）、单体红色荧光蛋白（mRFP）和黄色荧光蛋白或一个核靶向的mCHERRY变体融合。这些载体被整合到农杆菌载体中，以利用农杆菌介导的转化方法高效地转化真菌，并使用潮霉素或卡那霉素抗性进行筛选。

在真菌蛋白定位（pFPL）载体的使用中，mRFP被证明比GFP的谱系变体更适合监测在植物中的分泌蛋白。广泛的测试显示，由Gateway衍生出的融合蛋白产生的定位模式与其“直接融合”的对应物相同。使用带有两个不同选择标记的pFPL载体为真菌细胞用不同的荧光蛋白进行标记提供了一种方便的方法。研究人员已经展示了pFPL载体在识别候选效应蛋白方面的实用性，并强调了在筛选跨宿主质膜转运的蛋白时必须考虑的一些重要因素[1]。

在另一项研究中，研究人员利用pFPL载体系统，在沙漠松露Terfezia boudieri中建立了农杆菌介导的遗传转化系统。这个系统通过优化菌丝外植体的发育阶段、细菌的光密度、感染和共培养时间以及选择抗生素的浓度来建立。pFPL-Rh质粒携带hph基因，提供潮霉素抗性作为选择标记，并携带红色荧光蛋白基因作为可视化报告。最佳条件包括与200 μM乙酰丁香酮共培养，细菌的光密度达到0.3 OD600；转移时间为45分钟；共培养时间为3天。这是关于T. boudieri转化系统的首次报道，提出的方案可以适应其他重要沙漠松露以及外生菌根真菌的转化[2]。

在海洋腹足纲软体动物鲍鱼中，研究人员发现了一种名为abMpeg1的蛋白，它是哺乳动物穿孔素（一种淋巴细胞中的细胞毒素和免疫调节蛋白）的类似物。尽管这三个蛋白的功能尚不清楚，但它们与哺乳动物穿孔素的结构相似性表明它们可能参与细胞杀伤、炎症反应或组织侵袭。与这些假设功能一致，Mpeg1基因家族表现出正达尔文选择（适应性进化）的特征。abMpeg1的穿孔素同源结构域包含穿孔素的细胞毒素“螺旋-转角-螺旋”结构域，支持了abMpeg1是鲍鱼固有免疫系统中的细胞毒素蛋白的观点。abMpeg1的α螺旋是两亲性的，就像穿孔素一样。abMpeg1、哺乳动物Mpeg1和Epcs50之间的保守性表明Mpeg1蛋白代表了一个新型的、古老的、可能具有免疫功能的蛋白家族[3]。

综上所述，基因Pfpl是一种在真菌研究中非常有用的工具，它不仅用于识别候选效应蛋白，而且在建立遗传转化系统以研究真菌生物学方面发挥了重要作用。此外，Pfpl载体的使用为真菌细胞内的蛋白定位提供了高灵敏度和特异性。通过与其他研究领域的结合，如软体动物的免疫蛋白研究，我们可以更深入地了解这些蛋白在细胞生物学和免疫学中的作用。这些研究不仅为真菌学提供了新的见解，而且可能为开发新的生物技术工具和治疗方法提供了基础。

参考文献：
1. Gong, Xiaoyan, Hurtado, Oscar, Wang, Baohua, Goodin, Michael, Farman, Mark. . pFPL Vectors for High-Throughput Protein Localization in Fungi: Detecting Cytoplasmic Accumulation of Putative Effector Proteins. In Molecular plant-microbe interactions : MPMI, 28, 107-21. doi:10.1094/MPMI-05-14-0144-TA. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25390188/
2. Satish, Lakkakula, Kamle, Madhu, Keren, Guy, Kushmaro, Ariel, Sitrit, Yaron. 2020. Agrobacterium tumefaciens-Mediated Genetic Transformation of the Ect-endomycorrhizal Fungus Terfezia boudieri. In Genes, 11, . doi:10.3390/genes11111293. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33143066/
3. Mah, Silvia A, Moy, Gary W, Swanson, Willie J, Vacquier, Victor D. . A perforin-like protein from a marine mollusk. In Biochemical and biophysical research communications, 316, 468-75. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15020241/

资料下载

S-CKO-11950_6J_56093_Pfpl_Exon 2_B_strategy.pdf
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