智鼠故事 
C57BL/6JCya-A4gntem1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
A4gnt-flox
产品编号：
S-CKO-10755
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：A4gnt-flox mice (Strain S-CKO-10755) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-A4gntem1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-333424-A4gnt-B6J-VA
产品编号
S-CKO-10755
基因名
A4gnt
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
Gm798；Alpha4gnt
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:2143261 Mice homozygous for a knock-out allele exhibit gastric adenocarcinoma with increased cell proliferation, angiogenesis, inflammation and gastric mucosal thickness.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
在研小鼠
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
A4gnt位于小鼠的9号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得A4gnt基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
A4gnt-flox小鼠是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。A4gnt基因位于小鼠9号染色体上，包含三个外显子，其中ATG起始密码子位于2号外显子，TAG终止密码子位于3号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于3号外显子，该区域包含约2918个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠A4gnt基因功能的丧失。
A4gnt-flox小鼠模型的构建过程包括使用BAC克隆RP24-170C11作为模板，通过PCR扩增同源臂和cKO区域。随后，将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。出生的小鼠将进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。此外，携带敲除等位基因的小鼠表现出胃腺癌，细胞增殖增加、血管生成增加、炎症和胃黏膜增厚。
基因研究概述
基因A4gnt（也称为α1,4-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶）在生物医学领域中扮演着重要的角色，尤其是在胃黏膜的生理和病理过程中。A4gnt是负责在O-糖链中添加α1,4-N-乙酰氨基葡萄糖（αGlcNAc）的酶，这种修饰对胃黏膜的防御功能至关重要。在胃腺癌中，A4gnt的缺失导致αGlcNAc的缺乏，进而影响胃黏膜的防御机制，导致胃腺癌的发生。此外，A4gnt还与幽门螺杆菌感染和胃癌风险相关，遗传变异可能与幽门螺杆菌感染相关，但与胃癌风险无关。
研究显示，A4gnt/Chst4双基因敲除小鼠的胃黏膜缺乏硫酸黏蛋白，但仍然发展成胃腺癌。然而，这些小鼠在3周大时就出现了严重的胃溃疡，随着年龄的增长，这些病变伴随着深部囊性胃炎（GCP）的发生。与仅显示增生的年龄匹配的A4gnt敲除小鼠相比，5周大的A4gnt/Chst4双基因敲除小鼠的胃黏膜中Cxcl1、Cxcl5、Ccl2和Cxcr2的转录水平显著上调。然而，这些基因的上调在50周大的A4gnt/Chst4双基因敲除小鼠中消失，这些小鼠显示出高级别不典型增生/腺癌和GCP。此外，与仅显示腺癌的年龄匹配的A4gnt敲除小鼠相比，A4gnt/Chst4双基因敲除小鼠中的Cxcl1和Cxcr2的表达下调[1]。
另一项研究显示，口服添加Euglena gracilis和其储备多糖paramylon可以减少A4gnt敲除小鼠中胃黏膜的炎症反应。这些小鼠是自发发展成胃腺癌的突变小鼠模型，通过口服添加Euglena和paramylon，研究人员观察到了这些物质对A4gnt敲除小鼠早期病变的影响。研究发现，Euglena和paramylon的添加可以减少胃黏膜中的炎症细胞浸润，并下调炎症相关基因的表达。这些结果表明，Euglena和paramylon可能通过影响胃黏膜的炎症反应来改善A4gnt敲除小鼠的早期病变[2]。
此外，研究还发现，胃腺黏蛋白在预防小鼠的胃癌中起着关键作用。缺乏αGlcNAc表达的小鼠自发发展成胃腺癌，这表明αGlcNAc在抑制幽门螺杆菌感染和抑制肿瘤促进炎症方面发挥着重要作用。这些结果进一步证明了αGlcNAc-终止的胃腺黏蛋白在预防胃癌中的双重作用[3]。
综上所述，基因A4gnt在胃黏膜的生理和病理过程中发挥着重要作用。A4gnt的缺失导致胃黏膜防御机制的破坏，从而促进胃腺癌的发生。此外，A4gnt还与幽门螺杆菌感染和胃癌风险相关。进一步研究A4gnt的功能和作用机制有助于深入理解胃黏膜的生理和病理过程，为胃癌的预防和治疗提供新的思路和策略。
参考文献：
1. Kawakubo, Masatomo, Komura, Hitomi, Goso, Yukinobu, Fukuda, Minoru, Nakayama, Jun. 2019. Analysis of A4gnt Knockout Mice Reveals an Essential Role for Gastric Sulfomucins in Preventing Gastritis Cystica Profunda. In The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society, 67, 759-770. doi:10.1369/0022155419860134. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31246144/
2. Iida, Masataka, Desamero, Mark Joseph, Yasuda, Kosuke, Kakuta, Shigeru, Hirayama, Kazuhiro. 2021. Effects of orally administered Euglena gracilis and its reserve polysaccharide, paramylon, on gastric dysplasia in A4gnt knockout mice. In Scientific reports, 11, 13640. doi:10.1038/s41598-021-92013-5. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34210998/
3. Karasawa, Fumitoshi, Shiota, Akira, Goso, Yukinobu, Ishihara, Kazuhiko, Nakayama, Jun. 2012. Essential role of gastric gland mucin in preventing gastric cancer in mice. In The Journal of clinical investigation, 122, 923-34. doi:10.1172/JCI59087. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22307328/
