智鼠故事 
C57BL/6JCya-Abcd2em1flox/Cya 条件性基因敲除小鼠
复苏/繁育服务
产品名称：
Abcd2-flox
产品编号：
S-CKO-09687
品系背景：
C57BL/6JCya
* 使用本品系发表的文献需注明：Abcd2-flox mice (Strain S-CKO-09687) were purchased from Cyagen.
交付类型
周龄
性别
基因型
数量
只
基本信息
品系名称
C57BL/6JCya-Abcd2em1flox/Cya
品系编号
CKOCMP-26874-Abcd2-B6J-VA
产品编号
S-CKO-09687
基因名
Abcd2
品系背景
C57BL/6JCya
基因别称
ALDR；ABC39；ALDL1；ALDRP
NCBI号
修饰方式
条件性基因敲除
品系说明
该品系是基于策略设计时的数据库信息制作而成，建议您在购买前查询最新的数据库和相关文献，以获取最准确的表型信息。
小鼠表型
MGI:1349467 Mice homozygous for a disruption in this gene exhibit a late-onset cerebellar and sensory ataxia, loss of Purkinje cells, dorsal root ganglia cell degeneration, axonal degeneration in the spinal cord, and an accumulation of very long chain fatty acids.
质控标准
精子检测
① 冷冻前验证精子活力观察
② 冷冻验证每批次进行复苏验证
品系状态
活体
环境标准
SPF
供应地区
中国
品系详情
Abcd2位于小鼠的15号染色体，采用基因编辑技术，通过高通量电转受精卵方式，获得Abcd2基因条件性敲除小鼠，性成熟后取精子冻存。
Abcd2-flox小鼠模型是由赛业生物（Cyagen）采用基因编辑技术构建的条件性敲除小鼠。Abcd2基因位于小鼠15号染色体上，由10个外显子组成，其中ATG起始密码子在1号外显子，TAA终止密码子在10号外显子。条件性敲除区域（cKO区域）位于2号外显子，包含181个碱基对的编码序列。删除该区域会导致小鼠Abcd2基因功能的丧失。
Abcd2-flox小鼠模型的构建过程包括使用BAC克隆RP24-109D10作为模板，通过PCR生成同源臂和cKO区域。随后，将核糖核蛋白（RNP）和靶向载体共同注入受精卵。出生后的小鼠将进行PCR和测序分析进行基因型鉴定。
携带敲除等位基因的Abcd2-flox小鼠表现出晚发性小脑和感觉性共济失调、浦肯野细胞丧失、背根神经节细胞变性、脊髓中轴突变性以及非常长链脂肪酸的积累。敲除2号外显子会导致基因移码，覆盖8.14%的编码区域。5'-loxP位点插入的1号内含子大小为1654 bp，3'-loxP位点插入的2号内含子大小为6032 bp。有效的cKO区域大小约为0.7 kb。
该模型可用于研究Abcd2基因在小鼠体内的功能，并为进一步探索相关生物学过程提供重要的动物模型。
基因研究概述
ABCD2，也称为ALDR，是一种编码过氧化物酶体膜ABC转运蛋白的基因。它与其他ABC转运蛋白基因，如ABCD1和ABCD3，具有高度的同源性。ABCD1基因的突变会导致X-连锁肾上腺脑白质营养不良（X-ALD），这是一种罕见的神经退行性疾病，其特征是极长链脂肪酸（VLCFA）的β-氧化受损，导致这些脂肪酸在体内积累。ABCD2基因的过度表达已被证明可以部分补偿ABCD1的缺陷，从而恢复VLCFA的β-氧化，减轻X-ALD的病理表现[1,2,3,4]。
甲状腺激素（T3）及其受体TRβ已被证明可以诱导ABCD2基因的表达。T3通过其受体TRβ可以诱导肝细胞中Abcd2的表达，并在Abcd1基因缺陷的纤维母细胞中暂时性正常化VLCFA水平[2,3]。此外，T3诱导的ABCD2基因表达还可以在髓鞘形成细胞中被观察到，这表明T3可能在髓鞘形成过程中发挥重要作用[3]。除了T3，甲状腺激素类似物（thyromimetics）也被证明可以诱导ABCD2基因的表达。在体外实验中，两种特定的TRβ激动剂（GC-1和CGS 23425）被证明可以剂量依赖性地诱导ABCD2基因的表达，并且在X-ALD纤维母细胞中，这种诱导作用可以持续到10天[2]。
此外，胆固醇和肝X受体（LXR）也被证明可以影响ABCD2基因的表达。胆固醇水平的升高可以激活肝X受体，进而抑制ABCD2基因的表达[6]。然而，LXR拮抗剂，如22S-羟基胆固醇，可以诱导ABCD2基因的表达，这可能为X-ALD的治疗提供了新的策略[5]。此外，PPARα激动剂（如纤维酸）也被证明可以诱导ABCD2基因的表达，这可能通过PPARα与ABCD2基因启动子上的PPRE序列相互作用来实现[4]。
最后，β-连环蛋白（β-catenin）和TCF-4也被证明可以直接调节ABCD2基因的表达。β-catenin和TCF-4的结合可以显著增强ABCD2基因启动子的活性，从而增加ABCD2基因的表达[7]。此外，ABCD2基因的表达还受到免疫细胞的影响。在BV-2小胶质细胞中，极长链脂肪酸的积累会导致小胶质细胞的免疫功能受损，包括吞噬能力下降、炎症因子释放增加和T细胞激活反应上调[8]。
综上所述，ABCD2基因的表达受到多种因素的调节，包括甲状腺激素、胆固醇、LXR、PPARα、β-catenin、TCF-4和免疫细胞。这些调节机制可能为X-ALD的治疗提供了新的策略和思路。
参考文献：
1. Trompier, Doriane, Gondcaille, Catherine, Lizard, Gérard, Savary, Stéphane. 2014. Regulation of the adrenoleukodystrophy-related gene (ABCD2): focus on oxysterols and LXR antagonists. In Biochemical and biophysical research communications, 446, 651-5. doi:10.1016/j.bbrc.2014.01.025. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24480443/
2. Genin, Emmanuelle C, Gondcaille, Catherine, Trompier, Doriane, Savary, Stéphane. 2009. Induction of the adrenoleukodystrophy-related gene (ABCD2) by thyromimetics. In The Journal of steroid biochemistry and molecular biology, 116, 37-43. doi:10.1016/j.jsbmb.2009.04.006. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19406244/
3. Fourcade, Stéphane, Savary, Stéphane, Gondcaille, Catherine, Molzer, Brunhilde, Bugaut, Maurice. . Thyroid hormone induction of the adrenoleukodystrophy-related gene (ABCD2). In Molecular pharmacology, 63, 1296-303. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12761339/
4. Fourcade, S, Savary, S, Albet, S, Berger, J, Bugaut, M. . Fibrate induction of the adrenoleukodystrophy-related gene (ABCD2): promoter analysis and role of the peroxisome proliferator-activated receptor PPARalpha. In European journal of biochemistry, 268, 3490-500. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11422379/
5. Gondcaille, Catherine, Genin, Emmanuelle C, Lopez, Tatiana E, Trompier, Doriane, Savary, Stéphane. . LXR antagonists induce ABCD2 expression. In Biochimica et biophysica acta, 1841, 259-66. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24239766/
6. Weinhofer, Isabelle, Forss-Petter, Sonja, Zigman, Mihaela, Berger, Johannes. . Cholesterol regulates ABCD2 gene expression: implications for X-linked adrenoleukodstrophy. In Advances in experimental medicine and biology, 544, 331-2. doi:. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14713249/
7. Park, Chul-Yong, Kim, Han-Soo, Jang, Jiho, Lee, Dongjin R, Kim, Dong-Wook. 2013. ABCD2 is a direct target of β-catenin and TCF-4: implications for X-linked adrenoleukodystrophy therapy. In PloS one, 8, e56242. doi:10.1371/journal.pone.0056242. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23437103/
8. Tawbeh, Ali, Raas, Quentin, Tahri-Joutey, Mounia, Gondcaille, Catherine, Savary, Stéphane. 2023. Immune response of BV-2 microglial cells is impacted by peroxisomal beta-oxidation. In Frontiers in molecular neuroscience, 16, 1299314. doi:10.3389/fnmol.2023.1299314. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38164407/
