Rhov-flox 基因敲除小鼠

RHOV，也称为Chp/RhoV，是一种非典型的Rho家族GTPase。Rho家族GTPases是一类分子开关，通过调节多种细胞过程，包括恶性转化，在细胞内发挥重要作用。RHOV在正常大鼠肺组织中表达，但在人类正常肺组织中则不表达。研究发现，RHOV基因在多种人类癌症细胞系中表达，包括非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系A549，并且在大多数研究的肺癌肿瘤中上调表达。RHOV基因的表达与患者生存期短相关，因此被认为可能是NSCLC的潜在诊断或预后标记，并且其过表达可能与肿瘤发生有关[1]。

RHOV在肺腺癌（LUAD）细胞生长和转移中发挥重要作用。研究发现，RHOV在LUAD细胞中的过表达可以促进细胞增殖、迁移和侵袭，而RHOV敲低则抑制这些生物学行为。此外，RHOV敲低可以抑制LUAD肿瘤在小鼠中的生长和转移。RHOV通过激活Jun N末端激酶（JNK）/c-Jun信号通路，调节上皮-间质转化（EMT）标记物的表达，进而影响癌细胞的迁移、侵袭和转移。RHOV诱导的恶性生物学行为可以被JNK抑制剂pyrazolanthrone抑制。这些发现表明RHOV在LUAD转移中具有关键作用，并可能成为LUAD预后预测的生物标志物和治疗靶点[2]。

RHOV信号传导受SH3结构域结合蛋白和PKA磷酸化的调节。研究发现，RHOV与SH3结构域结合蛋白，如GRB2和NCK2相互作用，并且其N末端区域的脯氨酸丰富（PR）基序是SH3结构域结合蛋白的关键结合位点。此外，RHOV的N末端区域的Ser25可以被PKA磷酸化，而NCK2的相互作用可以抑制RHOV的磷酸化，而GRB2的相互作用则不影响RHOV的磷酸化。这些结果表明，RHOV的磷酸化和与SH3结构域结合蛋白的相互作用是其信号传导的重要调节机制[3]。

RHOV的过表达可以促进肺腺癌的进展和EGFR-TKI耐药性。研究发现，RHOV在肺腺癌患者肿瘤中的表达显著上调，并且与患者生存期短相关。沉默RHOV表达可以抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和致瘤性。此外，RHOV敲低可以促进EGFR-TKI在吉非替尼耐药的PC9细胞（PC9-GR）中的敏感性，并且加剧吉非替尼诱导的肺癌细胞凋亡。这些数据表明，RHOV诱导的肺腺癌进展和EGFR-TKI耐药性可能与AKT/ERK通路的激活有关。因此，RHOV可能是肺腺癌的一个有希望的预后和治疗靶点[4]。

外泌体hsa_circ_0000519通过miR-1258/RHOV轴调节NSCLC细胞的生长和转移。研究发现，circ_0000519、miR-1258和RHOV在NSCLC患者血清样本和细胞系中的表达水平上调。circ_0000519的敲低可以抑制细胞生长和转移，而circ_0000519的过表达则促进细胞生长和转移。circ_0000519被外泌体携带，并且circ_0000519的敲低可以抑制细胞生长和转移。miR-1258在NSCLC细胞中下调表达，并被circ_0000519靶向。RHOV被miR-1258靶向，并且在NSCLC细胞中上调表达。miR-1258敲低或RHOV过表达可以减弱circ_0000519敲低对细胞生长和转移的影响。这些发现表明，外泌体circ_0000519的敲低可以通过miR-1258/RHOV轴抑制NSCLC细胞的生长和转移，为NSCLC的发生和治疗提供了新的见解[5]。

RHOV在不同类型的肿瘤中具有不同的预后意义。研究发现，RHOV在多种类型的肿瘤中表达失调，并且是7种肿瘤的独立预后因素。RHOV表达与肾肾细胞癌和前列腺腺癌患者的良好预后相关，而在腺样囊性癌、肺腺癌、胰腺导管腺癌、皮肤黑色素瘤和葡萄膜黑色素瘤中，RHOV表达与患者的不良预后相关。此外，RHOV表达与不同类型的肿瘤浸润免疫细胞相关，并且可能影响肿瘤对免疫治疗的反应。RHOV相关基因的功能富集分析表明，RHOV参与多种发育和免疫相关过程。这些发现表明，RHOV在不同类型的肿瘤中可能作为肿瘤抑制因子或原癌基因发挥作用[6]。

RhoV是三阴性乳腺癌（TNBC）转移的促进因子。研究发现，RhoV在TNBC中经常上调表达，并且与患者的不良预后相关。RhoV的敲低可以显著抑制细胞侵袭、迁移和转移，而RhoV的过表达则促进细胞侵袭、迁移和转移。此外，p-EGFR与RhoV相互作用，激活RhoV的下游信号通路，从而促进肿瘤转移。这些发现表明，RhoV是TNBC转移的关键调节因子，并且可能成为TNBC治疗的新靶点[7]。

RHOV介导了由破骨细胞分化引起的RAW264.7巨噬细胞的凋亡。研究发现，RANKL和M-CSF诱导的破骨细胞分化过程中，除了少数RAW264.7巨噬细胞分化为破骨细胞外，几乎所有未分化的RAW264.7巨噬细胞都发生了凋亡。OPG可以完全抑制RAW264.7巨噬细胞分化为破骨细胞，并且可以抑制RAW264.7巨噬细胞的凋亡。Rac1、RhoA和RhoV是Rho GTPase家族中的凋亡相关基因。在破骨细胞分化过程中，RhoV的mRNA表达水平显著上调，而在巨噬细胞凋亡被OPG抑制时，RhoV的表达水平显著下调。然而，Rac1和RhoA的表达水平并没有随着RAW264.7巨噬细胞的凋亡率的变化而变化。这些结果表明，RAW264.7巨噬细胞分化为破骨细胞导致其凋亡，OPG抑制RAW264.7巨噬细胞分化为破骨细胞，从而抑制RAW264.7巨噬细胞的凋亡。RhoV介导了RAW264.7巨噬细胞在破骨细胞分化过程中的凋亡[8]。

RHOV、ABCC2和CYP4B1的预后模型可以预测肺腺癌的预后并与其免疫浸润相关。研究发现，淋巴结转移相关基因RHOV、ABCC2和CYP4B1与肺腺癌患者的不良预后相关。基于RHOV、ABCC2和CYP4B1的预后模型可以预测肺腺癌患者的预后，并且与免疫浸润相关。高风险肺腺癌患者的预后较差，并且风险评分与肿瘤纯度、T细胞、自然杀伤细胞和其他免疫细胞相关。该预后模型可能通过DNA复制、细胞周期、P53和其他信号通路影响肺腺癌的进展。这些发现表明，淋巴结转移相关基因RHOV、ABCC2和CYP4B1与肺腺癌的不良预后相关，并且基于RHOV、ABCC2和CYP4B1的预后模型可以预测肺腺癌患者的预后并与其免疫浸润相关[9]。

RHOV的效应结构域中的突变可以影响其与Pak1蛋白激酶的结合。研究发现，RHOV GTPase的效应结构域中的突变（Y60K、T63A、L65A和D66A）可以损害其在GST-PAK-PBD下拉试验和共免疫沉淀中的Pak1相互作用。这些结果表明，RHOV的效应结构域介导其与Pak1的结合，补充了RHOV与Pak家族效应蛋白结合的分子基础。这些数据为RhoV激活的信号通路和细胞过程中Pak1的作用的进一步研究奠定了基础[10]。

综上所述，RHOV是一种非典型的Rho家族GTPase，在多种细胞过程中发挥重要作用。RHOV在肺癌、三阴性乳腺癌和破骨细胞分化中发挥重要作用，并且可能成为这些疾病的潜在治疗靶点。RHOV的表达与患者的预后相关，并且可以影响肿瘤对免疫治疗的反应。此外，RHOV的信号传导受SH3结构域结合蛋白和PKA磷酸化的调节，并且RHOV的效应结构域中的突变可以影响其与Pak1蛋白激酶的结合。因此，RHOV的研究有助于深入理解Rho家族GTPases的生物学功能和疾病发生机制，为疾病的治疗和预防提供新的思路和策略。